本文關(guān)鍵詞：丙泊酚對脂多糖誘導(dǎo)的小鼠腎小球系膜細(xì)胞的影響

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【摘要】：目的本文旨在通過用脂多糖刺激小鼠腎小球系膜細(xì)胞來研究丙泊酚對脂多糖刺激的腎小球系膜細(xì)胞的增殖、凋亡及分泌NO的影響。方法實驗采用的是小鼠腎小球系膜細(xì)胞(SV40MES13),當(dāng)細(xì)胞培養(yǎng)至3-5代時,常規(guī)消化收集細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞濃度,均勻種植在兩塊48孔板和一塊96孔板上。將細(xì)胞分為8組,即空白對照組、丙泊酚組(5,10,20μg/ml)、脂多糖組(10μg/ml)和脂多糖(10μg/ml)+丙泊酚(5,10,20μg/ml)組,每組各設(shè)6個復(fù)孔。按照以上分組向各個孔內(nèi)添加不同藥物刺激,脂多糖(10μg/ml)+丙泊酚(5,10,20μg/ml)組需在添加脂多糖1小時后再加入不同劑量的丙泊酚。最后將細(xì)胞放入CO2培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)48小時。在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況并照相,并通過MTT法檢測細(xì)胞的增殖程度;收集各孔細(xì)胞培養(yǎng)基用于ELISA法檢測細(xì)胞分泌NO的情況,并消化收集各孔細(xì)胞,采用流式細(xì)胞儀進行檢測分析細(xì)胞的凋亡情況。結(jié)果1倒置顯微鏡下觀察,脂多糖組細(xì)胞數(shù)量明顯多于空白對照組與單純丙泊酚組,且細(xì)胞均由不規(guī)則形變成圓形;脂多糖+丙泊酚(10,20μg/ml)組細(xì)胞數(shù)量較脂多糖組明顯減少,并有部分細(xì)胞出現(xiàn)空泡或懸浮,而脂多糖+丙泊酚5μg/ml組細(xì)胞較脂多糖組變化不明顯。2與空白對照組相比,單純丙泊酚(5,10,20μg/ml)組細(xì)胞的增殖程度、凋亡率和NO分泌情況均沒有明顯變化(P0.05),脂多糖組細(xì)胞的增殖程度及NO的分泌均顯著升高,而凋亡率降低(P0.05);在脂多糖處理后再加入中、高濃度丙泊酚(10,20μg/ml)均可導(dǎo)致細(xì)胞的增殖程度減弱,NO的分泌減少,細(xì)胞凋亡率有所增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),并且差異在脂多糖+丙泊酚20μg/ml組中更明顯,而在脂多糖處理后再加入低濃度(5μg/ml)的丙泊酚則沒有明顯變化(P0.05)。結(jié)論1低、中、高濃度的丙泊酚(5,10,20μg/ml)對正常小鼠腎小球系膜細(xì)胞的增殖、凋亡及NO的分泌均沒有明顯影響。2中、高濃度的丙泊酚(10,20μg/ml)能夠抑制脂多糖刺激的小鼠腎小球系膜細(xì)胞發(fā)生大量增殖及NO過度分泌,并能促進過量增殖的細(xì)胞發(fā)生凋亡,對腎臟起到保護作用,并且高濃度的丙泊酚(20μg/ml)作用更明顯,而低濃度的丙泊酚(5μg/ml)并沒有這一作用。
【關(guān)鍵詞】：丙泊酚 腎小球系膜細(xì)胞 脂多糖 一氧化氮 細(xì)胞增殖 細(xì)胞凋亡
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R614
【目錄】：

• 摘要4-6
• abstract6-10
• 英文縮略表10-11
• 引言11-13
• 第1章 實驗研究13-29
• 1.1 實驗材料13-14
• 1.1.1 實驗細(xì)胞13
• 1.1.2 實驗藥品和試劑13-14
• 1.1.3 主要儀器設(shè)備14
• 1.2 實驗方法14-17
• 1.2.1 培養(yǎng)小鼠腎小球系膜細(xì)胞14-15
• 1.2.2 實驗分組15
• 1.2.3 倒置顯微鏡下觀察腎小球系膜細(xì)胞的生長情況15
• 1.2.4 MTT法檢測腎小球系膜細(xì)胞的增殖情況15-16
• 1.2.5 流式細(xì)胞術(shù)檢測腎小球系膜細(xì)胞的凋亡情況16
• 1.2.6 ELISA法檢測腎小球系膜細(xì)胞的培養(yǎng)基中NO含量16-17
• 1.2.7 統(tǒng)計學(xué)方法17
• 1.3 實驗結(jié)果17-22
• 1.3.1 倒置相差顯微鏡下腎小球系膜細(xì)胞的生長情況17-18
• 1.3.2 各處理組腎小球系膜細(xì)胞的增殖情況比較18
• 1.3.3 各處理組腎小球系膜細(xì)胞的凋亡率的比較18-21
• 1.3.4 各處理組腎小球系膜細(xì)胞的NO分泌情況比較21-22
• 1.4 討論22-26
• 1.5 小結(jié)26
• 參考文獻26-29
• 第2章 綜述 膿毒癥及丙泊酚生物學(xué)作用的研究進展29-44
• 2.1 膿毒癥29-32
• 2.1.1 膿毒癥的發(fā)病機制29-31
• 2.1.2 重要器官功能損傷31-32
• 2.1.3 膿毒癥的防治藥物32
• 2.2 丙泊酚32-39
• 2.2.1 丙泊酚的麻醉作用32-33
• 2.2.2 丙泊酚的免疫調(diào)節(jié)作用33-34
• 2.2.3 丙泊酚的抗氧化作用34-35
• 2.2.4 丙泊酚的器官保護作用35-37
• 2.2.5 丙泊酚輸注綜合征（propofol infusion syndrome, PRIS）37-39
• 參考文獻39-44
• 結(jié)論44-45
• 致謝45-46
• 導(dǎo)師簡介46-47
• 作者簡介47-48
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集48

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