本文關(guān)鍵詞：脫細(xì)胞纖維環(huán)基質(zhì)的制備及其復(fù)合材料對纖維環(huán)源干細(xì)胞分化的調(diào)控研究

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【摘要】：目的:制備豬源性脫細(xì)胞纖維環(huán)基質(zhì)(Decellularized Annulus Fibrosus Matrix,DAFM),探究該基質(zhì)對兔纖維環(huán)源干細(xì)胞(Annulus Fibrosus-derived stem cells,AFSCs)的分化行為的作用。最終制備具有不同彈性模量的脫細(xì)胞纖維環(huán)基質(zhì)復(fù)合材料,考察其對兔纖維環(huán)源干細(xì)胞分化的調(diào)控作用。方法:通過豬纖維環(huán)組織制備DAFM膜,并從新西蘭大白兔獲得AFSCs后,將其接種于DAFM膜上,分別進(jìn)行成脂、成骨、成軟骨三系分化誘導(dǎo),以染色及RT-qPCR考察DAFM對干細(xì)胞分化行為的影響;將AFSCs種植于涂覆DAFM與涂覆I型膠原的不同彈性模量聚丙烯酰胺凝膠(Polyacrylamide Gel,PAG)上,通過RT-qPCR及Elisa比較AFSCs在兩者上的分化能力;制備不同彈性模量的DAFM與殼聚糖結(jié)合的復(fù)合材料,通過RT-qPCR,Elisa等方法測定AFSCs在其之上的分化能力。結(jié)果:制備出豬源DAFM;AFSCs在DAFM上生長良好,誘導(dǎo)分化結(jié)果顯示DAFM能較好維持AFSCs的干細(xì)胞分化差異性。制備出涂覆DAFM與涂覆collagen-I的PAG;實驗顯示AFSCs在兩者材料之上的增殖性能良好,但基因及蛋白檢測均顯示AFSCs于涂覆DAFM的各彈性模量PAG上的collagen I,collagen II和aggrecan基因的表達(dá)量均更高;同時collagen I表達(dá)隨基質(zhì)彈性模量增大而增大,collagen II及aggrecan表達(dá)與其相反。成功制備不同彈性模量的DAFM與殼聚糖結(jié)合的復(fù)合材料,基因及蛋白檢測顯示出其AFSCs在其上的特性基因及蛋白表達(dá)隨復(fù)合材料彈性模量變化趨勢與實際纖維環(huán)組織一致。結(jié)論:DAFM有利于維持兔AFSCs的分化潛能,DAFM與殼聚糖結(jié)合的復(fù)合材料能有效調(diào)控兔AFSCs與實際纖維環(huán)各區(qū)一致的分化能力。
【關(guān)鍵詞】：脫細(xì)胞纖維環(huán)基質(zhì) 纖維環(huán)源干細(xì)胞 復(fù)合材料 殼聚糖 聚丙烯酰胺凝膠
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R681.5
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• Abstract7-11
• 引言11-13
• 第一部分 脫細(xì)胞纖維環(huán)基質(zhì)的制備及其表征13-30
• 材料與方法13-22
• 結(jié)果22-26
• 討論26-29
• 結(jié)論29-30
• 第二部分 DAFM及不同彈性模量PAG對AFSCs分化的調(diào)控30-46
• 材料與方法30-39
• 結(jié)果39-42
• 討論42-45
• 結(jié)論45-46
• 第三部分 DAFM/殼聚糖復(fù)合材料的制備及其對AFSCs的分化調(diào)控46-59
• 材料與方法46-52
• 結(jié)果52-56
• 討論56-58
• 結(jié)論58-59
• 全文總結(jié)59-60
• 綜述60-68
• 參考文獻(xiàn)68-78
• 中英文縮略詞對照表78-80
• 攻讀學(xué)位期間公開發(fā)表的論文80-81
• 參加學(xué)術(shù)會議情況81-82
• 主持與參與的科研項目82-83
• 致謝83-85

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本文編號：1105164