骨形態(tài)發(fā)生蛋白2,7-聚乳酸—羥基乙酸共聚物復(fù)合支架的制備及其細(xì)胞成骨能力研究
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更多相關(guān)文章: 骨形態(tài)發(fā)生蛋白 支架 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 成骨
【摘要】:目的:研制一種可同時釋放骨形態(tài)發(fā)生蛋白2和骨形態(tài)發(fā)生蛋白7的生物活性支架,用于干細(xì)胞成骨誘導(dǎo)分化的應(yīng)用研究。方法:制備出合適的BMP2微球(B2MS)和BMP7微球(B7MS)。采用相分離的手法制備PLGA三維多孔支架。采用改良的二氯甲烷熏蒸法,將BMP微球粘附在PLGA支架上,形成BMP2-PLGA復(fù)合支架(B2MS-PSC)和BMP7-PLGA復(fù)合支架(B7MS-PSC),并檢測BMP2和BMP7的緩釋效果。將人來源的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞種植在復(fù)合支架中,研究支架上的細(xì)胞粘附能力、細(xì)胞增殖能力,及其成骨分化能力。結(jié)果:1.成功制備同時負(fù)載BMP2微球和BMP7微球的PLGA復(fù)合支架(B2B7MS-PSC)。在本次實驗的9天培養(yǎng)過程中,在培養(yǎng)的第3天B2B7MS-PSC的堿性磷酸酶(ALP)明顯高于不含BMP微粒的支架(P0.05),在第6天堿性磷酸酶(ALP)高于B2MS-PSC,B7MS-PSC(P0.01)。2.電鏡觀察9天后所有的樣品都能展現(xiàn)出良好的細(xì)胞粘附形態(tài),支架上基本所有的細(xì)胞以細(xì)胞群體的形式,粘附在三維的多孔結(jié)構(gòu)空間上,細(xì)胞之間聯(lián)系十分為緊密,部分細(xì)胞還能看見顯著的細(xì)胞偽足結(jié)構(gòu)。3.培養(yǎng)6天后,B2B7MS-PSC上細(xì)胞的增殖能力高于其它支架(P0.01),4.細(xì)胞培養(yǎng)第9天B2B7MS-PSC支架的1型膠原蛋白(COL-1,collagen type-1)、骨鈣素(OCN,osteocalcin)、骨保護(hù)素(OPG,osteoprotegerin)和骨橋蛋白(OPN,osteopontin)表達(dá)明顯高于B2MS-PSC或B7MS-PSC支架(P0.05)結(jié)論:1.成功制備一種可同時釋放BMP2和BMP7的可用于骨修復(fù)的生物活性支架。2.該支架能夠成功誘導(dǎo)人骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行成骨分化,其誘導(dǎo)細(xì)胞增殖能力和成骨分化能力均優(yōu)于單獨一種BMP釋放的支架。
【關(guān)鍵詞】:骨形態(tài)發(fā)生蛋白 支架 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞 成骨
【學(xué)位授予單位】:西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R318.08;R687
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- 英文摘要6-8
- 前言8-11
- 材料與方法11-21
- 結(jié)果21-34
- 討論34-48
- 結(jié)論48-49
- 參考文獻(xiàn)49-56
- 英漢縮略詞對照表56-57
- 致謝57-58
- 骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP)骨科臨床應(yīng)用進(jìn)展(綜述)58-72
- 參考文獻(xiàn)66-72
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