【摘要】：目前皮膚軟組織擴(kuò)張術(shù)在整形外科領(lǐng)域臨床上已獲廣泛應(yīng)用,其主要通過(guò)在皮下置入擴(kuò)張囊并定期向囊內(nèi)注水使擴(kuò)張區(qū)域的皮膚在擴(kuò)張囊的機(jī)械壓力下不斷產(chǎn)生與鄰近組織顏色、質(zhì)地等類(lèi)似的“額外”皮膚用于組織缺損的修復(fù)。但其目前仍然存在諸多不足,如擴(kuò)張周期長(zhǎng)、組織新生慢、擴(kuò)張過(guò)快容易造成皮瓣血運(yùn)障礙、皮瓣即時(shí)回縮率高影響皮瓣修復(fù)效果等,并且擴(kuò)張皮瓣成活的長(zhǎng)寬比極限值有時(shí)仍不能滿足修復(fù)要求,如何進(jìn)行安全、有效、快速的皮膚擴(kuò)張一直是人們關(guān)注的重點(diǎn)問(wèn)題,也是當(dāng)前基礎(chǔ)和臨床重要的研究方向。本文第一部分利用大鼠背部皮膚擴(kuò)張模型進(jìn)行皮膚擴(kuò)張,比較A型肉毒毒素組與對(duì)照組擴(kuò)張速度、擴(kuò)張過(guò)程中皮膚血運(yùn)、擴(kuò)張皮瓣即時(shí)回縮率的差異,并通過(guò)測(cè)量擴(kuò)張皮膚表皮、真皮及包膜厚度,結(jié)合Masson染色、α-SMA免疫組織化學(xué)染色、CD34免疫組織化學(xué)染色結(jié)果等對(duì)兩組擴(kuò)張速度、即時(shí)回縮率差異原因及擴(kuò)張過(guò)程中擴(kuò)張皮膚血運(yùn)的安全性進(jìn)行探討,旨在探索安全、有效地加快皮膚擴(kuò)張的新方法;本文第二部分利用第一部分的方法擴(kuò)張出的皮膚形成一定長(zhǎng)寬比例的擴(kuò)張皮瓣,觀察記錄術(shù)后每日皮瓣血運(yùn)情況及術(shù)后7天時(shí)皮瓣的成活率,同時(shí)結(jié)合皮瓣末端組織的HE染色結(jié)果來(lái)探討在A型肉毒毒素干預(yù)下擴(kuò)張出的皮膚用于創(chuàng)面修復(fù)的安全性和可靠性。第一部分應(yīng)用大鼠背部皮膚擴(kuò)張模型探索A型肉毒毒素對(duì)皮膚擴(kuò)張速度的影響目的:通過(guò)A型肉毒毒素干預(yù)大鼠背部皮膚的擴(kuò)張過(guò)程,觀察A型肉毒毒素對(duì)大鼠皮膚擴(kuò)張速度、血運(yùn)、即時(shí)回縮率及組織學(xué)的影響,總結(jié)A型肉毒毒素對(duì)皮膚擴(kuò)張的作用。方法:將18只SD大鼠隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組,按擬埋置擴(kuò)張器大小于大鼠背部文身并于文身區(qū)域皮內(nèi)注射A型肉毒毒素或生理鹽水,然后埋置擴(kuò)張器,術(shù)后1周開(kāi)始注水,每周2次,每次注水至囊內(nèi)壓8Kpa,記錄擴(kuò)張容量、皮膚血運(yùn)情況并定期測(cè)量文身區(qū)域面積,擴(kuò)張4周后取材測(cè)量擴(kuò)張皮膚回縮率,HE染色觀察表皮、真皮、纖維包膜厚度,Masson染色觀察纖維包膜膠原蛋白沉積情況,α-SMA免疫組織化學(xué)染色評(píng)估纖維包膜內(nèi)肌成纖維細(xì)胞含量,CD34免疫組織化學(xué)染色觀察擴(kuò)張皮膚內(nèi)血管直徑及密度,在光學(xué)顯微鏡下觀察并拍照,用Image Pro Plus、Image J軟件進(jìn)行測(cè)量,SPSS 13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果:自第一次注水至擴(kuò)張結(jié)束,與對(duì)照組比較,A型肉毒毒素組擴(kuò)張容量、文身區(qū)域面積更大,擴(kuò)張皮膚血運(yùn)更好,擴(kuò)張4周后,A型肉毒毒素組皮膚纖維包膜薄,即時(shí)回縮率低,肌成纖維細(xì)胞含量少,皮膚血管管徑大、密度高,A型肉毒毒素組纖維包膜內(nèi)膠原纖維較稀疏,排列散亂,對(duì)照組纖維包膜內(nèi)膠原纖維排列較為致密、規(guī)則,兩組擴(kuò)張皮膚表皮及真皮厚度未見(jiàn)顯著差異。結(jié)論:A型肉毒毒素能增加皮膚擴(kuò)張容量,提高皮膚擴(kuò)張速度,降低擴(kuò)張皮膚即時(shí)回縮率,這可能與其抑制纖維包膜形成、減少包膜中膠原蛋白的沉積及成纖維細(xì)胞向肌成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)化有關(guān),A型肉毒毒素對(duì)擴(kuò)張過(guò)程中皮膚的血運(yùn)有保護(hù)作用,可能與A型肉毒毒素?cái)U(kuò)張皮膚內(nèi)血管并促進(jìn)血管生成有關(guān)。第二部分A型肉毒毒素對(duì)擴(kuò)張的任意皮瓣血運(yùn)及成活率的影響目的:利用第一部分的方法擴(kuò)張大鼠背部皮膚后,分別形成一定長(zhǎng)度及寬度的皮瓣并轉(zhuǎn)移縫合,觀察兩組皮瓣的血運(yùn)及成活情況,比較A型肉毒毒素干預(yù)組與對(duì)照組擴(kuò)張皮瓣成活率的差異。方法:解剖大鼠背部皮膚,將皮膚自肌層淺面掀起,觀察大鼠背部皮膚血管分布情況,為擴(kuò)張后形成任意皮瓣提供解剖支持,按第一部分的方法擴(kuò)張大鼠背部皮膚,在擴(kuò)張4周末利用擴(kuò)張后的皮膚形成一蒂在尾側(cè)的任意皮瓣,每日以組織血流灌注成像評(píng)價(jià)系統(tǒng)測(cè)量皮瓣血運(yùn)并拍照記錄皮瓣成活情況,利用Image J軟件測(cè)量術(shù)后第7天皮瓣成活率,并于術(shù)后第7天取材行HE染色觀察皮瓣末端炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)及組織壞死情況。結(jié)果:A型肉毒毒素組自皮瓣轉(zhuǎn)移術(shù)后即刻至術(shù)后7天皮瓣血運(yùn)均較好于對(duì)照組,術(shù)后7天皮瓣成活率較對(duì)照組高,HE染色顯示皮瓣主要為表皮壞死,腫脹程度較輕,層次結(jié)構(gòu)較清晰,炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)程度輕,對(duì)照組皮瓣腫脹明顯,皮膚結(jié)構(gòu)崩解嚴(yán)重,層次不清,大量炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)。結(jié)論:A型肉毒毒素改善了擴(kuò)張皮瓣轉(zhuǎn)移術(shù)后的皮瓣血運(yùn),提高了皮瓣成活率。
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)人民解放軍空軍軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類(lèi)號(hào)】：R622
【圖文】：

圖 1.宿主對(duì)植入物的反應(yīng) A，在植入物與宿主體液接觸的一刻異物反應(yīng)即已開(kāi)始；B，伴隨著細(xì)胞碎片和血小板聚集的產(chǎn)生，宿主蛋白在植入物表面出現(xiàn)自發(fā)的吸收；C，血小板因子識(shí)別蛋白覆蓋的植入物表面，刺激中性粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞向該處梯度浸潤(rùn)，這些細(xì)胞產(chǎn)生活性氧、酶、細(xì)胞因子和趨化因子；C 和 D，隨后的幾天是中性粒細(xì)胞對(duì)植入?yún)^(qū)的巨噬細(xì)胞和未分化單核細(xì)胞的募集，此過(guò)程與中性粒細(xì)胞的退出同時(shí)進(jìn)行；D，巨噬細(xì)胞釋放信號(hào)分子吸引成纖維細(xì)胞與肌成纖維細(xì)胞，成纖維細(xì)胞及肌成纖維細(xì)胞分泌膠原蛋白包裹植入物，且肌成纖維細(xì)胞能收縮并對(duì)植入物產(chǎn)生壓力。[68]六.A 型肉毒毒素對(duì)血管及皮瓣血運(yùn)的作用血管的舒縮由神經(jīng)因素及體液因素共同調(diào)節(jié)，其中神經(jīng)因素占主要地位，且交感縮血管神經(jīng)纖維在血管的神經(jīng)支配中占據(jù)優(yōu)勢(shì)地位，甚至在絕大多數(shù)血管中交感縮血管神經(jīng)纖維是唯一的支配神經(jīng)，血管平滑肌交感性收縮是由節(jié)后纖維末梢釋放

于文身區(qū)域內(nèi)每間隔約2cm設(shè)計(jì)一注射點(diǎn)，共計(jì)兩排8個(gè)點(diǎn)(圖2)，將 A 型肉毒毒素以生理鹽水配制稀釋(100u BTX-A+20ml 生理鹽水配制成 5u/ml溶液)，再次將大鼠背部消毒后，BTX-A 組每點(diǎn)注射 1u（0.2ml）A 型肉毒毒素，對(duì)照組每點(diǎn)注射等量生理鹽水，注射層次均位于皮內(nèi)。圖 2 大鼠背部文身區(qū)域注射點(diǎn)設(shè)計(jì)，相鄰點(diǎn)間距 2cm2.3 手術(shù)過(guò)程及術(shù)后處理1) 消毒鋪單后，于大鼠項(xiàng)部垂直于脊柱方向設(shè)計(jì)約 2cm 擴(kuò)張器埋置切口，切口深達(dá)肌層淺面，在該層次以剝離剪向大鼠尾側(cè)剝離，剝離范圍以文身區(qū)域?yàn)榻�，然后自切口向大鼠頭側(cè)剝離出適當(dāng)腔隙用以放置內(nèi)置注射壺，剝離完成后，以擰干的生理鹽水紗布填塞腔隙壓迫止血，約 5 分鐘后取出；2) 觀察術(shù)區(qū)無(wú)活動(dòng)性出血后，檢查擴(kuò)張器有無(wú)漏氣、不張等情況，抽出擴(kuò)張器內(nèi)氣體，將擴(kuò)張器折疊后置入剝離腔隙，注射壺置于頭側(cè)剝離腔隙內(nèi)，于切口部位基底縫合 1 針固定導(dǎo)水管

圖 3 擴(kuò)張器埋置術(shù)后即刻，紅色箭頭所示為內(nèi)置注射壺，黃色箭頭所示為手術(shù)切口，藍(lán)色箭頭所示為擴(kuò)張囊埋置區(qū)域d 將兩組大鼠取出，腹腔麻醉、脫毛后，室溫下靜置約 15 分鐘，將區(qū)域分為前中后三部分，分別以激光多普勒血流監(jiān)測(cè)儀測(cè)量文身區(qū)分中央部位皮膚血運(yùn)情況并記錄，每點(diǎn)重復(fù)測(cè)量 5 次，取其平均值血運(yùn)情況（圖 4a-4c）；

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2782041