研究背景:骨關節(jié)炎（osteoarthritis,OA）是最常見的關節(jié)炎類型。它是一種致殘、遲發(fā)和退行性疾病,特點是關節(jié)軟骨和滑膜炎癥消失,導致關節(jié)僵硬、腫脹、疼痛和活動性喪失。從流行病學的角度來看,目前骨關節(jié)炎影響全世界約半數(shù)的年齡超過65歲的人群,被認為是首要致殘原因之一。盡管人工關節(jié)置換能有效地使晚期骨關節(jié)炎患者恢復關節(jié)功能、提高生活質量,然而在疾病早期由于缺乏特定的癥狀或體征,很難診斷。因此,迫切需要新的生物標志物用來診斷和治療早期骨關節(jié)炎。骨關節(jié)炎最初被認為是一種與炎癥無關的磨損性疾病,而如今由于分子生物學的出現(xiàn),它正被重新定義為一種復雜的、多因素疾病。骨關節(jié)炎發(fā)生過程中,軟骨損傷與炎癥基因上調有關,后者可以通過多種信號通路的轉導引發(fā)軟骨損傷。此外,炎癥因子還可以導致包括MMP和整合素在內的蛋白酶類表達增加,使關節(jié)軟骨胞外基質發(fā)生降解而加重病情。另外,軟骨細胞是關節(jié)軟骨的重要組成成分,正常情況下軟骨細胞的代謝十分活躍,對維持軟骨的正常結果和功能有著重要作用。當炎癥因子通過MAPK、NF-Kappa B等胞內信號通路的轉導傳遞給轉錄因子,使軟骨細胞分化變?yōu)槔w維細胞樣的表型,促使... 

【文章來源】：山東大學山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：87 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
符號說明
第一章 引言
    1.1 骨關節(jié)炎概述
    1.2 非編碼RNA
    1.3 長鏈非編碼RNA HULC
    1.4 MAPK和NF-κB信號通路在骨關節(jié)炎中的重要作用
    1.5 研究內容與意義
第二章 實驗材料及方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗對象及標本處理
        2.1.2 細胞系
        2.1.3 引物
        2.1.4 表達載體構建
        2.1.5 抗體信息及稀釋倍數(shù)
        2.1.6 主要實驗試劑
        2.1.7 主要實驗儀器
        2.1.8 磷酸鹽緩沖液PBS配制
        2.1.9 瓊脂糖凝膠電泳溶液配制
        2.1.10 TBST溶液配制
        2.1.11 PMSF配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 給藥處理
        2.2.3 質粒轉染
        2.2.4 實時定量PCR檢測
        2.2.5 western blot蛋白表達檢測
        2.2.6 CCK-8細胞活力試驗
        2.2.7 流式細胞術
        2.2.8 雙熒光素酶報告基因實驗
        2.2.9 酶聯(lián)免疫吸附測定
        2.2.10 生物素-親和素RNA Pull-down實驗
        2.2.11 RNA免疫沉淀
        2.2.12 統(tǒng)計學分析
第三章 實驗結果
    3.1 骨關節(jié)炎患者軟骨組織中HULC表達下調
    3.2 TNF-α誘導的ATDC5細胞炎性損傷模型建立
    3.3 HULC能夠減輕TNF-α誘導的軟骨細胞炎性損傷
    3.4 HULC可以直接與miR-101靶向結合
    3.5 HULC通過調節(jié)miR-101的表達減輕TNF-α誘導的ATDC5細胞炎性損傷
    3.6 HULC通過下調miR-101抑制了NF-κB和MAPK信號通路的激活
第四章 討論
結論
附圖、表
參考文獻
致謝
攻讀學位期間發(fā)表的學術論文
學位論文評閱及答辯情況
外文論文


【參考文獻】：
期刊論文
[1]骨關節(jié)炎:關節(jié)軟骨退變的相關研究與進展[J]. 竇曉麗,段曉琴,夏玲,袁望舒,曲福玲,羅媛媛,劉忠良.  中國組織工程研究與臨床康復. 2011(20)



本文編號：3187705