本文選題：脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞　切入點(diǎn)：骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞　出處：《中國(guó)骨質(zhì)疏松雜志》2017年05期 　論文類型：期刊論文

【摘要】：目的比較成人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(ASCs)、臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UC-MSCs)和成人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)的成骨能力,選擇優(yōu)勢(shì)干細(xì)胞種類作為應(yīng)用于骨組織工程治療骨缺損的種子細(xì)胞。方法采用含10%胎牛血清的DMEM/Ham’s F-12培養(yǎng)液培養(yǎng)3種MSCs。取3種MSCs的P3代,通過(guò)CCK8方法檢測(cè)其增殖能力;通過(guò)流式細(xì)胞儀進(jìn)行鑒定;通過(guò)堿性磷酸酶(ALP)和茜素紅染色檢測(cè)骨分化蛋白ALP的分泌和礦化鈣結(jié)節(jié)的沉積,并對(duì)鈣結(jié)節(jié)進(jìn)行定量分析;通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR(RT-q PCR)方法檢測(cè)骨再生相關(guān)基因的表達(dá)。結(jié)果 3種P3代MSCs在3~5d之間增殖均處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期;流式鑒定3種細(xì)胞的表面標(biāo)志物陽(yáng)性率:CD44、CD90和CD105均高于97%,陰性率:CD14、CD34和CD45均低于1%;ALP染色結(jié)果顯示3種MSCs成骨誘導(dǎo)9d時(shí),細(xì)胞內(nèi)均表達(dá)ALP,茜素紅染色結(jié)果顯示成骨誘導(dǎo)18d時(shí),均呈現(xiàn)較好的礦化能力,BMSCs和UC-MSCs成骨誘導(dǎo)后形成的鈣結(jié)節(jié)無(wú)顯著性差異;RT-q PCR結(jié)果顯示3種MSCs成骨誘導(dǎo)組相比較于對(duì)照組,成骨再生相關(guān)基因Osterix、ALP、I型膠原(COL1)和骨鈣素(OCN)均顯著性高表達(dá);3種MSCs成骨誘導(dǎo)9d時(shí),UC-MSCs實(shí)驗(yàn)組的COLI基因表達(dá)顯著性高于BMSCs,成骨誘導(dǎo)18d時(shí),ASCs實(shí)驗(yàn)組的Osterix基因表達(dá)顯著性高于BMSCs。結(jié)論 ASCs和UC-MSCs具有一定的成骨礦化能力,有望成為骨組織工程治療骨缺損的種子細(xì)胞。
[Abstract]:Objective to compare the osteogenic ability of adult adipose mesenchymal stem cells (ASCs), umbilical cord mesenchymal stem cells (UC-MSCs) and adult bone marrow mesenchymal stem cells (BMSCs). Methods three kinds of MSCs were cultured in DMEM/Ham's F-12 culture medium containing 10% fetal bovine serum. P3 generation of three kinds of MSCs were obtained and the proliferative ability was detected by CCK8 method. The secretion of bone differentiation protein (ALP) and the deposition of mineralized calcium nodules were detected by alkaline phosphatase (ALP) and alizarin red staining. The expression of bone regeneration related genes was detected by real-time fluorescence quantitative PCR(RT-q. Results the proliferation of three P3 generation MSCs was in logarithmic growth phase within 3days. The positive rates of CD105 and CD90 in three kinds of cells were higher than 97, and the negative rates of CD14, CD34 and CD45 were lower than those of 1T. The results showed that ALP was expressed in the three kinds of MSCs cells after 9 days of osteogenesis, and the results of alizarin red staining showed that at 18 days of osteogenesis. The results of RT-Q PCR showed that there was no significant difference between the three MSCs osteogenic groups and the control group. The expression of COLI gene in UC-MSCs group was significantly higher than that in BMSCs group on the 9th day after osteogenesis induction. The expression of Osterix gene in the experimental group was significantly higher than that in BMSCs group on the 18th day after osteogenesis induction, and the expression of Osterix gene in the experimental group was significantly higher than that in the control group at the 18th day after osteogenesis induction. Conclusion ASCs and UC-MSCs have some osteogenic mineralization ability. It is expected to be a seed cell for bone tissue engineering in the treatment of bone defect.
【作者單位】： 天津市康婷生物工程有限公司;
【基金】：天津市自然科學(xué)基金(14JCYBJC43900)
【分類號(hào)】：R68

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本文編號(hào)：1598780