【摘要】：目的：研究3個不同缺血預調適方案對大鼠肢體骨骼肌缺血再灌注損傷模型的影響,通過對骨骼肌組織學光鏡觀察和超微結構觀察,測定骨骼肌濕/干比值、血清乳酸脫氫酶(LDH)和肌酸激酶(CK)活性,檢測骨骼肌壞死程度,比較3種不同缺血預調適方案對肢體缺血再灌注損傷保護效果的差異,從中篩選出最優(yōu)方案,為進一步實驗研究奠定基礎。方法：使用無創(chuàng)動脈夾夾閉大鼠右側后肢股動脈,再灌注時松開動脈夾,建立肢體缺血再灌注損傷模型。健康成年雄性SD大鼠48只,隨機分為缺血再灌注組(缺血組)、缺血預調適A、B、C組共4組(n=12/組),缺血再灌注組為單純缺血再灌注組,于夾閉股動脈4小時后,恢復灌注。缺血預調適A組采用夾閉股動脈2分鐘,開夾2分鐘,依此循環(huán)6次,再夾閉股動脈缺血4小時,后恢復灌注。缺血預調適B組采用夾閉股動脈5分鐘,開夾5分鐘,依此循環(huán)3次,再夾閉股動脈缺血4小時,后恢復灌注。缺血預調適C組采用夾閉股動脈1分鐘,開夾1分鐘,依此循環(huán)10次,再缺血4小時,后恢復灌注。缺血組和缺血預調適組分別于再灌注后2小時、12小時、24小時時間點取股靜脈血和左、右后肢小腿肌組織,并處死大鼠。股靜脈血離心,取血清用ELISA法測定LDH和CK活性變化。取右后肢小腿比目魚肌,用HE染色觀察骨骼肌炎癥、水腫和壞死等病理學改變,用醋酸鈾-檸檬酸鉛染色,通過透射電鏡觀察骨骼肌超微結構改變。取左(自身空白對照)、右后肢腓腸肌稱取濕重,干燥后稱取干重,計算濕干重比。切取右后肢脛前肌,用TTC染色,觀察肌肉顏色變化并用SCION IMAGE圖像軟件計算壞死面積百分比,對比各組實驗結果。結果：缺血組再灌注后三個時間點(2小時、12小時、24小時)的CK值和LDH值均高于預調適組(P0.05)；再灌注后2小時,預調適A組的CK值和LDH值低于B、C組(P0.05),預調適B組的CK值和LDH值低于C組(P0.05)；再灌注后12小時,預調適A組的CK值和LDH值與B組無顯著差異(P0.05),預調適A組的CK值和LDH值均低于C組,再灌注24小時,預調適B組的CK值和LDH值均低于A、C組(P0.05),預調適A組的CK值和LDH值低于C組(P0.05)。濕/干重比：缺血組再灌注后24小時濕干重比值最大,預調適A組再灌注后2小時比值最小,缺血組不同時間點的比值均大于預調適組(P0.05),再灌注12小時內預調適A組的比值均小于B、C組(P0.05),預調適B組的比值低于C組(P0.05)；再灌注后12-24小時內,預調適B組的比值低于A、C組(P0.05),預調適A組的比值優(yōu)于C組(P0.05)。TTC染色結果：缺血組壞死面積比均高于預調適三組,再灌注后12-24小時內,預調適B組的壞死面積最少。HE染色示缺血組再灌注24小時可見肌原纖維變性扭曲中度水腫,橫紋結構紊亂,部分區(qū)域核固縮消失,血管充血,中性粒細胞浸潤預調適A組、預調適B組、預調適C組24小時骨骼肌損傷情況均輕于缺血組,其中以預調適A組、預調適B組骨骼肌損傷最少。電鏡觀察示缺血組再灌注24小時肌原纖維重度水腫、排列紊亂,肌絲溶解斷裂,糖元顆粒減少,線粒體腫脹,肌質網擴張。再灌注24小時,預調適A組、預調適B組、預調適C組肌原纖維排列紊亂、橫紋結構破壞、線粒體腫脹、肌質網擴張均明顯輕于缺血組,其中以預調適B組超微結構改變最少。結論：缺血預調適能減輕肢體缺血再灌注損傷,通過降低血漿中的CK、LDH含量,減少骨骼肌壞死面積,減輕損傷程度,從而起到保護作用。三種缺血預調適方案的保護效果具有差異性,且缺血預調適的保護具有時間限制。綜合分析,以3個循環(huán)5分鐘缺血/5分鐘再灌的預調適方案保護效果最優(yōu)。
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【學位授予單位】：廣西醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R687

【參考文獻】

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1 葉明翔;樊榮;魏保真;周京軍;胡玉珍;王躍民;裴建明;;缺血預處理時內源性強啡肽與κ阿片受體對缺血再灌注心肌的保護作用[J];第四軍醫(yī)大學學報;2009年17期

2 湯守營,王曉軍;缺血預處理減輕骨骼肌缺血再灌注損傷[J];臨床骨科雜志;1999年02期

3 陶沂,匡培根,石晶,田亞平;腺苷對缺血再灌注損傷時的保護作用——抗脂質過氧化[J];腦與神經疾病雜志;1996年01期

4 孫曉峰;趙宏;;舒芬太尼預處理對大鼠肢體缺血-再灌注肺損傷的影響[J];臨床麻醉學雜志;2015年01期

5 張振英;劉秀華;郭曉筍;劉鳳英;;鈣網蛋白參與缺血后處理減輕大鼠骨骼肌缺血/再灌注損傷[J];生理學報;2007年05期

6 王丹妹;何佟;吉麗敏;翁陽;羅志飛;莫燕娜;;三種溫度熱應激預處理對腸缺血-再灌注大鼠腸黏膜的影響[J];實用醫(yī)學雜志;2013年10期

7 王升儒;成少利;國榮;劉健;李玲;王明永;許潔;芮俊;錢立雄;高珂;;糖皮質激素預處理對兔心肌缺血再灌注損傷的保護作用[J];西安交通大學學報(醫(yī)學版);2009年03期

8 馮亞高;黃晨;;銀杏葉提取物預處理對肢體骨骼肌缺血再灌注損傷的保護作用[J];醫(yī)學信息;2009年02期

9 韓冰;王家祥;王兵;汪忠鎬;;紅花對下肢急性缺血-再灌注損傷致血管內皮細胞功能的影響[J];中國中西醫(yī)結合雜志;2009年02期

10 尚改萍;郭曉姝;王東吉;申向東;王黎敏;李旭炯;;頸交感神經阻滯對骨骼肌缺血再灌注損傷的作用[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志;2014年29期

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1 戚煒;缺血預處理和維生素C對大鼠骨骼肌缺血再灌注損傷的保護作用[D];天津醫(yī)科大學;2003年

2 朱銀川;纈沙坦預處理對大鼠心肌缺血再灌注損傷的影響[D];鄭州大學;2014年

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本文編號：2272684