負(fù)重運動與LIPUS雙重干預(yù)對去卵巢大鼠股四頭肌的影響及生物學(xué)機制研究
發(fā)布時間:2021-03-20 07:02
目的:肌肉萎縮成為一種臨床上常見的疾病。女性到一定年齡會出現(xiàn)絕經(jīng)現(xiàn)象,絕經(jīng)后人體內(nèi)雌激素水平急劇下降,肌肉質(zhì)量和強度的下降對人體生理功能產(chǎn)生一系列負(fù)面影響,增加了患多種疾病的風(fēng)險。骨骼肌是運動系統(tǒng)的動力部分,在神經(jīng)驅(qū)使下,進行正常的收縮,關(guān)節(jié)作為樞紐,牽動骨活動。肌肉萎縮疾病嚴(yán)重影響絕經(jīng)女性的日常生活,而科學(xué)的體育運動則可以預(yù)防肌肉萎縮,并且對肌肉質(zhì)量、面積、肌力都有良好的改善作用,有針對性的運動方式對骨骼肌有更加積極影響,如抗阻力運動中的一種方式負(fù)重運動。低強度脈沖超聲(LIPUS)是近幾年作為一種被公認(rèn)的無創(chuàng)傷、安全可靠的治療工具被廣泛運用于損傷部位和骨折愈合的治療中。作為一種機械刺激,促進細(xì)胞增殖與存活,對軟組織及骨骼肌的影響而備受關(guān)注,其探究空間和價值甚高。采用運動和低強度脈沖超聲雙重干預(yù)手段在預(yù)防和治療肌肉萎縮相關(guān)領(lǐng)域研究匱乏。因此本實驗建立切除大鼠雙側(cè)卵巢模型,采用負(fù)重運動和低強度脈沖超聲以及二者聯(lián)合干預(yù)手段,從基因、蛋白、組織學(xué)、病理學(xué)等角度去研究不同干預(yù)手段對切除卵巢大鼠股四頭肌的影響以及相關(guān)機制研究。在細(xì)胞層面通過研究四點彎曲力學(xué)加載儀模擬運動和低強度脈沖超聲兩種手段...
【文章來源】:陜西師范大學(xué)陜西省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:85 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1構(gòu)建大鼠雙側(cè)卵巢切除手術(shù)模型??15??
除模型組(0VX,n=14)、??卵巢切除負(fù)重運動組(0+W,n=14)、卵巢切除超聲治療組(0+U,?n=14)和卵??巢切除負(fù)重運動與超聲治療聯(lián)合組(O+W+U,n=14)。卵巢切除手術(shù)2w雌性大??鼠傷勢均疫愈后,0+W組和0+W+U組進行負(fù)重運動,雌性大鼠承受的重量約為??自身的35%。讓大鼠進行適應(yīng)性運動lw,使其習(xí)慣跑臺不對其產(chǎn)生抗拒,接著進??行正式跑臺運動,負(fù)重運動跑臺速度設(shè)置為20?m/mhi,運動時間為30?min,每周??運動6?d,負(fù)重運動總周期為10?w?(圖2)。??10?w負(fù)重運動周期結(jié)束后,假手術(shù)組、模型組和0+W組處死8只大鼠,取其??血清和組織進行檢測。0+U和0+W+U組則使用LIPUS干預(yù),0+W+U組中采用??的運動方案和0+W組采用的運動方案一致。超聲波強度為30?mW/cm2,占空比為??20%,中心頻率為1.5?MHz,脈沖頻率為100?Hz,將超聲治療儀涂抹醫(yī)用耦合劑的??雙探頭放置在大鼠股四頭肌上,(大鼠股四頭肌兩側(cè)毛發(fā)每天在實驗前剔除),??每天治療2〇1^11,每周治療6小持續(xù)3?。??mm?-?^??Ml/??圖2負(fù)重運動訓(xùn)練裝置(A)和低強度脈沖超聲治療裝置(B)??2.2.4體重和抓力的稱量和測試??大鼠重量每周一測。大鼠進食量和飲水量通過電子稱和兩筒測量,大鼠抓力??采用大小鼠抓力測試器(型號:YSL-I3A),測試前將大鼠雙腳放置在測試器的??水平網(wǎng)格上,讓其雙腳處于穩(wěn)定,測試前讓儀器處于歸零狀態(tài),提起大鼠尾巴快??16??
?2材料與方法??速后拉,最終脫離測試器,讀取測試器上的數(shù)據(jù)即為大鼠的抓力大小,抓力的測??試單位為g,每只大鼠抓力重復(fù)3次,最后記均值(圖3)。??遂,'層麵一.,??Wmm??圖3大鼠抓力測試??2.2.5血清和動物組織的采集及生物化學(xué)指標(biāo)檢測??將負(fù)重運動和LIPUS治療結(jié)束后對大鼠進行取材,處死前一天晚上禁食,提??前冷凍數(shù)個冰盤,高壓錫箔紙、裝組織的紗布袋,待后期使用。第二天對大鼠實??行果斷脫頸、人道主義處死的方法,用無菌無酶的EP管收集血液,立即放入37?°C??恒溫水浴鍋15?min,?3000i?離心,提取上清層置離心管,記分組,立即存放-80°C,??后期檢測血清。將取下的股四頭肌和子宮放入預(yù)冷并有生理鹽水的培養(yǎng)皿中,隨??后剔除筋膜,待濾紙充分吸干表皮水分后,稱量做記錄。大鼠左側(cè)的股四頭肌組??織放入10%的中性甲醛中,謹(jǐn)記完全淹沒浸泡到甲醛里面,待后期做形態(tài)學(xué)檢測。??右側(cè)股四頭肌用錫箔紙包裹,做好記錄后,迅速放入液氮,24?h以后取出放入-80°C??冰箱,待后期做Western?Blot和RT-qPCR實驗。訂購南京建成生化實驗試劑盒檢??測各組大鼠LDH的血清指標(biāo)、檢測各組大鼠CK的血清指標(biāo)。??2.2.6H&E?染色??(1)固定:首先將股四頭肌從4%的中性甲醛中隨機取出一塊,切成1*1*0.5?cm??的組織塊,放到組織固定夾里面。??(2)流水沖洗過夜。??17??
本文編號:3090578
【文章來源】:陜西師范大學(xué)陜西省 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:85 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
圖1構(gòu)建大鼠雙側(cè)卵巢切除手術(shù)模型??15??
除模型組(0VX,n=14)、??卵巢切除負(fù)重運動組(0+W,n=14)、卵巢切除超聲治療組(0+U,?n=14)和卵??巢切除負(fù)重運動與超聲治療聯(lián)合組(O+W+U,n=14)。卵巢切除手術(shù)2w雌性大??鼠傷勢均疫愈后,0+W組和0+W+U組進行負(fù)重運動,雌性大鼠承受的重量約為??自身的35%。讓大鼠進行適應(yīng)性運動lw,使其習(xí)慣跑臺不對其產(chǎn)生抗拒,接著進??行正式跑臺運動,負(fù)重運動跑臺速度設(shè)置為20?m/mhi,運動時間為30?min,每周??運動6?d,負(fù)重運動總周期為10?w?(圖2)。??10?w負(fù)重運動周期結(jié)束后,假手術(shù)組、模型組和0+W組處死8只大鼠,取其??血清和組織進行檢測。0+U和0+W+U組則使用LIPUS干預(yù),0+W+U組中采用??的運動方案和0+W組采用的運動方案一致。超聲波強度為30?mW/cm2,占空比為??20%,中心頻率為1.5?MHz,脈沖頻率為100?Hz,將超聲治療儀涂抹醫(yī)用耦合劑的??雙探頭放置在大鼠股四頭肌上,(大鼠股四頭肌兩側(cè)毛發(fā)每天在實驗前剔除),??每天治療2〇1^11,每周治療6小持續(xù)3?。??mm?-?^??Ml/??圖2負(fù)重運動訓(xùn)練裝置(A)和低強度脈沖超聲治療裝置(B)??2.2.4體重和抓力的稱量和測試??大鼠重量每周一測。大鼠進食量和飲水量通過電子稱和兩筒測量,大鼠抓力??采用大小鼠抓力測試器(型號:YSL-I3A),測試前將大鼠雙腳放置在測試器的??水平網(wǎng)格上,讓其雙腳處于穩(wěn)定,測試前讓儀器處于歸零狀態(tài),提起大鼠尾巴快??16??
?2材料與方法??速后拉,最終脫離測試器,讀取測試器上的數(shù)據(jù)即為大鼠的抓力大小,抓力的測??試單位為g,每只大鼠抓力重復(fù)3次,最后記均值(圖3)。??遂,'層麵一.,??Wmm??圖3大鼠抓力測試??2.2.5血清和動物組織的采集及生物化學(xué)指標(biāo)檢測??將負(fù)重運動和LIPUS治療結(jié)束后對大鼠進行取材,處死前一天晚上禁食,提??前冷凍數(shù)個冰盤,高壓錫箔紙、裝組織的紗布袋,待后期使用。第二天對大鼠實??行果斷脫頸、人道主義處死的方法,用無菌無酶的EP管收集血液,立即放入37?°C??恒溫水浴鍋15?min,?3000i?離心,提取上清層置離心管,記分組,立即存放-80°C,??后期檢測血清。將取下的股四頭肌和子宮放入預(yù)冷并有生理鹽水的培養(yǎng)皿中,隨??后剔除筋膜,待濾紙充分吸干表皮水分后,稱量做記錄。大鼠左側(cè)的股四頭肌組??織放入10%的中性甲醛中,謹(jǐn)記完全淹沒浸泡到甲醛里面,待后期做形態(tài)學(xué)檢測。??右側(cè)股四頭肌用錫箔紙包裹,做好記錄后,迅速放入液氮,24?h以后取出放入-80°C??冰箱,待后期做Western?Blot和RT-qPCR實驗。訂購南京建成生化實驗試劑盒檢??測各組大鼠LDH的血清指標(biāo)、檢測各組大鼠CK的血清指標(biāo)。??2.2.6H&E?染色??(1)固定:首先將股四頭肌從4%的中性甲醛中隨機取出一塊,切成1*1*0.5?cm??的組織塊,放到組織固定夾里面。??(2)流水沖洗過夜。??17??
本文編號:3090578
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