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低氧對人骨髓間充質(zhì)干細胞向神經(jīng)細胞分化的影響

發(fā)布時間:2018-06-21 00:39

  本文選題:低氧 + 人骨髓間充質(zhì)干細胞 ; 參考:《廣東醫(yī)學(xué)》2017年20期


【摘要】:目的探討低氧對人骨髓間充質(zhì)干細胞(hB MSCs)向神經(jīng)細胞分化的影響。方法將第2代hB M-SCs進行傳代、純化,取第4代hB MSCs進行流式細胞儀檢測鑒定;以含1%FBS的α-MEM為基礎(chǔ)誘導(dǎo)培養(yǎng)基,根據(jù)處理條件不同分為4組:常氧對照組、低氧對照組(3%氧濃度)、常氧誘導(dǎo)組[添加20 ng/mL表皮生長因子(EGF)及20 ng/mL堿性成纖維細胞生長因子(bF GF)]、低氧誘導(dǎo)組(3%氧濃度下添加20 ng/mL EGF及20 ng/mL bF GF)。連續(xù)誘導(dǎo)3 d后,采用RT-PCR及Western blot技術(shù)檢測神經(jīng)元特異性烯醇化酶(NSE)、微管相關(guān)蛋白2(MAP-2)及膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)在基因及蛋白水平表達變化。結(jié)果第4代hB MSCs流式鑒定結(jié)果示:骨髓基質(zhì)標志CD105、CD90、CD29表達分別為95.8%、98.2%、95.1%,而造血細胞標志CD19表達為0.2%;與常氧對照組比較,低氧對照組NSE、MAP-2、GFAP在基因及蛋白水平表達均無明顯改變(P0.05),而常氧誘導(dǎo)組及低氧誘導(dǎo)組相應(yīng)表達均升高(P0.05),且低氧誘導(dǎo)組表達高于常氧誘導(dǎo)組(P0.05)。結(jié)論低氧促進EGF聯(lián)合bF GF對hB MSCs向神經(jīng)元細胞及神經(jīng)膠質(zhì)細胞分化的誘導(dǎo)作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of hypoxia on the differentiation of human bone marrow mesenchymal stem cells (hBMSCs) into neural cells. Methods the second passage of hB M-SCs was subcultured, purified, the fourth passage of hB MSCs was detected and identified by flow cytometry, and on the basis of 偽 -MEM containing 1s, the MSCs were divided into four groups according to different treatment conditions: normoxic control group, normal control group, and normal control group. Hypoxia control group (3% oxygen concentration), normoxia-induced group (20 ng / mL epidermal growth factor EGF) and 20 ng / mL basic fibroblast growth factor (BGF) were added 20 ng / mL EGF and 20 ng / mL BF at 3% oxygen concentration. After induction for 3 days, the expression of neuron-specific enolase (NSEP), microtubule-associated protein (MAP-2) and glial fibrillary acidic protein (GFAP) were detected by RT-PCR and Western blot. Results the expression of bone marrow stromal marker CD105, CD90, CD90, CD29, and hematopoietic cell marker CD19 was 95. 8%, 98. 2% and 0. 2% respectively, compared with that of normoxic control group. In hypoxic control group, the expression of MAP-2GFAP in gene and protein level was not significantly changed, but the expression of P0.05in normoxic and hypoxic groups was increased, and the expression in hypoxia induced group was higher than that in normoxia-induced group. Conclusion hypoxia can induce differentiation of hB MSCs into neuronal cells and glial cells.
【作者單位】: 景德鎮(zhèn)市第一人民醫(yī)院骨二科;九江學(xué)院轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)重點實驗室;
【基金】:江西省教育廳科學(xué)技術(shù)研究項目(編號:GJJ13740)
【分類號】:R651.2

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4 黃,

本文編號:2046371


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