發(fā)布時間：2021-02-01 07:00

　　目的:研究氫氣對大鼠腦缺血/再灌注損傷腦皮質(zhì)區(qū)線粒體功能及神經(jīng)細胞凋亡的影響。方法:本試驗動物選用雄性SD大鼠,共計78只。采用線栓法栓塞左側(cè)大腦中動脈,栓塞2 h后拔除線栓,再灌注24 h建立大鼠局灶性腦缺血/再灌注損傷模型。應(yīng)用隨機數(shù)字表法將雄性SD大鼠分為假手術(shù)組（Sham組）、腦缺血/再灌注損傷模型組（Mod組）、氫氣治療組（H₂組）（n=26）。再灌注24 h后進行神經(jīng)功能缺損評分來評估大鼠神經(jīng)功能狀態(tài);應(yīng)用2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色檢測腦缺血皮質(zhì)區(qū)梗死面積;應(yīng)用尼氏染色觀察腦缺血皮質(zhì)區(qū)神經(jīng)細胞形態(tài)變化;應(yīng)用熒光分光光度法測定缺血區(qū)神經(jīng)細胞線粒體活性氧生成率（ROS）;應(yīng)用JC-1染色法檢測缺血皮質(zhì)區(qū)神經(jīng)細胞線粒體膜電位水平（ψm）的變化;應(yīng)用熒光酶標儀檢測缺血皮質(zhì)區(qū)神經(jīng)細胞線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔（MPTP）開放度。應(yīng)用原位末端標記（TUNEL）法檢測缺血區(qū)神經(jīng)細胞亡并計算凋亡指數(shù)（AI）;應(yīng)用蛋白質(zhì)印跡法檢測凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2及Bax的表達量;結(jié)果:與Sham組相比,Mod組大鼠神經(jīng)功能缺損評分、腦梗死面積、神經(jīng)細胞線粒體ROS生成率、... 

【文章來源】：桂林醫(yī)學(xué)院廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

各組大鼠TTC染色梗死面積

2.3 尼氏染色結(jié)果用尼氏染色來觀察 SD 大鼠腦 I/R 損傷后神經(jīng)細胞形態(tài)以及神經(jīng)細構(gòu)的變化。在倒置熒光顯微鏡下觀察，sham 組神經(jīng)元胞體排列緊密，藍染，核圓呈空泡樣，膠質(zhì)細胞呈藍色，細小顆粒狀。Mod 組神經(jīng)元萎染，部分神經(jīng)元消失，細胞間隙增寬，壞死區(qū)見增生明顯的膠質(zhì)細組神經(jīng)元胞體較完整，細胞排列較緊密，核較飽滿，正常神經(jīng)元數(shù)目多于 Mod 組。見圖 2。

圖 3 線粒體活性氧生成率Figure 3 Mitochondrial reactive oxygen species generation rate胞線粒體膜電位水平檢測結(jié)果電位水平可以反映線粒體功能，△ψm 處于高水平以熒光強度的大小代表△ψm 水平的高低。結(jié)果顯 組△ψm 水平降低（P＜0.01）；與 Mod 組相比，加P＜0.01），見圖 4a，表 3。在倒置熒光顯微鏡下電位水平；綠色熒光代表低膜電位水平。結(jié)果顯示組紅色熒光減弱，綠色熒光增強，膜電位降低；與 M增強，綠色熒光減弱，膜電位增強，見圖 4b。


本文編號：3012379