【摘要】：目的觀察脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激退變?nèi)俗甸g盤髓核細(xì)胞前后,核因子kapp B(NF-κB)與炎癥因子表達(dá)及相互關(guān)系。方法體外培養(yǎng)退變的人椎間盤髓核細(xì)胞,設(shè)立對(duì)照組、LPS(500μg/m L)刺激組、NF-κB抑制劑(BAY11-7082)+LPS(500μg/m L)刺激組。ELISA方法檢測(cè)各組細(xì)胞培養(yǎng)液中炎癥因子TNF-α及IL-1β的含量,免疫熒光法檢測(cè)各組髓核細(xì)胞內(nèi)p65的表達(dá)及定位,Western blot檢測(cè)TNF-α、IL-1β、NF-κB結(jié)合蛋白p65以及磷酸化p-p65的表達(dá),Real-time PCR檢測(cè)TNF-α及IL-1β的表達(dá)。結(jié)果 LPS刺激髓核細(xì)胞后,p65入核增多,p-p65表達(dá)明顯增加,ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明LPS刺激組細(xì)胞培養(yǎng)液中炎癥因子TNF-α及IL-1β表達(dá)水平升高(P0.05),Western blot及Real-time PCR檢測(cè)結(jié)果也表明其髓核細(xì)胞內(nèi)炎癥因子TNF-α及IL-1β表達(dá)水平明顯上升(P0.05);而與LPS刺激組相比,NF-κB抑制劑+LPS刺激組p65入核減少,p-p65表達(dá)明顯降低,細(xì)胞培養(yǎng)液中炎癥因子TNF-α及IL-1β表達(dá)水平降低(P0.05),Western blot及Real-time PCR檢測(cè)結(jié)果也表明其髓核細(xì)胞內(nèi)炎癥因子TNF-α及IL-1β表達(dá)水平明顯下降(P0.05)。結(jié)論 LPS能夠通過激活人退變髓核細(xì)胞NF-κB信號(hào)通路,促進(jìn)炎性因子TNF-α及IL-1β表達(dá)增多,抑制NF-κB信號(hào)通路后可明顯減輕炎性因子的表達(dá)。
【圖文】：

條件:95℃3min;95℃15s，55℃30s，39個(gè)循環(huán);溶解分析(65～95℃)，以β-actin為內(nèi)參照標(biāo)化各組cDNA模板。1．3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS19．0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料用xs，

本文編號(hào)：2524488