研究背景:膝關(guān)節(jié)軟骨病變是影響幾乎所有年齡段的人的疾病,嚴重影響著全人類生活質(zhì)量。導致骨軟骨損傷的病因很多,例如創(chuàng)傷、疾病或老化等。在解剖結(jié)構(gòu)上,關(guān)節(jié)軟骨和硬骨兩者緊密相連,生物學功能上也相互影響。骨軟骨界面是介于透明軟骨與軟骨下骨之間的連接面。天然的連接面是由軟骨鈣化區(qū)構(gòu)成,其結(jié)構(gòu)薄而致密,起著隔離軟骨層和軟骨下骨層的作用,同時又將二者有機地整合在一起。骨軟骨缺損同時累及軟骨層和軟骨下骨層時,兩者不同的力學性能和組織結(jié)構(gòu)凸顯了鈣化界面的重要性,在維護軟骨和軟骨下骨的正常功能上,骨軟骨界面的存在是必需的。因此,理想的復合骨軟骨支架應模擬正常骨軟骨組織結(jié)構(gòu),所以在制備復合支架時應當構(gòu)建出鈣化層的結(jié)構(gòu),進而更好地促進骨軟骨組織缺損的修復。骨軟骨一體化支架再生將成為科研和臨床的熱點議題。因此,本研究主要包括以下內(nèi)容:1軟骨層支架工藝構(gòu)建,篩選出適合軟骨細胞表型與功能的水凝膠支架;2開發(fā)具有鈣化層的一體化支架;3體外評估一體化支架的特征及鈣化界面層的屏蔽作用。方法:在本研究中,我們選取具有良好的生物相容性的海藻酸鈉和殼聚糖水凝膠用于構(gòu)建具有鈣化層的一體化復合支架。首先進行軟骨支架工藝的優(yōu)化,篩...

【文章頁數(shù)】：46 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 儀器與試劑
    1.1 主要實驗儀器
    1.2 主要實驗試劑
2 實驗方法
    2.1 軟骨細胞提取與培養(yǎng)
    2.2 細胞活性檢測
    2.3 細胞形態(tài)學表征
    2.4 細胞死活染色
    2.5 細胞骨架染色
    2.6 逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈反應
    2.7 糖胺聚糖含量測定
    2.8 膠原蛋白II含量測定
    2.9 細胞共培養(yǎng)的染色方法
    2.10 Transwell進行細胞共培養(yǎng)
    2.11 水凝膠支架制備方法
    2.12 水凝膠支架力學檢測
    2.13 SEM表征水凝膠支架
    2.14 microCT表征水凝膠支架
    2.15 CLSM表征水凝膠支架
    2.16 統(tǒng)計學方法
3 實驗結(jié)果
    3.1 軟骨細胞的提取與表征
    3.2 G含量對水凝膠支架力學性能的影響
    3.3 水凝膠支架G含量對軟骨細胞形態(tài)和功能的影響
        3.3.1 軟骨細胞在水凝膠支架上的粘附行為
        3.3.2 軟骨細胞在水凝膠支架上的骨架形態(tài)
        3.3.3 軟骨細胞在水凝膠支架上的增殖能力
        3.3.4 軟骨細胞在水凝膠支架上的功能表達
    3.4 成骨細胞、血管內(nèi)皮細胞對軟骨細胞功能的影響
    3.5 軟骨下骨-軟骨一體化水凝膠支架的制備與表征
        3.5.1 一體化水凝膠支架的制備和形態(tài)學表征
        3.5.2 一體化水凝膠支架中鈣化界面層的表征
        3.5.3 鈣化界面層的隔離效應
4 討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀碩士學位期間發(fā)表學術(shù)論文情況
致謝



本文編號：3760616