本文選題：瘢痕 + 轉(zhuǎn)化生長因子-β1　； 參考：《浙江大學》2015年碩士論文

【摘要】：目的研究可溶性TGF-β受體Ⅱ(sTβRⅡ, TGF-β受體Ⅱ胞外區(qū))及突變型Smad4(Smad4△M4,野生型Smad4去除連接部位氨基酸序列)阻斷TGF-β/Smads通路雙位點較阻斷單一位點在抑制瘢痕相關蛋白生成方面的優(yōu)越性。 方法構(gòu)建分別含sTβRⅡ和Smad4AM4序列的兩種慢病毒,并以不同感染復數(shù)(MOI)轉(zhuǎn)染人皮膚成纖維細胞(HFF-1),篩選最適MOI值。將培養(yǎng)的HFF-1分為6組：共轉(zhuǎn)染組、sTβRⅡ組、Smad4AM4組、陰性病毒對照組、陽性對照組及空白對照組。共轉(zhuǎn)染組為兩種病毒1：1比例共轉(zhuǎn)染HFF-1; sTβRⅡ組及Smad4AM4組分別為單一病毒轉(zhuǎn)染HFF-1；陰性病毒對照組為空載體病毒轉(zhuǎn)染HFF-1,均采用TGF-β1刺激轉(zhuǎn)染后的細胞。陽性對照組為單用TGF-β1刺激HFF-1；空白對照組為未作任何處理的HFF-1。采用Western Blot/qPCR法檢測各組纖連蛋白的相對表達量；ELISA法、Sircol膠原定量試劑盒分別檢測各組結(jié)締組織生長因子(CTGF)及總膠原蛋白表達量。采用SNK-q檢驗對各組數(shù)據(jù)進行分析。 結(jié)果兩種慢病毒轉(zhuǎn)染HFF-1最適MOI均為50。相對于空白對照組,陽性對照組及陰性病毒對照組纖連蛋白、CTGF及膠原蛋白的表達量最高(P0.05),但兩組間差異無統(tǒng)計意義(P0.05)；sTβRII組及Smad4△M4組表達量均低于陽性對照組及陰性病毒對照組(P0.05)；共轉(zhuǎn)染組表達量更低(P0.05)。 結(jié)論sTβRII、Smad4AM4均可顯著抑制TGF-β1對HFF-1的刺激作用,且共轉(zhuǎn)染比單基因轉(zhuǎn)染的抑制作用更強,從而為臨床抗瘢痕的基因治療提供新思路。
[Abstract]:Objective to study the effects of soluble TGF- 尾 receptor 鈪，

本文編號：1841389