目的:通過對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎(Knee osteoarthritis,KOA)模型大鼠進(jìn)行關(guān)節(jié)腔注射玻璃酸鈉并聯(lián)合有氧訓(xùn)練,觀察KOA關(guān)節(jié)軟骨變化情況,測(cè)定關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)中聚集蛋白聚糖和Ⅱ型膠原的表達(dá)情況,明確玻璃酸鈉聯(lián)合有氧訓(xùn)練治療是否較單純注射玻璃酸鈉療效更佳。方法:1.實(shí)驗(yàn)對(duì)象:40只8周齡SD雄性大鼠,采用隨機(jī)數(shù)字表法標(biāo)記,平均分成四組:空白對(duì)照組、模型組、玻璃酸鈉組(SH組)、玻璃酸鈉聯(lián)合有氧訓(xùn)練組(綜合組)�？瞻讓�(duì)照組大鼠僅籠內(nèi)飼養(yǎng);另外三組均采用L-半胱氨酸及木瓜蛋白酶混合液誘導(dǎo)KOA模型,4周后進(jìn)行干預(yù)。2.干預(yù)措施:模型組僅籠內(nèi)飼養(yǎng),不進(jìn)行干預(yù)處理;SH組:關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射玻璃酸鈉0.02ml/次,每周1次,連續(xù)4周;綜合組:玻璃酸鈉注射后次日開始進(jìn)行有氧訓(xùn)練(中等強(qiáng)度跑步訓(xùn)練20米/分,每次30分鐘,每天1次,每周6次),連續(xù)治療4周,然后采取扯尾斷頸法處死所有實(shí)驗(yàn)大鼠取關(guān)節(jié)軟骨,并對(duì)軟骨及指標(biāo)進(jìn)行觀察。3.觀察指標(biāo):(1)肉眼觀察關(guān)節(jié)軟骨形態(tài)結(jié)構(gòu);(2)HE染色下觀察軟骨細(xì)胞及基質(zhì)的變化情況;(3)免疫組化測(cè)定軟骨細(xì)胞基質(zhì)中Aggrecan和Ⅱ型膠原的表達(dá)情況。4.采用SPSS20.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:1.各組膝關(guān)節(jié)軟骨肉眼觀:空白對(duì)照組軟骨表面非常光滑,色澤明亮,關(guān)節(jié)腔內(nèi)未見粘連及積液,不伴有任何裂隙及軟化;模型組軟骨表面很粗糙,色澤暗淡無光,滑膜有不同程度的充血、水腫、增生、粘連,少數(shù)軟骨甚至出現(xiàn)全層缺損,部分標(biāo)本關(guān)節(jié)邊緣可見增生及骨贅形成;關(guān)節(jié)腔粘連及積液明顯;SH組軟骨表面部分稍顯不平整,色澤呈淡黃色,未見明顯裂紋及糜爛,關(guān)節(jié)腔偶有積液;綜合組表面基本平整,色澤明亮,未見裂隙及軟化,個(gè)別滑膜輕度充血,關(guān)節(jié)腔積液少見。按改良Mankin's評(píng)分方法,對(duì)所統(tǒng)計(jì)結(jié)果進(jìn)行秩和檢驗(yàn),與模型組相比,SH組及綜合組具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。2.HE染色觀察:空白對(duì)照組軟骨基質(zhì)著染均勻,細(xì)胞數(shù)目及形態(tài)大小一致,排列整齊,潮線完整。模型組軟骨層厚度變薄明顯,同時(shí)細(xì)胞基質(zhì)染色減退,軟骨細(xì)胞排列紊亂,數(shù)目明顯減少,潮線紊亂不完整。SH組軟骨層輕度變薄,軟骨細(xì)胞略減少,排列相對(duì)整齊,個(gè)別潮線不完整;綜合組軟骨表面較SH組光滑,軟骨層厚薄基本均勻,軟骨基質(zhì)著染更均勻,各層軟骨細(xì)胞數(shù)目和分布較均勻,潮線基本完整。按改良Mankin's評(píng)分方法,將HE染色觀察結(jié)果進(jìn)行分析,與模型組相比,SH組及綜合組均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),其中綜合組改善最為明顯。3.免疫組化檢測(cè)結(jié)果:光鏡下Ⅱ型膠原陽性表達(dá)顯示被染成藍(lán)色。Aggrecan陽性表達(dá)為關(guān)節(jié)軟骨基質(zhì)中被染成棕黃色。模型組Aggrecan和Ⅱ型膠原呈弱陽性表達(dá),空白對(duì)照組、SH組及綜合組表達(dá)明顯。與模型組相比,SH組及綜合組關(guān)節(jié)軟骨Aggrecan和Ⅱ型膠原的表達(dá)具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05),而綜合組較SH組表達(dá)也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05)。結(jié)論:有氧訓(xùn)練可以促進(jìn)玻璃酸鈉對(duì)軟骨基質(zhì)Ⅱ型膠原和聚集蛋白聚糖的合成。
【學(xué)位單位】：西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：R684.3
【部分圖文】：

后于左后側(cè)膝關(guān)節(jié)外側(cè)進(jìn)針向腔內(nèi)注射玻璃酸鈉 0.02ml/次，每周 1 次，連續(xù) 4 周（圖 1）。綜合組：10 只，籠內(nèi)飼養(yǎng)、自由飲食 1 周，左后側(cè)膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射 4%木瓜蛋白酶及 0.03mol/L 的 L-半胱氨酸混合液造模，觀察 4 周，造模成功后于左后側(cè)膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射玻璃酸鈉 0.02ml/次，每周 1 次，連續(xù) 4 周；并于注射后次日開始進(jìn)行有氧訓(xùn)練（即該處選擇跑步訓(xùn)練，用薄木板隔成獨(dú)立跑道的改裝版動(dòng)物跑步機(jī)進(jìn)行訓(xùn)練，每個(gè)跑道的長(zhǎng)、寬、高分別為 100cm15cm、30cm，為避免大鼠偷懶，在跑道尾部擋板固定有大頭針，圖 2），每天 1 次（中等強(qiáng)度：20 米/分鐘，每次 30 分鐘），每周 6 次，連續(xù) 4 周

后于左后側(cè)膝關(guān)節(jié)外側(cè)進(jìn)針向腔內(nèi)注射玻璃酸鈉 0.02ml/次，每周 1 次，連續(xù) 4 周（圖 1）。綜合組：10 只，籠內(nèi)飼養(yǎng)、自由飲食 1 周，左后側(cè)膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射 4%木瓜蛋白酶及 0.03mol/L 的 L-半胱氨酸混合液造模，觀察 4 周，造模成功后于左后側(cè)膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)注射玻璃酸鈉 0.02ml/次，每周 1 次，連續(xù) 4 周；并于注射后次日開始進(jìn)行有氧訓(xùn)練（即該處選擇跑步訓(xùn)練，用薄木板隔成獨(dú)立跑道的改裝版動(dòng)物跑步機(jī)進(jìn)行訓(xùn)練，每個(gè)跑道的長(zhǎng)、寬、高分別為 100cm15cm、30cm，為避免大鼠偷懶，在跑道尾部擋板固定有大頭針，圖 2），每天 1 次（中等強(qiáng)度：20 米/分鐘，每次 30 分鐘），每周 6 次，連續(xù) 4 周

構(gòu)評(píng)分為：4 分有 2 只，3 分有 7 只，2 分有 1 只（見表 2）。SH 組：軟骨表面稍呈黃色，透明度尚可，較光滑，有光澤，光澤度較空白對(duì)照組差但優(yōu)于模型組。炎性表現(xiàn)相比模型組輕。且亦未見裸露的軟骨下骨�；H有輕度充血腫脹，關(guān)節(jié)液較清亮，關(guān)節(jié)腔內(nèi)未見明顯粘連（見圖 5）。根據(jù)改良 Mankin's 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，軟骨結(jié)構(gòu)評(píng)分為：3 分有 1 只2 分有 1 只，1 分有 8 只（見表 2）。綜合組：膝關(guān)節(jié)軟骨表面基本光滑，色澤明亮，光澤度優(yōu)于 SH 組，透明度可，未見裂隙及軟化，個(gè)別滑膜輕度充血，關(guān)節(jié)腔內(nèi)未見粘連（見圖 6）。根據(jù)改良 Mankin's 評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)，軟骨結(jié)構(gòu)評(píng)分為：3 分有 0 只，2 分有 1 只，1 分有 4 只，0 分 5 只（見表 2）。
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本文編號(hào)：2844099