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基于人源誘導(dǎo)多能干細(xì)胞構(gòu)建三維神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的研究

發(fā)布時(shí)間:2024-04-25 01:23
  干細(xì)胞是近年來(lái)利用外源性轉(zhuǎn)錄因子將已分化成熟的細(xì)胞進(jìn)行重編程得到誘導(dǎo)多能干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells,iPSCs),而這類干細(xì)胞具有與胚胎干細(xì)胞相似的功能和特征,利用誘導(dǎo)多能干細(xì)胞構(gòu)建三維神經(jīng)網(wǎng)絡(luò),對(duì)研究中樞神經(jīng)系統(tǒng)和神經(jīng)疾病具有十分重要的意義。利用帶有疾病基因的成熟體細(xì)胞,將其重編程為多能干細(xì)胞,由這種細(xì)胞分化而來(lái)的神經(jīng)細(xì)胞具有疾病的原特質(zhì),這種疾病特異性iPSCs為研究疾病的機(jī)制和發(fā)病過(guò)程提供了樣本,也為藥物開(kāi)發(fā)、治療方案的制定提供了動(dòng)力;谌S支架和人源誘導(dǎo)多能干細(xì)胞,本論文構(gòu)建了3D神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),完成了人源誘導(dǎo)干細(xì)胞定向分化為運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元及神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的構(gòu)建,主要開(kāi)展的工作及得到的結(jié)論如下:1.通過(guò)加入誘導(dǎo)因子,將hiPSCs定向分化為神經(jīng)細(xì)胞(hiPSCs-NC),通過(guò)倒置顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn)分化后的細(xì)胞呈現(xiàn)神經(jīng)細(xì)胞生理形態(tài),免疫熒光染色和逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)結(jié)果顯示hiPSCs-NC能表達(dá)其特異性蛋白和特征基因。2.通過(guò)加入誘導(dǎo)因子,將hiPSCs定向分化為運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元,通過(guò)免疫熒光染色和流式細(xì)胞術(shù)分別對(duì)分化后的細(xì)胞進(jìn)行鑒定,證明通過(guò)現(xiàn)階段探索...

【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1三維構(gòu)建疾病模型

圖1.1三維構(gòu)建疾病模型

其已在生命科學(xué)/醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域表現(xiàn)出了驚人的價(jià)值和前景[13-15],它首先利用光刻技術(shù)在硅片上制作出實(shí)驗(yàn)所需的結(jié)構(gòu),接著利用聚二甲基硅氧烷(PDMS)將結(jié)構(gòu)復(fù)制出來(lái),然后利用plasma將聚二甲基硅氧烷和玻璃片進(jìn)行表面修飾,使其表面帶上羥基,最后將修飾好的PDMS和玻璃片貼....


圖1.2靜電紡絲的原理

圖1.2靜電紡絲的原理

圖1.2靜電紡絲的原理靜電紡絲在組織工程中的應(yīng)用電紡絲可以制備直徑在微米甚至納米級(jí)別的纖維,可以在一定程的仿生。眾所周知,纖維和蛋白在生物體這個(gè)系統(tǒng)中是必不可少皮中,一旦出現(xiàn)傷口時(shí),成纖維細(xì)胞產(chǎn)生大量的膠質(zhì)纖維等物質(zhì)合做出了重大貢獻(xiàn),可是說(shuō)是結(jié)締組織中重要的一部分[28];而膠....


圖1.3神經(jīng)元細(xì)胞結(jié)構(gòu)

圖1.3神經(jīng)元細(xì)胞結(jié)構(gòu)

其結(jié)構(gòu)可分為細(xì)胞體和突觸兩個(gè)部分(如圖1.3),突觸包括樹(shù)突和軸突[85]。神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞在中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中大量存在;單從細(xì)胞的數(shù)量來(lái)看,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的數(shù)量是遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于神經(jīng)元細(xì)胞的。星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞、小膠質(zhì)細(xì)胞等[86-89]都屬于神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的一種。在傳統(tǒng)的認(rèn)知中,大....


圖2.1iPSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化時(shí)間表

圖2.1iPSCs向神經(jīng)細(xì)胞分化時(shí)間表

江漢大學(xué)碩士研究生論文第23頁(yè)4)在分化的第7天,以神經(jīng)細(xì)胞分化培養(yǎng)基I(KSRmedium):神經(jīng)細(xì)胞分化培養(yǎng)基II(N2medium)為1:3的比例配制培養(yǎng)基,對(duì)細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。5)在分化的第8天,加入神經(jīng)細(xì)胞分化培養(yǎng)基II(N2medium),對(duì)細(xì)....



本文編號(hào):3963790

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