本文關鍵詞：內毒素誘導退變人椎間盤髓核細胞凋亡　出處：《基礎醫(yī)學與臨床》2017年05期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的觀察內毒素(LPS)刺激退變人椎間盤髓核細胞前后,核因子kapp B(NF-κB)的活化與細胞凋亡的相互關系。方法體外培養(yǎng)退變的人椎間盤髓核細胞,采用CCK-8法測定LPS在不同濃度下(100、200、500和1 000μg/m L)對髓核細胞增殖影響,并篩選合適的刺激濃度;設立空白對照組,單純LPS(500μg/m L)刺激組,NF-κB抑制劑(BAY11-7082)+LPS(500μg/m L)刺激組,以Hochest33258染色以及Annexin V-PI雙標法檢測細胞凋亡;Western blot檢測凋亡相關蛋白caspase-3、PARP、NF-κB結合蛋白P65以及磷酸化P-P65的表達。結果 CCK-8實驗結果顯示當LPS濃度為500μg/m L能明顯降低細胞的活力。與空白對照組相比,單純LPS刺激組細胞凋亡率上升(P0.05),P-P65表達明顯增加,其凋亡蛋白活化型caspase-3和PARP降解產物表達也增高(P0.05)。而與單純LPS刺激組相比,NF-κB抑制劑+LPS刺激組細胞凋亡率下降(P0.05),P-P65表達明顯降低,其凋亡蛋白活化型caspase-3和PARP降解產物表達也降低(P0.05)。結論 NF-κB信號通路可能與椎間盤退變時髓核細胞凋亡的發(fā)生密切相關,值得進一步研究。
[Abstract]:Objective to observe the effect of endotoxin (LPS) stimulation on degenerative human disc nucleus pulposus cells. The relationship between the activation of nuclear factor kapp BnNF- 魏 B and apoptosis. Methods the degenerative human intervertebral disc nucleus pulposus cells were cultured in vitro. The effects of LPS on the proliferation of nucleus pulposus cells at different concentrations were determined by CCK-8 assay. The control group was treated with LPS(500 渭 g / mL alone, and the NF- 魏 B inhibitor BAY11-7082 (LPS(500 渭 g / mL) was used. Apoptosis was detected by Hochest33258 staining and Annexin V-PI double labeling method. The apoptosis-related protein caspase-3 was detected by Western blot. Expression of NF- 魏 B binding protein p65 and phosphorylated P-P65. Results CCK-8 results showed that when the concentration of LPS was 500 渭 g / m, L can significantly reduce the cell viability, compared with the blank control group. The expression of P-P65 was significantly increased in LPS stimulated group (P 0.05). The expression of apoptosis-activated caspase-3 and PARP degradation products was also higher than that of LPS alone. The apoptotic rate of NF- 魏 B inhibitor LPS was decreased and the expression of P-P65 was significantly decreased. The expression of apoptosis-activated caspase-3 and PARP degradation products also decreased (P 0.05). Conclusion NF- 魏 B signaling pathway may be closely related to the apoptosis of nucleus pulposus cells during disc degeneration. It is worth further study.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院骨科;重慶市合川區(qū)人民醫(yī)院骨科;
【基金】：國家自然科學基金(81572202)
【分類號】：R681.5
【正文快照】： 椎間盤退變是腰椎間盤突出、腰椎滑脫、腰椎管狹窄及椎間盤源性腰痛等脊柱退行性疾病的最主要原因[1],但其退變的原因和分子機制目前尚未完全闡明。核轉錄因子kappa B(nuclear facor-kappa B,NF-κB)是一種多功能的轉錄因子,其存在于大多數(shù)細胞內,在參與炎性反應及細胞損傷方

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本文編號：1440850