目的星形膠質細胞發(fā)揮著與神經元功能相關的重要生理作用。在中樞神經系統(tǒng)（CNS）損傷后,它們通過形態(tài)學和功能改變（例如反應性膠質增生）被激活以參與神經病理學過程。星形膠質細胞也可以作為免疫效應細胞,在損傷刺激后產生大量趨化因子和細胞因子,這可能加劇組織損傷的程度。巨噬細胞遷移抑制因子（MIF）是一種促炎細胞因子,可促進受損脊髓星形膠質細胞中炎性細胞因子的產生。它是否能夠促進星形膠質細胞釋放趨化因子仍然未闡述清楚。本文擬研究脊髓損傷后促炎因子MIF和星形膠質細胞釋放趨化因子之間的關系及其分子調控機制。方法成年雄性SD大鼠進行脊髓（T8-T10）砸傷,構建脊髓損傷模型;脊髓損傷后0d、1d、4d、7d四個時間點分別取材或灌注后再取材;Western blot檢測脊髓損傷后的MIF蛋白表達情況,ELISA、免疫熒光等檢測損傷后CCL5的表達情況;采用siRNA干擾CD74受體后,進行轉錄組測序和生物信息學分析;取新生1-3天的SD大鼠的脊髓進行星形膠質細胞的體外原代培養(yǎng),用MIF重組蛋白,聯(lián)合或不聯(lián)合MIF特異性抑制劑4-IPP處理星形膠質細胞,ELISA檢測CCL5的表達,驗證轉錄組測序結果... 

【文章來源】：南通大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：54 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 緒論
第二章 材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 實驗動物
        2.1.2 實驗試劑及相關耗材
        2.1.3 試劑配制
        2.1.4 實驗儀器
    2.2 方法
        2.2.1 大鼠脊髓損傷（SCI）砸傷模型的建立
        2.2.2 細胞培養(yǎng)
        2.2.3 Western blot
        2.2.4 ELISA
        2.2.5 組織免疫熒光
        2.2.6 免疫共沉淀
        2.2.7 總RNA提取
        2.2.8 總蛋白提取
        2.2.9 Real-time PCR
        2.2.10 Transwell遷移實驗
        2.2.11 mRNA的測序
        2.2.12 生物信息學分析
        2.2.13 統(tǒng)計學分析
第三章 結果
    3.1 MIF促進受損大鼠脊髓星形膠質細胞中趨化因子CCL5的表達
        3.1.1 大鼠脊髓損傷后MIF、CCL5的表達
        3.1.2 大鼠脊髓損傷后CCL5與星形膠質細胞的共定位
    3.2 星形膠質細胞中CCL5的表達是由MIF/CD74軸調控
    3.3 MIF抑制劑衰減了體外星形膠質細胞中CCL5的表達
    3.4 MIF通過JNK通路促進星形膠質細胞中CCL5的產生
    3.5 CCL5主要增強IL-13 處理的巨噬細胞的遷移
第四章 討論
第五章 結論
參考文獻
英文縮寫詞表
綜述
    綜述參考文獻
致謝



本文編號：3155033