發(fā)布時(shí)間：2017-10-06 18:34

  本文關(guān)鍵詞：納米材料的制備及其在蛋白激酶活性檢測中的應(yīng)用

  更多相關(guān)文章： 石墨烯量子點(diǎn) 多肽 蛋白質(zhì)激酶 抑制劑 金納米粒子 鞣花酸 光致發(fā)光

【摘要】：本論文由綜述和研究工作兩部分組成。綜述部分，首先綜述了納米材料的相關(guān)概念，納米材料的各種特性及其應(yīng)用；其次，介紹了蛋白質(zhì)激酶的實(shí)際意義以及各種分析方法；最后，簡單概括了各種納米材料在蛋白質(zhì)激酶檢測中的應(yīng)用。其中，研究工作由兩個(gè)實(shí)驗(yàn)體系組成。 本論文的實(shí)驗(yàn)研究內(nèi)容具體如下幾點(diǎn)： 1.構(gòu)建了一種基于Zr4+離子與磷酸化的石墨烯量子點(diǎn)-多肽（GQDs-Peptide）復(fù)合物之間的多重螯合作用高靈敏檢測蛋白質(zhì)激酶CK2活性的光化學(xué)分析方法。在優(yōu)化的條件下，隨著蛋白質(zhì)激酶CK2濃度的增加，GQDs-Peptide復(fù)合物的熒光強(qiáng)度逐漸下降。另外，，這種方法在蛋白質(zhì)激酶抑制劑篩選方面有很大的應(yīng)用潛能。通過在人體血清中檢測存在能夠抑制激酶CK2磷酸化的四種抑制劑（鞣花酸，DRB，大黃素，槲皮素）以及不加四種抑制劑系統(tǒng)的信號(hào)變化，證明了這種基于石墨烯量子點(diǎn)的檢測方法能夠用于實(shí)際生物樣品中蛋白激酶抑制劑的篩選。 2.通過Zr4+離子與磷酸化的金納米粒子-多肽復(fù)合物之間的多重螯合作用，誘導(dǎo)金納米粒子發(fā)生團(tuán)聚，從而定量檢測蛋白激酶PKA的活性。該法不僅可以檢測PKA，通過改變多肽的序列，可以檢測不同多肽對(duì)應(yīng)的蛋白質(zhì)激酶。在優(yōu)化的條件下，隨著蛋白激酶PKA的濃度的增加，金納米粒子-多肽復(fù)合物對(duì)應(yīng)的紫外吸收峰逐漸減小，表明其發(fā)生了團(tuán)聚反應(yīng)。另外，這種方法能夠用于蛋白激酶PKA抑制劑的篩選。本文以PKA典型的抑制劑鞣花酸為例，由于磷酸化的金納米粒子-多肽復(fù)合物在Zr4+離子存在下，發(fā)生團(tuán)聚，引發(fā)金納米粒子的共振光散射峰增強(qiáng)，利用共振光散射峰的增強(qiáng)，分析抑制劑鞣花酸的半抑制濃度。
【關(guān)鍵詞】：石墨烯量子點(diǎn) 多肽 蛋白質(zhì)激酶 抑制劑 金納米粒子 鞣花酸 光致發(fā)光
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R318.08;TB383.1
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-7
• 第1章 緒論7-16
• 1.1 納米材料概述7-8
• 1.1.1 納米材料的概念7
• 1.1.2 納米材料的分類7-8
• 1.1.3 納米材料的特征8
• 1.2 蛋白質(zhì)激酶8-12
• 1.2.1 蛋白質(zhì)激酶簡介8-9
• 1.2.2 蛋白質(zhì)激酶的分類9
• 1.2.3 蛋白質(zhì)激酶活性分析方法9-12
• 1.3 納米材料在蛋白激酶活性檢測中的應(yīng)用12-14
• 1.3.1 金屬納米材料在蛋白激酶檢測中的應(yīng)用12-13
• 1.3.2 量子點(diǎn)在蛋白激酶檢測中的應(yīng)用13-14
• 參考文獻(xiàn)14-16
• 第2章 以石墨烯量子點(diǎn)為發(fā)光探針檢測蛋白激酶 CK2 的活性16-30
• 2.1 前言16-17
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分17-19
• 2.2.1 化學(xué)試劑與材料17
• 2.2.2 儀器設(shè)備17-18
• 2.2.3 氧化石墨烯的制備18
• 2.2.4 石墨烯量子點(diǎn)的制備18
• 2.2.5 多肽-石墨烯量子點(diǎn)復(fù)合物的制備18
• 2.2.6 蛋白激酶 CK2 活性檢測18-19
• 2.2.7 CK2 抑制劑和 IC_(50)的分析19
• 2.3 結(jié)果與討論19-27
• 2.3.1 GQDs 的表征19-20
• 2.3.2 實(shí)驗(yàn)條件優(yōu)化20-21
• 2.3.3 熒光檢測蛋白激酶 CK2 的活性21-24
• 2.3.4 共振光散射檢測蛋白激酶 CK2 的活性24-25
• 2.3.5 對(duì) GQDs 反應(yīng)結(jié)果的表征25
• 2.3.6 人體血清中 CK2 抑制劑檢測和 IC_(50)分析25-27
• 2.4 結(jié)論27
• 參考文獻(xiàn)27-30
• 第3章 基于金-多肽復(fù)合物的團(tuán)聚效應(yīng)檢測蛋白激酶 PKA 的活性30-39
• 3.1 前言30-31
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分31-32
• 3.2.1 化學(xué)試劑與材料31
• 3.2.2 儀器設(shè)備31
• 3.2.3 金納米粒子的合成31
• 3.2.4 金納米粒子-多肽復(fù)合物的制備31-32
• 3.2.5 蛋白激酶 PKA 活性檢測32
• 3.2.6 PKA 抑制劑檢測和 IC_(50)的分析32
• 3.3 結(jié)果與討論32-36
• 3.3.1 對(duì)金納米粒子的表征32-33
• 3.3.2 紫外檢測蛋白激酶 PKA 活性33-34
• 3.3.3 共振光散射檢測蛋白激酶 PKA 的活性34-35
• 3.3.4 對(duì)金納米粒子反應(yīng)結(jié)果的表征35-36
• 3.3.5 蛋白質(zhì)激酶 PKA 抑制劑檢測和 IC_(50)分析36
• 3.4 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-39
• 致謝39-40
• 攻讀碩士期間的研究成果40

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本文編號(hào)：984369