組織工程骨膜的構建及其同種異體體內成骨修復兔肩胛骨缺損的實驗研究
本文關鍵詞:組織工程骨膜的構建及其同種異體體內成骨修復兔肩胛骨缺損的實驗研究
更多相關文章: 骨髓間充質干細胞 豬小腸黏膜下層 組織工程骨膜 肩胛骨缺損 兔
【摘要】:目的:兔骨髓間充質干細胞(BMSCs)作為組織工程種子細胞復合自制豬小腸粘膜下層(SIS)聯(lián)合培養(yǎng),體外構建組織工程化骨膜(TEP),觀察其生物學特性并檢測成骨活性,進一步植入異體兔體內對肩胛骨缺損進行修復,探討人工骨膜修復大塊不規(guī)則骨缺損的可行性。 方法:以豬小腸粘膜下層(SIS)基質作為支架材料,與體外成骨誘導培養(yǎng)后的第三代兔骨髓間充質干細胞(BMSCs),采用沉淀法復合構建組織工程化骨膜,MTT法和掃描電鏡檢測種子細胞在支架材料的生長、黏附情況,體外檢測堿性磷酸酶與骨鈣素表達,并取6月齡新西蘭大白兔24只制備單側肩胛骨3cm×3cm次全切骨缺損模型,隨機分為實驗組和對照組(n=12),分別于缺損處植入組織工程骨膜和單純SIS。術后觀察動物大體情況;4、8、12周時處死動物后行X線片觀察并按Lane-Sandhu X線片評分標準評分;行標本大體觀察后,行HE及Masson染色觀察。 結果:種子細胞在SIS上生長良好,組織工程骨膜在含有成骨誘導劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)可分泌一定量骨鈣素(11d達峰值),并表達堿性磷酸酶活性(7d達峰值),植入體內后各時間段,X線片觀察示實驗組骨缺損區(qū)有片狀新生骨形成,密度與正常骨相同,隨著時間的增加,新生骨數(shù)量也不斷增多;對照組骨缺損區(qū)無骨形成征象,骨缺損區(qū)密度與周圍軟組織影相近。至12周標本大體觀察示實驗組兩端橋接部已形成骨性愈合,部分骨缺損區(qū)已被新生骨填充;對照組無骨組織生成。HE及Masson染色示實驗組骨缺損處有新骨生成,骨組織中可見血管腔及髓腔樣結構,未見明顯巨噬細胞及淋巴細胞浸潤;對照組骨缺損區(qū)僅為膠原瘢痕組織和纖維樣結構,無骨組織生成。 結論:組織工程化骨膜能夠在體外保持較穩(wěn)定的生物活性,分泌一定量的堿性磷酸酶和骨鈣素,植入實驗動物體內后在同種異體體內可以成骨,具有修復大塊不規(guī)則骨缺損的可行性。
【關鍵詞】:骨髓間充質干細胞 豬小腸黏膜下層 組織工程骨膜 肩胛骨缺損 兔
【學位授予單位】:蘭州大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2014
【分類號】:R318.08;R681
【目錄】:
- 中文摘要4-5
- Abstract5-7
- 目錄7-8
- 前言8-11
- 第一章 組織工程化骨膜的構建11-20
- 1. 材料和方法11-14
- 2. 結果14-18
- 3. 討論18-19
- 4. 結論19-20
- 第二章 組織工程化骨膜體外成骨活性檢測20-28
- 1. 材料和方法20-23
- 2. 結果23-26
- 3. 討論26-27
- 4. 結論27-28
- 第三章 組織工程骨膜修復肩胛骨骨缺損的實驗研究28-39
- 1. 材料與方法28-31
- 2. 結果31-36
- 3. 討論36-38
- 4. 結論38-39
- 參考文獻39-43
- 在學期間的研究成果43-44
- 致謝44
【參考文獻】
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,本文編號:785550
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