目的:探討雌激素受體（Estrogen Receptor,ER）陽性乳腺癌他莫昔芬（Tamoxifon,TAM）耐藥對化療藥物敏感性的影響及其機制,尋找臨床TAM耐藥患者的敏感化療藥物及相應的分子標志物。方法:采用小濃度持續(xù)誘導法在ER陽性乳腺癌細胞系中建立TAM耐藥細胞系,通過CCK-8法驗證其對TAM的耐藥性、流式細胞儀檢測細胞周期的變化、transwell實驗檢測細胞侵襲能力、Western blot驗證耐藥細胞相關標志物的變化。通過基因芯片和生物信息學方法尋找TAM耐藥的靶基因,并在建立好的耐藥模型中進行驗證。使用不同濃度的臨床常用化療藥物阿霉素（Adriamycin,ADR）、紫杉醇（Paclitaxel,PTX）和順鉑（Cisplatin,CP）處理TAM耐藥及敏感細胞,CCK-8法評估細胞在TAM耐藥后對不同化療藥物的敏感性。使用小干擾RNA（Small interfering RNA,siRNA）改變耐藥細胞中靶基因的表達后檢測其對化療藥物敏感性的變化。收集TAM耐藥患者的臨床病理信息和詳細治療方案,追蹤其后續(xù)化療效果,評估其對各種化療方案的緩解情況,同時收集患者治療前... 

【文章來源】：重慶醫(yī)科大學重慶市

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學位級別】：博士

【部分圖文】：

TAM耐藥細胞的建立與鑒定Figure1.1.EstablishmentofTAM-resistantbreastcancercells（A）TAM耐藥細胞的形態(tài)較野生型ER陽性乳腺癌細胞更為扁平，以尖角形和多角形為主，排列無規(guī)則且分散，在形態(tài)上更具有侵襲性

TAM耐藥細胞的增殖能力明顯增強Figure1.2.TAM-resistantcellshavestrongerproliferationability（A,B）流式細胞儀檢測細胞周期發(fā)現(xiàn)TAM耐藥細胞MCF-7R和T47D相較與TAM敏感細

MCF-7R細胞較MCF-7細胞的侵襲能力明顯增強Figure1.3.MCF-7RcellshavestrongerinvasiveabilitycomparedwithMCF-7cells（A，B）Transwell實驗的結果表明在24h、32h、40h和48h時MCF-7R發(fā)生遷移、侵襲的細胞數(shù)明顯多于MCF-7細胞(*p<0.05,**p<0.01and***p<0.001)


本文編號：3077521