一種雙層人工血管支架的構建及其生物相容性研究
發(fā)布時間:2017-09-23 16:19
本文關鍵詞:一種雙層人工血管支架的構建及其生物相容性研究
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【摘要】:在臨床應用中,雖然小直徑血管(≤6咖)的需求量較大,但是在小直徑(6mm)血管移植中,很多人工合成的組織工程血管支架的中遠期效果并不好,常因其在低血流下缺乏內(nèi)膜功能,形成血栓、動脈瘤、內(nèi)膜增生而以失敗告終。因此,尋找一種可以長期維持其在體內(nèi)正常生理功能的組織工程血管支架的制作方法,成了目前小直徑組織工程血管所需解決的一個重要問題,,而天然脫細胞血管的優(yōu)勢正是在于,除去細胞的細胞外基質(zhì)具有如下特征:①為支架提供生物力學性能,并能夠維持一定的強度和特定形狀;②作為一個可供細胞增殖和遷移的生物活性支架;③可能會對細胞的表型及細胞行為產(chǎn)生調(diào)控;④作為一個錨定位點,為生長因子及各種酶或蛋白,提供特定的反應位點。本課題在實驗室前期制備的RGD-蛛絲蛋白(Recombinant spider silk protein, pNSR32)、聚合物聚己內(nèi)酯(polycaprolactone,PCL)、明膠(Gelatin, Gt)共同制備pNSR32/PCL/Gt小直徑血管支架的基礎上,引入生物相容性良好的天然細胞外基質(zhì),構建的脫細胞血管-(PCL/Gt/pNSR32)雙層血管支架,以去垢劑處理法,蛋白酶處理法,去垢劑-酶聯(lián)合處理法以及反復凍融法為基礎,分別考察其對細胞的去除效果,通過冰凍切片,然后分別用蘇木精-伊紅染色,DAPI染色,DNA殘留率測定等方法檢測其脫細胞效率。結合本室已制備的RGD-蛛絲蛋白/PCL/Gt靜電紡絲支架的基礎上,應用靜電紡絲技術制備pNSR32/PCL/Gt(5:85:10)電紡膜,同時,由含有0.25%戊二醛的10mmol/L的醋酸溶液與制備的脫細胞血管支架交聯(lián),分別交聯(lián)6h、12h、24h(分別命名A、B、C組),構成層次明顯,功能明顯的雙層血管支架材料?紫堵式Y果顯示交聯(lián)制備的各組支架的孔隙率均符合國家標準,大于80%,與交聯(lián)時間呈負相關性。同時支架的接觸角也隨著交聯(lián)時間的增長而增大,說明其親水性逐漸下降。另外,雙層血管支架的縫合強度也隨著交聯(lián)時間的增加而增加,但是支架的斷裂伸長率隨著交聯(lián)時間的增加而降低。最后對血液相容性的考察發(fā)現(xiàn)溶血實驗中A組、B組、C組支架的溶血率分別為1.299%、1.818%、3.247%,均符合國家標準中溶血率小于5%的溶血要求:各實驗組的雙層血管支架的溶血率均低于4%,分別A組、B組、C組為1.299%、1.818%、3.247%,滿足血管組織工程對于支架材料的溶血要求;復鈣化凝血時間A、B兩組更為優(yōu)秀,且組間無統(tǒng)計學差異, A組支架與B組支架對于內(nèi)源性凝血途徑的抗凝性能相似,均優(yōu)于C組支架;動態(tài)凝血時間測定實驗與血小板黏附實驗結果與前兩項實驗一致。綜上可知,A組支架是三個實驗組中抗凝血性能最為優(yōu)良的支架。脫細胞血管支架一(PCL/Gt/RGD-蛛絲蛋白)雙層血管支架的血液相容性隨著戊二醛反應時間的延長而下降?傊,脫細胞血管支架/(PCL/Gt/RGD-蛛絲蛋白)雙層血管支架抗凝血能力優(yōu)異,具有較好的血管組織工程支架應用前景。
【關鍵詞】:雙層血管支架 RGD-蛛絲蛋白 脫細胞 戊二醛 靜電紡絲 生物相容性
【學位授予單位】:福建師范大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2015
【分類號】:R318.11
【目錄】:
- 中文摘要2-4
- Abstract4-6
- 中文文摘6-11
- 緒論11-19
- 第一章 天然脫細胞血管支架的制備19-33
- 第一節(jié) 材料、儀器與試劑19-20
- 第二節(jié) 天然脫細胞血管支架制備方法20-21
- 第三節(jié) 脫細胞血管支架制備的脫細胞效果的評價21-22
- 第四節(jié) 實驗結果22-29
- 第五節(jié) 討論29-30
- 第六節(jié) 結論30-33
- 第二章 脫細胞血管支架-(PCL/Gt/RGD-蛛絲蛋白)雙層血管支架的制備及其理化性能分析33-43
- 第一節(jié) 材料、儀器與試劑33-34
- 第二節(jié) 脫細胞血管支架/(PCL/Gt/RGD-蛛絲蛋白)雙層血管支架的制備34-36
- 第三節(jié) 雙層血管支架的力學性能評價36
- 第四節(jié) 實驗結果36-40
- 第五節(jié) 討論40-42
- 第六節(jié) 結論42-43
- 第三章 雙層血管支架的生物相容性分析43-49
- 第一節(jié) 材料與儀器43
- 第二節(jié) 方法43-44
- 第三節(jié) 實驗結果44-46
- 第四節(jié) 討論46-47
- 第五節(jié) 結論47-49
- 第四章 結論49-50
- 本論文的創(chuàng)新之處50
- 本課題今后研究設想50-51
- 附錄51-53
- 參考文獻53-59
- 攻讀學位期間承擔的科研任務與主要成果59-61
- 致謝61-63
- 個人簡歷63-65
【參考文獻】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前4條
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,本文編號:906238
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