【摘要】：目的:探究Ski在大鼠正常及活化星形膠質(zhì)細胞中的表達及隨時間變化的規(guī)律。方法:提取大鼠大腦皮質(zhì),分離星形膠質(zhì)細胞,體外培養(yǎng)。采用LPS刺激和細胞劃痕損傷2種方法活化星形膠質(zhì)細胞,均采用Western blot法檢測各個時點2種活化星形膠質(zhì)細胞中Ski和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)蛋白表達情況,利用間接免疫熒光法檢測Ski蛋白在星形膠質(zhì)細胞中的表達定位。結(jié)果:GFAP蛋白在星形膠質(zhì)細胞中固有表達,LPS活化和劃痕損傷后表達均上調(diào)。Ski在正常星形膠質(zhì)細胞中呈低表達狀態(tài),1 mg/L LPS活化星形膠質(zhì)細胞后,Ski表達開始增加,4 d時表達量最高(P0.05),6 d時開始下降,但仍高于未活化組;細胞劃痕損傷后Ski蛋白表達情況與上述情況高度一致。Ski在正常及LPS活化6 d星形膠質(zhì)細胞中表達主要集中在胞核,LPS活化后2和4 d時在胞質(zhì)中出現(xiàn)明確的Ski表達。結(jié)論:Ski蛋白表達于星形膠質(zhì)細胞,并在活化星形膠質(zhì)細胞中表達上調(diào)。由此,我們推測Ski蛋白可能調(diào)控星形膠質(zhì)細胞的活化、增殖等過程。
[Abstract]:Aim: to investigate the expression and changes of Ski in normal and activated astrocytes of rats. Methods: astrocytes were isolated from rat cerebral cortex and cultured in vitro. The expression of Ski and glial fibrillary acidic protein (GFAP) (GFAP) in the activated astrocytes were detected by Western blot method at each time point, and the activation of astrocytes was induced by LPS stimulation and cell scratch injury, and the expression of Ski and glial fibrillary acidic protein (GFAP) (GFAP) protein were detected by Western blot method. The expression of Ski protein in astrocytes was detected by indirect immunofluorescence assay. Results: the intrinsic expression of GFAP protein in astrocytes was up-regulated by LPS activation and scratch injury. The expression of Ski was low in normal astrocytes, and the expression of Ski began to increase after 1 mg/L LPS activation of astrocytes. The expression level was the highest at the 4th day (P0.05), and decreased at the 6th day, but still higher than that in the non-activated group. The expression of Ski protein in normal and LPS activated astrocytes was mainly concentrated in the nucleus of the astrocytes after scratch injury, and Ski was expressed in the cytoplasm at 2 and 4 days after LPS activation. Conclusion: Ski protein is expressed in astrocytes and up-regulated in activated astrocytes. Therefore, we speculate that Ski protein may regulate the activation and proliferation of astrocytes.
【作者單位】： 蘭州大學第二醫(yī)院骨科;蘭州大學第二醫(yī)院甘肅省骨關(guān)節(jié)疾病研究重點實驗室;第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院野戰(zhàn)外科研究所三室創(chuàng)傷燒傷與復(fù)合傷國家重點實驗室;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(No.30772299)
【分類號】：R651.2

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本文編號：2393236