目的 建立酸溶性I型膠原蛋白含量測定的體積排阻高效液相色譜法（size-exclusion high-performance liquid chromatography,SE-HPLC）并進(jìn)行方法確認(rèn)，為快速、準(zhǔn)確測定酸溶性I型膠原蛋白含量提供技術(shù)參考。方法 通過優(yōu)化流動相組成、流速及柱溫等因素來改善峰形，提高柱效，確定最佳檢測條件，采用含DAD檢測器的Agilent 1260高效液相色譜儀進(jìn)行檢測，檢測波長為210 nm，外標(biāo)法定量并進(jìn)行方法學(xué)研究。結(jié)果 選擇300 mmol/L磷酸鈉-150 mmol/L氯化鈉（pH=6.0）為流動相，設(shè)定流速為0.4 mL/min，柱溫為20℃時，酸溶性I型膠原蛋白在體積排阻色譜柱Agilent Bio SEC-5（300?，4.6 mm×300 mm,5μm）（1?=0.1 nm）上的分離能獲得最佳柱效。方法學(xué)研究結(jié)果表明，酸溶性I型膠原蛋白在1.5～120.0μg/mL范圍內(nèi)，與峰面積呈良好的線性關(guān)系（r=0.999 9），定量限為0.6μg/mL。用建立的方法連續(xù)進(jìn)樣6次，檢測供試品溶液的I型膠原蛋白含量，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（relative s... 

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【文章目錄】：
0 引言
1 材料與方法
    1.1 儀器和設(shè)備
    1.2 試劑與材料
    1.3 溶液的制備
        1.3.1 對照品溶液
        1.3.2 供試品溶液
    1.4 色譜條件
    1.5 檢測方法
2 結(jié)果與分析
    2.1 檢測波長的確定
    2.2 實(shí)驗(yàn)條件的優(yōu)化
        2.2.1 流動相組成優(yōu)化
        2.2.2 流速的優(yōu)化
        2.2.3 柱溫的優(yōu)化
    2.3 系統(tǒng)適用性
    2.4 線性范圍
    2.5 定量限
    2.6 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)
    2.7 回收率實(shí)驗(yàn)
    2.8 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)
    2.9 樣品測定
3 討論與結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3680387