本文關(guān)鍵詞：Sonic hedgehog信號調(diào)控BMP9誘導的間充質(zhì)干細胞成骨分化

  更多相關(guān)文章： Sonic hedgehog信號 骨形態(tài)發(fā)生蛋白9 間充質(zhì)干細胞 成骨分化

【摘要】：目的：分析Sonic hedgehog (Shh)信號對骨形態(tài)發(fā)生蛋白9 (Bone Morphogenetic Proteins 9, BMP9)調(diào)控的間充質(zhì)干細胞(Mesenchymal Stem Cells, MSCs)骨向分化的影響,并探究這種作用的調(diào)控機制。方法：BMP9處理MSCs,1、3、5d后,RT-PCR和Western Blot檢測Hedgehog (Hh)信號相關(guān)分子的表達。緊接著,用cyclopamine(Hh信號抑制劑)和purmorphamine(Hh信號激活劑)分別作用于BMP9處理的MSCs,化學發(fā)光檢測早期成骨標志物堿性磷酸酶(ALP)活性,茜素紅S染色檢測晚期的鈣鹽沉積。包裝腺病毒Ad-Shh(過表達Shh)和Ad-siShh(干擾Shh),RT-PCR和Western Blot分析病毒效果。隨后分別檢測Ad-Shh和Ad-siShh對BMP9調(diào)控的MSCs骨向分化的作用：化學發(fā)光和細胞化學染色檢測ALP變化；茜素紅S染色檢測鈣鹽沉積；RT-PCR和Western Blot檢測晚期成骨標志物骨橋蛋白(Osteopontin, OPN)和骨鈣素(Osteocalcin, OCN)以及BMP9下游成骨相關(guān)基因Dlx5、Runx2、Id1、Id2、Id3、CTGF和Coll的表達；Micro-CT以及組織細胞染色(HE、Masson三色和阿辛藍)觀察Ad-Shh對BMP9引起的裸鼠皮下異位成骨的影響。熒光素酶報告基因?qū)嶒灆z測Ad-Shh對BMP9誘導的Smad1/5/8轉(zhuǎn)錄調(diào)控活性的影響；Western Blot檢測Ad-Shh對BMP9誘導的Smad1/5/8、MAPK磷酸化以及總的Smad1/5/8和磷酸化Smad1/5/8核內(nèi)聚集的影響。結(jié)果：BMP9可影響Hh信號相關(guān)基因的表達；抑制或激活Hh信號可減弱或增強BMP9所導致的MSCs向成骨細胞分化。Ad-Shh增強了BMP9誘導的體外骨向分化過程,促進了BMP9誘導的體內(nèi)成骨包塊形成;相反,Ad-siShh減弱了BMP9誘導的體外骨向分化過程。Ad-Shh增強了BMP9誘導的Smad1/5/8的轉(zhuǎn)錄調(diào)控活性,并促進了磷酸化Smad1/5/8的核內(nèi)堆積。結(jié)論：Shh信號可調(diào)控BMP9誘導的MSCs成骨分化。
【關(guān)鍵詞】：Sonic hedgehog信號 骨形態(tài)發(fā)生蛋白9 間充質(zhì)干細胞 成骨分化
【學位授予單位】：重慶醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R318.08
【目錄】：

• 英漢縮略語名詞對照5-8
• 中文摘要8-10
• 英文摘要10-13
• 前言13-16
• 技術(shù)路線15-16
• 1 材料和方法16-25
• 2 結(jié)果25-41
• 3 討論41-45
• 全文總結(jié)45-46
• 參考文獻46-51
• 文獻綜述51-59
• 參考文獻55-59
• 致謝59-60
• 攻讀碩士期間發(fā)表的學術(shù)論文60

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王煒;李華;朱耀明;王雄偉;;Sonic Hedgehog信號通路及其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤中的研究進展[J];中國民康醫(yī)學;2011年19期

2 劉學強;郭平凡;陳海香;張金池;;局部注射sonic hedgehog蛋白改善老齡大鼠后肢缺血性病變[J];福建醫(yī)科大學學報;2013年03期

3 靳曙光,趙玉元;Sonic hedgehog基因與腸道畸形的研究進展[J];中華小兒外科雜志;2005年08期

4 張艷;徐選福;郭傳勇;;Sonic Hedgehog基因及其在發(fā)育過程中的調(diào)控作用[J];現(xiàn)代生物醫(yī)學進展;2014年02期

5 謝晶日;張亮;李明;劉小蓮;;Sonic hedgehog通路與肝細胞癌的研究進展[J];臨床腫瘤學雜志;2011年05期

6 王東;李紅星;李笑巖;白咸勇;李雅娜;;Sonic hedgehog在二乙基亞硝胺誘發(fā)大鼠肝癌發(fā)生過程中的表達及意義[J];生命科學研究;2011年04期

7 杜娟,劉淑紅,范文紅,沈巖,范志朋,范明,王松靈;Sonic hedgehog在小鼠胚胎頜面部的表達[J];北京口腔醫(yī)學;2005年01期

8 唐維兵;徐小群;耿其明;張杰;陳煥;陳榮華;;乙烯硫脲致畸胎鼠直腸末端Sonic hedgehog基因的表達[J];實用兒科臨床雜志;2009年11期

9 杜娟;范志朋;馬鑫;劉淑紅;吳燕;范明;王松靈;;Sonic hedgehog在小鼠胚胎下頜突Meckel's軟骨發(fā)育過程中的表達[J];口腔生物醫(yī)學;2011年01期

10 周彥秋,林久祥,張波;sonic hedgehog及patched基因在角化囊腫中的表達[J];北京大學學報(醫(yī)學版);2002年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 唐蘭芳;杜立中;;新生大鼠高氧肺損傷sonic hedgehog表達升高[A];2007年浙江省兒科學、小兒外科學學術(shù)年會論文匯編[C];2007年

2 周家喜;賈莉瑋;劉為敏;劉爽;曹宇靜;段恩奎;;Sonic hedgehog維持人胎兒表皮中干細胞增殖的潛在作用[A];第十屆全國生殖生物學學術(shù)研討會論文摘要集[C];2005年

3 唐蘭芳;杜立中;;新生大鼠高氧肺損傷sonic hedgehog表達升高[A];2006（第三屆）江浙滬兒科學術(shù)會議暨浙江省兒科學術(shù)年會論文匯編[C];2006年

4 柴宗濤;王文權(quán);孔令群;王龍蓉;朱小東;孫惠川;;Sonic hedgehog在肝細胞癌中的表達及其預后價值[A];第九屆全國腫瘤轉(zhuǎn)移學術(shù)大會暨2011年黑龍江省醫(yī)學會腫瘤學年會摘要集[C];2011年

5 賈萬健;李炯明;丁建東;劉建和;陳戩;姜永明;張勁松;王光;張海燕;;Sonic Hedgehog信號通路在前列腺癌中作用的研究[A];第十五屆全國泌尿外科學術(shù)會議論文集[C];2008年

中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前3條

1 林媛;Sonic hedgehog在牙胚發(fā)育中的作用[D];第四軍醫(yī)大學;2004年

2 夏遠鵬;Sonic hedgehog(Shh)對大鼠永久性腦缺血的潛在治療作用及機制研究[D];華中科技大學;2012年

3 夏遠鵬;Sonic hedgehog （Shh）對大鼠永久性腦缺血的潛在治療作用及機制研究[D];華中科技大學;2012年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 李晗;雞胚發(fā)育過程中Sonic Hedgehog超表達對脊髓聯(lián)合神經(jīng)元軸突投射及相關(guān)蛋白表達影響[D];新鄉(xiāng)醫(yī)學院;2015年

2 李麗;Sonic hedgehog信號調(diào)控BMP9誘導的間充質(zhì)干細胞成骨分化[D];重慶醫(yī)科大學;2015年

3 肖青;氧化應激對乳鼠心肌細胞Sonic hedgehog表達的影響以及小鼠急性心肌梗塞模型的制備[D];廣州醫(yī)學院;2009年

4 盧光;牦牛胚胎裙毛毛囊形態(tài)發(fā)生及其β-catenin和Sonic hedgehog的表達規(guī)律[D];西北農(nóng)林科技大學;2010年

5 張治軍;Sonic Hedgehog在胃癌中的表達[D];山西醫(yī)科大學;2007年

6 丁建東;Sonic Hedgehog信號通路在前列腺癌中作用的研究[D];昆明醫(yī)學院;2008年

，

本文編號：784787