目的:探討堿性成纖維細(xì)胞生長因子（basic fibroblast growth factor,b FGF）、表皮生長因子（epidermal growth factor,EGF）單獨(dú)及聯(lián)合對(duì)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（human bone marrow mesenchymal stem cells,h BMSCs）向神經(jīng)細(xì)胞分化的影響,并進(jìn)一步研究Wnt/β-catenin信號(hào)通路在h BMSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化中的作用。方法:（1）將購自江陰齊氏生物科技有限公司第2代h BMSCs進(jìn)行傳代、純化,取第4代h BMSCs進(jìn)行流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞表面骨髓基質(zhì)標(biāo)志CD44、CD90和造血細(xì)胞標(biāo)志CD19、CD34。（2）取第4-6代干性維持較好的h BMSCs,以含1%FBS的α-MEM為基礎(chǔ)誘導(dǎo)培養(yǎng)基,根據(jù)誘導(dǎo)條件不同分為5組:空白對(duì)照組（不添加任何物質(zhì)）、EGF組（添加20 ng/m L EGF）、b FGF組（添加20 ng/m L b FGF）、EGF+b FGF組（添加20 ng/m L EGF及20 ng/m L b FGF）、EGF+b FGF+DKK-1組（添加20 ng/m L E... 

【文章來源】：南昌大學(xué)江西省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 引言
第2章 材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 細(xì)胞來源
        2.1.2 主要試劑及耗材
        2.1.3 主要儀器
        2.1.4 主要試劑配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 器材的準(zhǔn)備
        2.2.2 hBMSCs傳代、純化
        2.2.3 流式細(xì)胞儀鑒定hBMSCs
        2.2.4 誘導(dǎo)分化分組
        2.2.5 細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察
        2.2.6 RT-PCR檢測(cè)相關(guān)mRNA表達(dá)水平
        2.2.7 免疫熒光檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)情況
        2.2.8 Western blot檢測(cè)相關(guān)蛋白表達(dá)水平
    2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第3章 結(jié)果
    3.1 hBMSCs流式鑒定結(jié)果
    3.2 hBMSCs誘導(dǎo)分化后細(xì)胞形態(tài)觀察結(jié)果
    3.3 神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)志檢測(cè)結(jié)果
        3.3.1 神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)志mRNA水平檢測(cè)結(jié)果
        3.3.2 神經(jīng)細(xì)胞標(biāo)志蛋白水平檢測(cè)結(jié)果
    3.4 Wnt/β-catenin信號(hào)通路檢測(cè)結(jié)果
        3.4.1 Wnt/β-catenin信號(hào)通路關(guān)鍵組件mRNA水平檢測(cè)結(jié)果
        3.4.2 Wnt/β-catenin信號(hào)通路關(guān)鍵組件蛋白水平檢測(cè)結(jié)果
第4章 討論
    4.1 SCI的治療現(xiàn)狀
    4.2 BMSCs概述
    4.3 EGF、bFGF誘導(dǎo)hBMSCs成神經(jīng)分化的作用
    4.4 Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)hBMSCs成神經(jīng)分化的影響
第5章 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間的研究成果
綜述
    參考文獻(xiàn)


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大鼠BMSCs自發(fā)鈣化過程中成骨相關(guān)基因表達(dá)譜的分析[J]. 焦雪峰,黃永燦,黃益洲,吳誠光,鄧力.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2014(02)
[2]Wnt/β-catenin信號(hào)通路在大鼠BMSCs神經(jīng)分化中的作用研究[J]. 何丁文,殷明,鄔亞華,周榮平,魏強(qiáng)強(qiáng),殷嫦嫦.  中國生物工程雜志. 2013(03)
[3]Wnt/β-catenin信號(hào)通路對(duì)間充質(zhì)干細(xì)胞衰老的影響及其作用機(jī)制[J]. 項(xiàng)曉霞,陳律,王駿浩,張余斌,張大勇.  浙江大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2011(06)
[4]川芎嗪聯(lián)合創(chuàng)傷性腦組織勻漿液誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化[J]. 梁峰,馬潔華,楊麗娜.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2011(23)
[5]體外培養(yǎng)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化:Wnt3a信號(hào)分子的誘導(dǎo)作用[J]. 閻文柱,秦書儉,劉學(xué)政,李德華.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2010(14)
[6]不同分離及培養(yǎng)方法對(duì)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生長增殖和生物學(xué)特性的影響[J]. 賈貴清,張明鳴,楊平,程驚秋,陸燕蓉,伍曉汀.  四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2009(04)
[7]脊髓損傷治療藥物的研究進(jìn)展[J]. 鄧鳳君,楊迎暴,徐江平.  中國藥理學(xué)通報(bào). 2009(02)
[8]共培養(yǎng)法神經(jīng)細(xì)胞誘導(dǎo)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)元的分化[J]. 楊乃龍,楊芬,徐麗麗.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2008(29)
[9]脊髓損傷的治療進(jìn)展[J]. 雷德強(qiáng),趙洪洋,劉如恩,鄧興力.  中國現(xiàn)代神經(jīng)疾病雜志. 2008(01)
[10]丹參誘導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向神經(jīng)樣細(xì)胞分化[J]. 王勇,陸長青,王凡.  解剖學(xué)雜志. 2007(02)

碩士論文
[1]高壓氧治療脊髓損傷的療效評(píng)估及影響因素[D]. 張娟.吉林大學(xué) 2013



本文編號(hào)：3049586