目的:觀察綠色熒光蛋白（GFP）標(biāo)記的兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）成骨誘導(dǎo)后形態(tài)學(xué)改變及體外成骨中礦化鈣結(jié)節(jié)的形成,并結(jié)合掃描電鏡和X射線能譜分析（SEM/EDS）技術(shù)對礦化鈣結(jié)節(jié)進(jìn)行微觀形貌觀察和定量能譜分析,并對GFP標(biāo)記的兔BMSCs復(fù)合脫鈣骨（DBM）支架體外構(gòu)建組織工程骨表面進(jìn)行微觀形貌和生物礦化進(jìn)行觀測。方法:用攜帶GFP基因的腺病毒（Ad-GFP）轉(zhuǎn)染兔BMSCs進(jìn)行示蹤標(biāo)記,并誘導(dǎo)細(xì)胞向成骨方向分化,通過倒置熒光顯微鏡、鈣結(jié)節(jié)茜素紅染色觀察成骨誘導(dǎo)后細(xì)胞形態(tài)改變和礦化鈣結(jié)節(jié)的形成,結(jié)合SEM/EDS技術(shù)觀測礦化鈣結(jié)節(jié)的表面微觀結(jié)構(gòu)及其元素構(gòu)成。用GFP標(biāo)記的BMSCs與DBM復(fù)合經(jīng)成骨誘導(dǎo)后,通過倒置熒光顯微鏡對細(xì)胞生長情況進(jìn)行即時(shí)觀察,結(jié)合SEM/EDS技術(shù)觀測組織工程骨的表面微觀形貌和生物礦化。結(jié)果:Ad-GFP轉(zhuǎn)染兔BMSCs后在熒光顯微鏡下觀察到綠色熒光,經(jīng)成骨誘導(dǎo)后細(xì)胞形態(tài)向成骨方向分化,并形成不透光的礦化鈣結(jié)節(jié),鈣結(jié)節(jié)茜素紅染色見紅色礦化結(jié)節(jié),電鏡下見礦化鈣結(jié)節(jié)散布于細(xì)胞中,細(xì)胞重疊生長,分泌基質(zhì)旺盛。X射線能譜分析顯示礦化鈣結(jié)節(jié)主要組成元素與正常骨組織... 

【文章來源】：桂林醫(yī)學(xué)院廣西壯族自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：59 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
英漢縮略詞對照表
前言
1 材料與方法
    1.1 實(shí)驗(yàn)材料
    1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
    1.3 主要實(shí)驗(yàn)耗材
    1.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    1.5 實(shí)驗(yàn)方法
2 結(jié)果
    2.1 復(fù)蘇及傳代后兔BMSCs形態(tài)學(xué)觀察
    2.2 兔BMSCs的GFP標(biāo)記及成骨誘導(dǎo)后兔BMSCs形態(tài)學(xué)觀察
    2.3 礦化鈣結(jié)節(jié)的鏡下觀察和茜素紅染色
    2.4 礦化鈣結(jié)節(jié)的電鏡掃描觀察和X線能譜分析
    2.5 組織工程骨在倒置熒光顯微鏡下的觀察
    2.6 DBM和組織工程骨的電鏡掃描觀察和X線能譜分析
3 討論
    3.1 BMSCs的GFP標(biāo)記
    3.2 BMSCs的成骨誘導(dǎo)
    3.3 BMSCs的體外礦質(zhì)化
    3.4 DBM的生物特性
    3.5 SEM/EDS技術(shù)在組織工程骨生物礦化研究中的初步應(yīng)用
4 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 組織工程骨構(gòu)建的研究現(xiàn)狀及進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文目錄
致謝



本文編號：2917810