發(fā)布時間：2020-12-19 10:06

　　目的通過建立SD大鼠SCI模型和神經(jīng)膠質細胞應激模型,研究大鼠脊髓損傷后β-catenin、SIRT1和細胞凋亡表達變化,了解大鼠脊髓損傷后β-catenin與SIRT1信號通路在調(diào)節(jié)細胞凋亡的作用。方法動物實驗:成年雄性SD大鼠90只、體重210g±10g、由錦州醫(yī)科大學動物中心提供。隨機選擇分為五組,分別為假手術組（僅做椎板切除術）和損傷后3、7、14和28d組,每組18只。10%水合氯醛腹腔麻醉,在大鼠T₉-T₁₀椎體的部位實施背側正中切口,切口的長度為3cm。采用改良的Allen’s打擊器,在T₁₀脊髓節(jié)段制作SCI模型,術后3、7、14、28d取材,制備冰凍切片行HE染色、尼氏染色和免疫熒光染色（n=6）,BBB評分（n=6）和Western blot（n=6）方法對脊髓組織中的β-catenin、SIRT1和Caspese-3蛋白表達進行半定量檢測。細胞實驗:原代星形膠質細胞培養(yǎng)兩周,隨機分為四組,分別是對照組、處理組、治療對照組和治療組,用Western blot和免疫熒光方法對細胞組織中的β-cateni... 

【文章來源】：錦州醫(yī)科大學遼寧省

【文章頁數(shù)】：45 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

大鼠SCI模型制作

擬行 HE 染色測脊髓空洞率，尼氏染色，免疫組織學檢測灌流組織從蔗糖溶液取出，1×PBS 清洗，切取距離損傷處上下 5mm 的脊T 包埋劑室溫下包埋適當大小組織，切片機溫度調(diào)為-20℃，將組織放在，靜置半小時，包埋劑凝固，切片機刀片調(diào)好位置，連續(xù)切片，切片厚um，棄掉殘碎組織，每張載玻片放 4 個組織切片，切片室溫靜置 2h,放置-。

β-catenin 陽性表達位于脊髓灰質神經(jīng)元細胞質和細胞核(圖 9)，對照組可見 -catenin 少量表達， 急性脊髓損傷 3d 后β-catenin 陽性表達神經(jīng)元數(shù)量開始增加，7d 時陽性表達神經(jīng)元最多，隨后表達有所下降（P<0.05）；SIRT1 陽性表達在 SCI 后 3 天后逐漸增加，28d 表達量最高（P<0.05）（圖 10）。2、細胞實驗LiCL 治療組與處理組對比，蛋白β-catenin 表達水平明顯增高（P<0.05）；而蛋白 SIRT1 表達則是降低（P<0.05）（圖 11）。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]中國創(chuàng)傷性脊髓損傷流行病學和疾病經(jīng)濟負擔的系統(tǒng)評價[J]. 陳星月,陳棟,陳春慧,王凱,唐笠,李宇哲,吳愛憫.  中國循證醫(yī)學雜志. 2018(02)
[2]脊髓損傷的流行病學研究[J]. 唐智生,毛容秋.  廣西醫(yī)科大學學報. 2011(05)



本文編號：2925716