去盆腔神經(jīng)大鼠結(jié)腸傳輸功能變化及結(jié)腸黏膜TRPA1蛋白表達(dá)變化研究
本文選題:去盆腔神經(jīng)支配 + 結(jié)腸傳輸; 參考:《第三軍醫(yī)大學(xué)》2015年碩士論文
【摘要】:目的產(chǎn)傷、手術(shù)或創(chuàng)傷造成的盆腔神經(jīng)損傷是臨床常見的結(jié)直腸動力紊亂原因,嚴(yán)重影響病人的生活質(zhì)量,臨床處理非常棘手。不管是動物實(shí)驗(yàn)還是臨床上均觀察到盆腔神經(jīng)損傷后結(jié)腸傳輸功能呈現(xiàn)一定的自適應(yīng)性恢復(fù)趨勢,詳細(xì)的調(diào)控機(jī)制不清。如果能夠闡明這一適應(yīng)性恢復(fù)的調(diào)控機(jī)制,就有望通過一定的干預(yù)措施加速和強(qiáng)化這一過程。本課題通過檢測去盆腔神經(jīng)模型動物結(jié)腸傳輸功能及其黏膜TRPA1表達(dá)變化,旨在探討去盆腔神經(jīng)支配后結(jié)腸傳輸功能的變化及其可能作用機(jī)制,為盆腔神經(jīng)損傷后的腸動力紊亂及適應(yīng)性恢復(fù)機(jī)制研究提供基礎(chǔ)。方法一、實(shí)驗(yàn)對象及分組成年雄性Sprague Dawley大鼠96只,6周齡,體質(zhì)量(200±10)g,隨機(jī)分為兩部分:結(jié)腸傳輸功能檢測部分42只,分為手術(shù)組與假手術(shù)組,各21只;TRPA1蛋白檢測部分54只,分為對照組、假手術(shù)組及手術(shù)組,各18只。二、模型制備1.手術(shù)組:取下腹正中切口,長約3cm,濕紗布隔離小腸于上腹部,解剖鏡下辨認(rèn)清楚膀胱、直腸、精囊腺、前列腺,用棉簽在前列腺后下方鈍性剝離出盆腔神經(jīng),顯微剪剪斷,縫合切口,關(guān)閉腹腔。2.假手術(shù)組:假手術(shù)組模型制備僅需開腹后顯露雙側(cè)盆腔神經(jīng),不切斷,然后關(guān)腹,注意控制切口長度同手術(shù)組。3.對照組:無任何處理。4.行結(jié)腸傳輸功能檢測部分大鼠在關(guān)腹前需行盲腸置管,操作如下:術(shù)中顯露盲腸,在盲腸造口,置入一根硅膠管至近端結(jié)腸,用3-0絲線荷包縫合盲腸并固定,導(dǎo)管經(jīng)左側(cè)腹壁穿出,經(jīng)皮下隧道引至頸后并固定于皮膚上。分別在術(shù)后第1、3、7天通過導(dǎo)管注入鉻[51Cr]酸鈉注射液0.2mL至近端結(jié)腸。給藥3h后取出整段結(jié)腸平分為10段,同時收集3h內(nèi)排出的糞便并標(biāo)記為11段。測量每段的放射性通過伽瑪計(jì)數(shù)器測定。計(jì)算51cr分布的幾何中心(geometriccenter,gc),以gc值代表結(jié)腸傳輸功能。三、檢測指標(biāo)1.利用放射性同位素法(51cr)測定術(shù)后第1天、第3天、第7天結(jié)腸傳輸功能。2.利用westernblotting檢測術(shù)后第1天、第3天、第7天近端及遠(yuǎn)端結(jié)腸黏膜trpa1的表達(dá)情況。結(jié)果一、手術(shù)組與假手術(shù)組術(shù)后結(jié)腸傳輸功能變化1.手術(shù)組術(shù)后第3天與第1天相比結(jié)腸傳輸功能明顯恢復(fù)(p0.05),術(shù)后第7天與第3天相比進(jìn)一步恢復(fù)(p0.05),提示手術(shù)組術(shù)后第7天結(jié)腸傳輸功能恢復(fù)。2.假手術(shù)組術(shù)后第3天與第1天相比結(jié)腸傳輸功能顯著恢復(fù)(p0.05),術(shù)后第7天與第3天相比差異無顯著性(p0.05),提示假手術(shù)組術(shù)后第3天結(jié)腸傳輸功能恢復(fù)。3.術(shù)后第1天手術(shù)組較假手術(shù)組51cr分布的幾何中心明顯降低(p0.05),表明手術(shù)組結(jié)腸傳輸延遲更為明顯。術(shù)后第3天,手術(shù)組51cr分布的幾何中心仍顯著低于假手術(shù)組(p0.05)。而術(shù)后第7天與假手術(shù)組相比,手術(shù)組51cr分布的幾何中心差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,提示手術(shù)組結(jié)腸傳輸功能術(shù)后第7天基本恢復(fù)正常,且隨時間延長呈現(xiàn)逐漸增高的趨勢。二、近端結(jié)腸黏膜trpa1蛋白表達(dá)變化1.對照組、假手術(shù)組和手術(shù)組近端結(jié)腸黏膜中trpa1相對表達(dá)量比較,術(shù)后第1天,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(f值=73.497,p0.05),進(jìn)一步與對照組比較,假手術(shù)組及手術(shù)組表達(dá)均顯著下調(diào)(p0.05),手術(shù)組較假手術(shù)組下調(diào)更顯著(p0.05);術(shù)后第3天,三組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(f值=2.087,p0.05)。術(shù)后第7天,三組間差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(f值=0.656,p0.05)。2.假手術(shù)組及手術(shù)組術(shù)后第1天、第3天、第7天間比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(f值=5.651、41.005,p0.05),進(jìn)一步兩兩比較提示在術(shù)后第3天都明顯上調(diào)(p0.05),第7天與第3天相比則差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。三、遠(yuǎn)端結(jié)腸黏膜trpa1蛋白表達(dá)變化1.對照組、假手術(shù)組和手術(shù)組遠(yuǎn)端結(jié)腸黏膜中trpa1相對表達(dá)量比較,術(shù)后第1天,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(f值=58.773,p0.05),進(jìn)一步與對照組比較,假手術(shù)組及手術(shù)組表達(dá)均顯著下調(diào)(p0.05),手術(shù)組較假手術(shù)組下調(diào)更顯著(p0.05);術(shù)后第3天,三組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F值=8.680,p0.05),進(jìn)一步兩兩比較,假手術(shù)組與對照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05),手術(shù)組與對照組差異顯著(p0.05),與假手術(shù)組比較,手術(shù)組下調(diào)顯著(p0.05);術(shù)后第7天,三組間差異亦無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F值=1.319,p0.05)。2.假手術(shù)組術(shù)后第1天、第3天、第7天間比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F值=16.975,p0.05),進(jìn)一步比較提示在術(shù)后第3天上調(diào)(p0.05),第7天與第3天相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。3.手術(shù)組術(shù)后第1天、第3天、第7天間比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F值=50.417,p0.05),進(jìn)一步比較提示TRPA1相對表達(dá)量在術(shù)后第3天上調(diào)(p0.05),第7天與第3天相比繼續(xù)上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。結(jié)論1.去盆腔神經(jīng)后大鼠結(jié)腸傳輸功能明顯減弱,并隨時間延長呈一明顯的恢復(fù)趨勢。2.去盆腔神經(jīng)后大鼠遠(yuǎn)端結(jié)腸黏膜TRPA1蛋白表達(dá)明顯減弱,并隨時間延長呈一明顯的恢復(fù)趨勢。3.去盆腔神經(jīng)后大鼠結(jié)腸傳輸功能與遠(yuǎn)端結(jié)腸黏膜TRPA1蛋白表達(dá)恢復(fù)趨勢高度一致。通過本課題研究,我們發(fā)現(xiàn)去盆腔神經(jīng)后,大鼠遠(yuǎn)端結(jié)腸黏膜TRPA1蛋白表達(dá)明顯減弱,并隨時間延長呈一明顯的恢復(fù)趨勢,此趨勢與去盆腔神經(jīng)大鼠結(jié)腸傳輸功能恢復(fù)趨勢高度一致。據(jù)此,我們認(rèn)為盆腔神經(jīng)損傷后結(jié)腸動力的適應(yīng)性恢復(fù)與遠(yuǎn)端結(jié)腸黏膜TRPA1蛋白的表達(dá)變化有關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】:第三軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R619.5
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,本文編號:1758792
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