發(fā)布時間：2019-05-30 12:47

【摘要】：目的:本實驗通過對SD大鼠吻合血管的經冷凍保存同種異體膝關節(jié)、未經冷凍的吻合血管的同種異體膝關節(jié)移植以及吻合血管同種異體膝關節(jié)移植短期應用Cy A的手術前后血漿中T淋巴細胞CD25+細胞比例及CD4+/CD8+值變化的檢測,以及移植前后血漿中IL-2、IFN-γ、IL-4、IL-10含量的測定,觀察移植后排斥反應情況,探討冷凍保存對吻合血管的同種異體骨關節(jié)移植的免疫反應的影響。方法:分組情況:SD大鼠55只,其中15只作為膝關節(jié)供體,空白對照組10只,吻合血管的同種異體膝關節(jié)移植組10例,吻合血管的冷凍保存的同種異體膝關節(jié)移植組10例,吻合血管的同種異體膝關節(jié)移植術后應用Cy A14天10例。參考Yaremchuk等[1]實驗模型,將供體股動、靜脈留取較長段,然后在腹股溝韌帶處切斷股動、靜脈,同時保留部分肌袖,鋸斷股骨及脛腓骨,移植時將此帶血管的膝關節(jié)移植于受體腹部皮下,血管與受體SD大鼠的股動、靜脈端端吻合。冷凍組將切取的供體膝關節(jié)放入盛有15%DMSO冷凍保護劑的凍存管中,于4℃冰箱中放置1.5小時,然后置于超低溫冰箱中,以1℃/min速度降溫至-60℃,維持1小時,投入-196℃液氮中保存28天。移植術前自液氮中取出供體膝關節(jié),放入37℃水浴中復溫,肝素生理鹽水沖洗管腔,去除低溫保護劑。術后各組肌注青霉素4萬U/kg.d,共用3 d;阿司匹林0.3 g,潘生丁25mg溶于250ml水中飲用,連續(xù)7 d。應用環(huán)孢霉素A組將Cy A溶于99%二甲基間酰胺(DMF),使其濃度達10mg/ml肌注5mg/kg.d,術后當天應用,連續(xù)14天。術前及術后1周、2周、3周、4周、6周、8周、10周、12周抽取各組SD大鼠的外周血,采用流氏細胞儀法檢測血漿中T淋巴細胞CD25+細胞比例及CD4+/CD8+值變化。用ELISA法測定IL-2、IFN-γ,IL-4、IL-10。采用LSD-t檢驗進行數(shù)據(jù)的組間比較。結果:非冷凍組術后CD25+,CD4+/CD8+,IL-2,IFN-γ,IL-4,IL-10增加明顯,與其他各組差異顯著,冷凍組和短期應用Cy A組術后CD25+,CD4+/CD8+,IL-2,IFN-γ,IL-4,IL-10均有所增高,兩者之間無統(tǒng)計學差異,與空白對照組數(shù)據(jù)相較有統(tǒng)計學意義。結論:深低溫冷凍對吻合血管同種異體骨關節(jié)移植與新鮮移植短期應用Cy A對免疫原性降低程度基本相同,能夠降低同種異體骨關節(jié)移植的免疫原性,利于誘導免疫耐受,具有抑制細胞因子產生以及延遲免疫排斥反應發(fā)生時間的作用。
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【學位授予單位】：蚌埠醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R687.4

【參考文獻】

相關期刊論文 前3條

1 吳俊偉,彭國光;同種異體骨移植重建下頜骨的臨床評價[J];廣東醫(yī)學;2005年03期

2 周建生,胡汝麒,潘功平,劉振華,肖玉周,張先龍,陳曉東;冷凍保存帶血管異體骨移植治療兒童骨缺損[J];中華顯微外科雜志;1998年03期

3 解先寬;吻合血管的同種異體骨關節(jié)移植的免疫反應[J];中國矯形外科雜志;2002年05期

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本文編號：2488855