【摘要】：目的探討在軟骨細胞模型中成纖維細胞生長因子通路對長鏈非編碼RNA(long noncoding RNA,LncRNA)Malat1的調控作用。方法采用Ⅰ型成纖維細胞生長因子受體(fibroblast growth factor receptor 1,Fgfr1)組織特異性敲除小鼠和Ⅲ型成纖維細胞生長因子受體(fibroblast growth factor receptor 3,Fgfr3)敲除小鼠的原代軟骨,以及利用軟骨細胞系培養(yǎng)充當軟骨細胞模型,成纖維細胞生長因子2(fibroblast growth factor 2,FGF2)及下游細胞外調節(jié)蛋白激酶(extracellular regulated protein kinases,ERK)通路阻斷劑U0126處理細胞,利用熒光定量PCR檢測Malat1的表達變化。在ATDC5細胞模型中通過siRNA轉染干擾Malat1或Fgfr1,質粒轉染過表達Fgfr1,利用熒光定量PCR檢測Malat1的表達,細胞計數檢測細胞增殖變化。結果 Malat1被干擾24、36、48、60 h后,ATDC5細胞增殖速度顯著減慢(P0.05),FGF2處理ATDC5細胞24 h后Malat1表達顯著下降(P0.05),且ERK通路抑制劑U0126處理細胞后FGF2對Malat1的抑制作用消失。Fgfr1條件性敲除或si-Fgfr1干擾后Malat1表達顯著升高(P0.05),且FGF2對Malat1的抑制作用消失,Fgfr1在ATDC5細胞中過表達后Malat1表達與對照組相比顯著降低(P0.05)。結論軟骨細胞中FGF2可能通過Fgfr1激活下游ERK通路,抑制了Malat1的表達,從而影響軟骨細胞增殖。
【圖文】：

竅赴銃?C28I2以及人骨肉瘤細胞系SW1353均在傳代后48h收取，小鼠原代細胞于分離接種后72h收齲以NIH3T3細胞中Malat1的表達水平作為參照，結果表明，Malat1在小鼠原代軟骨細胞、小鼠軟骨前體細胞系ATDC5、人正常軟骨細胞系C28I2以及人骨肉瘤細胞系SW1353中均呈高豐度表達。以SW1353細胞中的表達豐度最高，其余幾種細胞中Malat1的表達豐度與NIH3T3中Malat1的表達豐度基本相等(圖1)。4.03.53.02.52.01.51.00.50Malat，

本文編號：2566161