作為一種結構簡單的納米材料,納米二氧化硅具有易于合成和進行表面修飾的特點,不僅被廣泛地用于工業(yè)領域,還被用于診斷、造影和載藥等生物醫(yī)藥領域。研究顯示,納米二氧化硅可以誘導一些正常細胞凋亡,從而表現(xiàn)出一定程度的細胞毒性。但是,到目前為止,有關納米二氧化硅抗腫瘤活性研究還較少。 為了研究納米二氧化硅(SNP)的抗腫瘤活性,本文選用了粒徑為7 nm、20 nm和50nm的三種SNP顆粒,以人正常肝細胞L-02作為對照,考察SNP對人肝癌細胞HepG2的細胞毒性。研究結果表明,SNP的抗腫瘤活性與其粒徑有直接聯(lián)系,具有濃度效應和時間效應,20nm的粒子對肝癌細胞活性的抑制作用最強,7nm的次之,50nm的最弱。當20nm的SNP濃度為160μg/ml時,可使HepG2的細胞活性在72h后降為18.5%。但是,SNP對L-02細胞活性的影響較小,只有當20nm和7nm的兩種粒子濃度分別達到320和640μg/ml時,細胞活性才分別下降到81%和73%。與L-02細胞相比,20nm的SNP更容易進入HepG2細胞并分布于細胞核內,引起細胞凋亡。隨著納米二氧化硅作用濃度的上升,caspase-3的活...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第1章 文獻綜述
    1.1 概述
    1.2 納米材料及其應用簡介
        1.2.1 納米材料簡介
        1.2.2 納米材料的應用簡介
    1.3 納米顆粒的生物安全性及細胞毒性研究
        1.3.1 納米顆粒的生物安全性研究
        1.3.2 納米顆粒的細胞毒性研究
    1.4 納米顆�？鼓[瘤活性的研究
    1.5 納米二氧化硅及其在生物醫(yī)藥領域的應用
        1.5.1 納米二氧化硅簡介
        1.5.2 納米二氧化硅在生物醫(yī)藥領域的應用研究
    1.6 本論文的研究目的、內容和意義
第2章 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞株
        2.1.2 納米二氧化硅
        2.1.3 生化試劑
    2.2 儀器與設備
    2.3 常用試劑及配制
    2.4 常用方法
        2.4.1 實驗相關器材滅菌
        2.4.2 細胞培養(yǎng)方法
        2.4.3 細胞計數(shù)方法
        2.4.4 細胞總蛋白提取
        2.4.5 Bradford比色法測定蛋白含量
        2.4.6 蛋白電泳及Western Blotting
第3章 納米二氧化硅特異性抗肝癌細胞HepG2活性研究
    3.1 概述
    3.2 實驗材料與方法
        3.2.1 實驗材料
        3.2.2 材料外貌表征TEM
        3.2.3 材料的FITC熒光標記及在細胞內分布
        3.2.4 細胞活性MTT實驗
        3.2.5 細胞核染色(DAPI)
        3.2.6 Annexin Ⅴ-FITC/PI雙染色流式細胞儀測試
        3.2.7 細胞內Caspase-3表達量測定
        3.2.8 檢測Bax、Bcl-2、p53、procaspase-9蛋白表達量變化的Western blotting實驗
        3.2.9 細胞內ROS含量測定——DCFH-DA熒光探針
        3.2.10 細胞內GSH含量測定
        3.2.11 統(tǒng)計學方法
    3.3 實驗結果
        3.3.1 納米二氧化硅的外貌表征
        3.3.2 納米二氧化硅的細胞毒性
        3.3.3 納米二氧化硅對細胞核形態(tài)的影響以及在細胞內分布情況
        3.3.4 納米二氧化硅誘導HepG2細胞調亡
        3.3.5 納米二氧化硅對凋亡相關蛋白的影響
        3.3.6 納米二氧化硅對細胞內ROS以及GSH含量的影響
    3.4 討論
第4章 納米二氧化硅的表面電位對其抗HepG2細胞活性的影響
    4.1 概述
        4.1.1 表面改性簡介
        4.1.2 表面改性方法
        4.1.3 納米材料表面改性的研究現(xiàn)狀
        4.1.4 研究內容、目的及意義
    4.2 材料與方法
        4.2.1 材料
        4.2.2 納米二氧化硅的表面改性
        4.2.3 材料外貌表征TEM
        4.2.4 Zeta電位檢測實驗
        4.2.5 細胞毒性MTT實驗
        4.2.6 Annexin Ⅴ-FITC/PI雙染色流式細胞儀測試
        4.2.7 統(tǒng)計學方法
    4.3 結果
        4.3.1 改性前后的納米二氧化硅的Zeta電位表征
        4.3.2 改性前后納米二氧化硅的TEM表征
        4.3.3 細胞毒性MTT實驗結果
        4.3.4 Annexin Ⅴ-FITC/PI雙染色流式細胞儀測試
    4.4 討論
第5章 結論與展望
    5.1 結論
    5.2 展望
參考文獻
致謝
攻讀碩士研究生期間發(fā)表論文



本文編號：3868388