【摘要】：目的研究miR-143過表達對人成骨肉瘤143B細胞侵襲及遷移能力的影響。方法通過慢病毒攜帶miR-143過表達載體轉(zhuǎn)染骨肉瘤143B細胞,實驗分為3組。實驗組轉(zhuǎn)染miR-143過表達序列,對照組轉(zhuǎn)染陰性對照NC序列,空白組為空白PBS。分別采用實時熒光定量PCR、Western blot、Transwell小室侵襲實驗和細胞劃痕實驗檢測各組基因、蛋白的表達以及細胞侵襲和遷移能力。結(jié)果實驗組miR-143基因和蛋白的表達,相較于對照組和空白組顯著增加(P0.05),而基質(zhì)金屬蛋白酶-13(MMP-13)基因和蛋白的表達相較于對照組和空白組顯著減少(P0.05);實驗組穿膜細胞數(shù)顯著低于對照組和空白組(P0.05);實驗組細胞劃痕愈合率顯著低于對照組和空白組(P0.05)。結(jié)論 miR-143過表達通過靶向MMP-13基因,進一步抑制成骨肉瘤143B細胞侵襲及遷移能力。
【圖文】：

細胞密度為2×106·mL－1的單細胞懸液。細胞融合率達到100%時用10μL的槍頭作筆直劃痕，劃痕完畢后，，PBS輕洗細胞3次，漂洗去除劃下的細胞，繼續(xù)培養(yǎng)。按0、24、48h時間點取樣，拍照，用ImageJ軟件分析培養(yǎng)0、24、48h時的各組劃痕情況。1．3統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS20.0統(tǒng)計軟件，采用單因素方差分析，多組間比較使用SNK法，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2．1觀察轉(zhuǎn)染率采用激光共聚焦顯微鏡檢測轉(zhuǎn)染效率，根據(jù)最強紅色熒光判斷轉(zhuǎn)染率，轉(zhuǎn)染率可達90%以上，證實本實驗的轉(zhuǎn)染方法是成功的，轉(zhuǎn)染率高。見圖1。A:熒光圖;B:透視圖;C:A和B組合圖圖1激光共聚焦顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染率·1810·廣東醫(yī)學(xué)2017年6月第38卷第12期GuangdongMedicalJournalJun．2017，Vol．38，No．12

無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。見表1。表1各組miＲ－143和MMP－13mＲNA的表達(n=6)xs

本文編號：2536841