【摘要】：目的:發(fā)育性髖脫位(developmental dysplasia of the hip,DDH)的發(fā)病機制眾多,目前難以明確,既往研究及觀察證實髖臼形態(tài)改變與其密切相關。該研究通過比較正常幼兒與DDH患兒髖臼軟骨組織中asporin(ASPN)在mRNA和蛋白水平上的表達差異,探索引起發(fā)育性髖脫位髖臼軟骨形態(tài)改變的原因。研究方法:收集2013年05月至2016年11月在中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院小兒骨科住院的發(fā)育性髖脫位患者,行髖關節(jié)切開復位治療時清除的少許髖臼窩邊緣軟骨組織作為研究對象(共計26例,30髖,其中男性3例,女性23例,年齡6月至6歲,平均2.42±1.51歲)。收集惡性腫瘤截肢的兒童、引產胎兒以及因其它疾病死亡的非骨關節(jié)畸形新生兒的髖臼軟骨組織作為正常對照(共計10例,15髖,其中男性4例,女性6例,年齡0天至5歲,平均0.33±1.25歲)。上述標本組織均于液氮或-80℃條件下保存,應用iTRAQ(isobaric tags for relative and absolute quantitation,同位素標記相對與絕對定量)和Western-blot實驗方法檢測ASPN蛋白質表達水平,以及應用RT-PCR技術檢測其mRNA表達水平。采用SPSS軟件(21.0版本,美國)對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析,數(shù)據(jù)資料均采用均數(shù)±標準差(x±s)方式表示,采用兩樣本的t檢驗方法進行組間比較分析,采用多元線性回歸方法評估變量之間的相關性,P0.05視為統(tǒng)計學差異顯著。結果:1.iTRAQ實驗結果:ASPN表達量在髖脫位組較正常組出現(xiàn)上調(1.10±0.04(髖脫位組)vs.0.93±0.03(正常組),P0.05),統(tǒng)計學差異顯著。2.RT-PCR實驗結果:ASPN在髖脫位組髖臼軟骨組織中mRNA水平上的表達量較正常組出現(xiàn)上調(2.69±0.52(髖脫位組)vs.1.00±0.44(正常組),p0.05),統(tǒng)計學差異顯著。3.Western-blot實驗結果:ASPN表達量在髖脫位組較正常組出現(xiàn)上調(0.89±0.23(髖脫位組)vs.0.47±0.19(正常組),p0.05),統(tǒng)計學差異顯著。4.相關性分析結果:ASPN基因的表達與年齡和性別無明顯相關性(P=0.44,P=0.06),ASPN蛋白的表達與年齡和性別無明顯相關性(P=0.58,P=0.23)。結論:ASPN表達量在發(fā)育性髖脫位髖臼軟骨組織中出現(xiàn)上調,ASPN表達上調可能與DDH髖臼形態(tài)發(fā)育異常有關,即ASPN的異常表達可能是DDH致病因素之一。
【學位授予單位】：中國醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2018
【分類號】：R726.8
【圖文】：

中國醫(yī)科大學碩士學位論文3 實驗結果iTRAQ 實驗結果次研究共計鑒定出 1747 個蛋白質組，對結果進行 T-test 分析并計算其指數(shù)（p-Value），P<0.05 表示統(tǒng)計學差異顯著，共檢測出具有統(tǒng)計學差異質組 1062 個。其中 ASPN 在髖脫位組髖臼軟骨組織中表達量較正常組上脫位組 vs. 正常組（1.10±0.04vs.0.93±0.03，P<0.05)（見圖 1a 和 b）。

圖 1bASPN 在髖脫位組和正常組中 iTRAQ 檢測結果RT-PCR 實驗結果正常組和髖脫位組髖臼軟骨組織中均能檢測出 ASPN 表達，且 ASPN 在髖髖臼軟骨組織中的表達較正常組增高，以 2^（-△△CT）值計算, 髖脫位 正常組（2.69±0.52vs. 1.00±0.44，p<0.05）,差異具有統(tǒng)計學意義(圖 2)。

圖 1bASPN 在髖脫位組和正常組中 iTRAQ 檢測結果.2 RT-PCR 實驗結果在正常組和髖脫位組髖臼軟骨組織中均能檢測出 ASPN 表達，且 ASPN 在位組髖臼軟骨組織中的表達較正常組增高，以 2^（-△△CT）值計算, 髖脫 vs. 正常組（2.69±0.52vs. 1.00±0.44，p<0.05）,差異具有統(tǒng)計學意義(圖

【參考文獻】

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1 韋宜山;劉萬林;丁良甲;王炳海;白銳;李岱鶴;趙振群;;發(fā)育性髖脫位髖臼軟骨細胞凋亡的實驗研究[J];臨床小兒外科雜志;2012年04期

本文編號：2798862