目的:低強度脈沖超聲波(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)因為其無創(chuàng)性,較安全,效果佳,操作簡單以及較短的治療周期,是研究領域公認的可促進骨愈合的物理治療措施。LIPUS是一種強度介于30-100mW/cm2的脈沖式超聲波,它能將聲波轉(zhuǎn)化為力學信號,并以低強度壓力波的形式傳遞到組織中,上調(diào)細胞功能和增強組織再生。LIPUS還可以促進局部缺損部位的血液循環(huán)和血管的形成及缺損部位鈣鹽沉積和骨組織的改建。LIPUS已經(jīng)在國內(nèi)外臨床上用于骨折、骨愈合不良和骨不連的治療。近年來,國內(nèi)外學者以及本課題組研究的主要目的是將LIPUS與骨支架材料結合應用于大面積骨缺損修復,為超臨界骨缺損的修復治療提供一種新的手段,而關于在“三維鈦合金支架材料+LIPUS”修復骨缺損機制的研究中,首選的細胞模型尚未明確。因此在本研究中,比較LIPUS對多孔Ti6A14V材料(titanium-6aluminum-4vanadi um,Ti6A14V)內(nèi)成骨誘導后骨髓間充質(zhì)干細胞(osteogenic medium cultured bone marrow mesenchymal...

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1體外細胞實驗多孔Ti6Al4V材料，500μm：×35用丙酮，75％的酒精和雙蒸水清洗樣品材料3次，超聲震蕩處理15min，然后

中國醫(yī)科大學碩士學位論文32材料與方法2.1材料與試劑2.1.1實驗材料的制備及規(guī)格Ti6Al4V支架材料：該材料是直徑15mm，高度2mm的圓柱體，孔徑為400-500μm，孔隙率為65％70％。它由中國科學院金屬研究所提供，見圖1，制備過程概述如下：使用均一粒徑約50μm的醫(yī)....

圖2體外細胞實驗超聲加載裝置圖[19]

中國醫(yī)科大學碩士學位論文7圖2體外細胞實驗超聲加載裝置圖[19]2.2.8MTT法檢測細胞增殖活性將4組共培養(yǎng)模型（同1.2.6）于1d，3d，5d，7d，棄去培養(yǎng)基，PBS漂洗，每孔加入5mg/mlMTT200μl和新鮮培養(yǎng)基800μl，在培養(yǎng)箱中孵育4h，吸出孔內(nèi)孵育液，每孔....

圖3不同時間點原代BMSCs形態(tài)觀察（×100）

中國醫(yī)科大學碩士學位論文3結果3.1小鼠BMSCs培養(yǎng)小鼠BMSCs接種3d后，鏡下可見細胞貼壁良好、集落式生長，呈長梭形或多角形，見圖2A。6d后，大部分細胞貼壁延伸，形狀逐漸變?yōu)殚L梭形，見圖2B。8d后細胞間廣泛接觸，見圖2C。10d后細胞密度可達80%左右，細胞結構清晰，放....

圖4BMSCs成骨誘導不同時間染色結果

中國醫(yī)科大學碩士學位論文伸出偽足與細胞相連。當細胞密度逐漸增大，細胞開始重疊生長，細胞結構不再明顯，鈣離子在細胞表面以鈣鹽方式沉淀下來，即“鈣結節(jié)”。成骨誘導7d，14d時采用氮藍四唑/四唑硝基藍（NBT/BCIP）染色法進行ALP染色，細胞內(nèi)分泌的ALP顆粒被染成藍色，見圖4A....

本文編號：3929510