免疫反應(yīng)大小是決定可植入生物材料能否開(kāi)展臨床應(yīng)用的關(guān)鍵因素之一。研究評(píng)估了輻照和環(huán)氧乙烷(EO)兩種滅菌方式處理后的小腸黏膜下層(SIS)脫細(xì)胞外基質(zhì)材料在體內(nèi)的免疫反應(yīng),旨在為其臨床試驗(yàn)的開(kāi)展提供可行依據(jù)。將兩種滅菌方式處理的SIS脫細(xì)胞外基質(zhì)材料皮下植入到BALB/c小鼠,第14和28天取樣后,系統(tǒng)性地評(píng)估了其免疫反應(yīng)。與僅手術(shù)不植入材料的陰性對(duì)照組相比,免疫器官(脾和淋巴結(jié))的形態(tài)、質(zhì)量、細(xì)胞數(shù)、淋巴細(xì)胞的體外增殖及酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)結(jié)果均無(wú)顯著性差異,證明兩種滅菌方式處理后的SIS脫細(xì)胞外基質(zhì)材料都不會(huì)對(duì)小鼠引起明顯的免疫排斥反應(yīng)。流式細(xì)胞術(shù)分析及局部H&E染色結(jié)果表明,經(jīng)EO滅菌處理的SIS脫細(xì)胞外基質(zhì)材料對(duì)小鼠的免疫刺激更小,是更適用于此材料的滅菌方法。研究結(jié)果為SIS脫細(xì)胞外基質(zhì)材料的滅菌程序及其臨床應(yīng)用提供了支持。

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圖1不同取樣點(diǎn)代表性脾和淋巴結(jié)形態(tài)

T細(xì)胞和B細(xì)胞分別約占正常脾淋巴細(xì)胞的40%和60%,CD4+T細(xì)胞與CD8+T細(xì)胞的比值約為2∶1。因此,通過(guò)分析脾淋巴細(xì)胞的表型變化(CD4/CD8),也能在一定程度上反映機(jī)體的免疫功能狀態(tài)。本實(shí)驗(yàn)分析了脾淋巴細(xì)胞的表型,每組實(shí)驗(yàn)至少重復(fù)3次,規(guī)律類似,各組脾淋巴細(xì)胞中CD4....

圖2不同取樣點(diǎn)的免疫器官質(zhì)量及其細(xì)胞數(shù)(*p<0.05,**p<0.01)

圖1不同取樣點(diǎn)代表性脾和淋巴結(jié)形態(tài)圖3不同取樣點(diǎn)的脾淋巴細(xì)胞的流式細(xì)胞圖

圖3不同取樣點(diǎn)的脾淋巴細(xì)胞的流式細(xì)胞圖

圖2不同取樣點(diǎn)的免疫器官質(zhì)量及其細(xì)胞數(shù)(*p<0.05,**p<0.01)2.3淋巴細(xì)胞增殖

圖4淋巴細(xì)胞體外增殖情況(*p<0.05)

CCK-8是基于WST-8法檢測(cè)細(xì)胞的活性和增殖。在電子耦合試劑存在的情況下,WST-8可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成水溶性的橙黃色甲臜產(chǎn)物,其顏色的深淺與活細(xì)胞的數(shù)量成正比,通過(guò)測(cè)定吸光度,可以間接檢測(cè)出活細(xì)胞的數(shù)量,繼而反映細(xì)胞的活化情況。淋巴細(xì)胞的增殖情況如圖4所示。在手術(shù)....

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