發(fā)布時(shí)間：2020-05-15 17:34

【摘要】：目的探索人參皂甙Rg1對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞的影響。方法首先制備SD大鼠脊髓損傷模型,一周后切取脊髓損傷組織,消化離心后用ACM(星形膠質(zhì)細(xì)胞條件培養(yǎng)基)培養(yǎng)細(xì)胞,實(shí)驗(yàn)分成兩組,一組在ACM中加入人參皂甙Rg1聯(lián)合培養(yǎng),另一組設(shè)為空白對(duì)照,一周后待細(xì)胞形成神經(jīng)球后加入神經(jīng)干細(xì)胞分化液自然分化,倒置顯微鏡觀察兩組中細(xì)胞生長(zhǎng)形態(tài);免疫熒光鑒定兩組中神經(jīng)球nestin及GFAP的表達(dá)及誘導(dǎo)分化后細(xì)胞的MAP-2陽(yáng)性表達(dá)率;Western Blot檢測(cè)兩組細(xì)胞轉(zhuǎn)分化培養(yǎng)過程中nestin及MAP-2蛋白表達(dá)量的差異。結(jié)果兩組中均能培養(yǎng)出神經(jīng)球,經(jīng)免疫熒光雙標(biāo)鑒定兩組神經(jīng)球均同時(shí)表達(dá)nestin/GFAP,以及誘導(dǎo)分化的細(xì)胞后均可見MAP-2陽(yáng)性表達(dá),但兩組中MAP-2陽(yáng)性表達(dá)率不同,Rg1組為(4.39±1.00)%,而對(duì)照組為(2.63±0.76)%,統(tǒng)計(jì)學(xué)檢測(cè)P0.05,提示Rg1組分化為神經(jīng)元的潛能較對(duì)照組增高。Western Blot檢測(cè)提示Rg1可以促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞損傷后nestin的表達(dá),以及分化后MAP-2的表達(dá)。結(jié)論人參皂甙Rg1可促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化形成神經(jīng)元樣細(xì)胞,為臨床治療脊髓損傷提供新的思路。
【圖文】：

人參皂甙 Rg1 促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的實(shí)驗(yàn)研究 結(jié) 果結(jié) 果一、神經(jīng)球的形態(tài)觀察原代星形膠質(zhì)細(xì)胞放置培養(yǎng)板中培養(yǎng) 2d 后，實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組中均可見細(xì)胞聚集現(xiàn)象，呈現(xiàn)大小不一的懸浮細(xì)胞團(tuán)塊，同時(shí)可以看到少許部分細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)。培養(yǎng)約一周時(shí)，可見兩組中懸浮細(xì)胞團(tuán)塊變大，形態(tài)接近球形，周圍折光性強(qiáng)，即神經(jīng)球產(chǎn)生。兩組間神經(jīng)球形態(tài)、大小近似相同，未見明顯區(qū)別。如圖 1 所示。

人參皂甙 Rg1 促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞向神經(jīng)元轉(zhuǎn)分化的實(shí)驗(yàn)研究 結(jié) 果三、人參皂甙 Rg1 促進(jìn)星形膠質(zhì)細(xì)胞轉(zhuǎn)分化形成的神經(jīng)元收集 Rg1 組及對(duì)照組中培養(yǎng)一周后形成的神經(jīng)球，將神經(jīng)球吹打成單細(xì)胞懸液用神經(jīng)干細(xì)胞培養(yǎng)基培養(yǎng)，經(jīng)細(xì)胞計(jì)數(shù)后，，均勻接種在多聚賴氨酸包被的蓋玻片上培養(yǎng)一周。待細(xì)胞鋪滿蓋玻片后經(jīng) MAP-2 免疫熒光和 DAPI 染核測(cè)定，結(jié)果顯示 Rg1組及對(duì)照組中均能看到 MAP-2 陽(yáng)性表達(dá)細(xì)胞，隨機(jī)每組記錄 5 個(gè)視野，陽(yáng)性細(xì)胞比例=陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)/總細(xì)胞數(shù)來初步計(jì)算得知，測(cè)得 Rg1 組中細(xì)胞分化為神經(jīng)元比例為( 4.39 ±1.00) %，對(duì)照組中相對(duì)較少，測(cè)得比例為( 2.63 ±0.76) %。有提高的趨勢(shì)，( P＜0.05，n=5) 。如圖 3 所示。
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R651.2

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 郭維瀟;陸政峰;成茂華;沈憶新;唐胤堯;劉以禮;;人參皂甙Rg1對(duì)嗅鞘細(xì)胞遷移能力的影響[J];中華實(shí)驗(yàn)外科雜志;2015年07期

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1 陸政峰;人參皂甙Rg1強(qiáng)化嗅鞘細(xì)胞生物學(xué)行為的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2665396