豬脂肪源基質(zhì)水凝膠促進游離移植脂肪存活的實驗研究
發(fā)布時間:2022-08-23 18:33
研究背景:外傷、手術(shù)、先天發(fā)育異常等均可導致軟組織缺損或缺失。游離脂肪移植因填充物(脂肪)來源廣泛,兼具填充與形態(tài)塑造的效果,是軟組織缺損填充修復最常用的技術(shù)之一[1-3]。然而,游離脂肪移植過程中成熟脂肪細胞的物理損傷或組織/血管再生不足可導致部分脂肪細胞無法存活[4,5],相關(guān)文獻報道游離脂肪移植體積保留率在10%-85%之間[6-9]。移植物體積保留率是決定游離脂肪填充術(shù)手術(shù)效果最重要的因素之一,促進游離移植脂肪存活進而提高體積保留率是目前游離脂肪移植亟需解決的問題[10]。近年來,已有研究嘗試使用生物材料提供和改善細胞存活和誘導原位脂肪再生的局部微環(huán)境[11-14]。水凝膠類生物材料富含水,可促進更好的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)交換[15]。以水凝膠作為細胞/組織載體,可通過減少組織損傷提高移植組織存活率。部分研究證實,與常規(guī)的組織/細胞移植相比,基于水凝膠生物材料(例如膠原蛋白和透明質(zhì)酸)的組織/細胞移植具有更好的組織存活率[15-18]
【文章頁數(shù)】:109 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略表
摘要
ABSTRACT
第一部分:HAPA促進游離移植脂肪存活的體外實驗研究
前言
主要材料和儀器
1.組織來源
2.主要試劑和儀器
實驗方法
1.ADSCs原代培養(yǎng)
2.豬脂肪組織無細胞基質(zhì)水凝膠的制備
3.人源性脂肪顆粒的制備
4.常氧及低氧條件下,HAPA對 ADSCs增殖的影響
5.常氧及低氧條件下,HAPA對 ADSCs成脂分化的影響
6.常氧及低氧條件下,HAPA對 ADSCs的 VEGF分泌的影響
7.體外常氧及低氧條件下,HAPA對游離脂肪存活及凋亡的影響
結(jié)果
1.HAPA促進低氧條件下ADSCs增殖
2.低氧條件下HAPA仍具有對ADSCs成脂誘導特性
3.HAPA促進低氧條件下VEGF的分泌
4.低氧條件下游離脂肪組織及HAPA/脂肪復合物中細胞的存活及凋亡情況
5.體外常氧、低氧條件下HAPA對游離脂肪中細胞的HIF-1α基因表達水平的調(diào)控
6.體外常氧、低氧條件下HAPA對游離脂肪中細胞的HIF-1α蛋白表達影響。
討論
結(jié)論
參考文獻
第二部分:HAPA及 ADSCS促進游離移植脂肪存活的動物實驗研究
前言
主要材料和儀器
1.組織來源與實驗動物
2.主要材料和儀器
實驗方法
1.動物模型制作
2.實驗分組及實驗流程圖示意圖
3.實驗步驟
4.動物處死及取材
5.術(shù)后超聲、大體觀測及移植物體積保留率比較
6.移植脂肪組織組織學評價
7.統(tǒng)計學方法
結(jié)果
1.大體觀察及體積測量結(jié)果
2.超聲及大體觀察結(jié)果
3.HE染色結(jié)果分析
4.圍脂肪蛋白(Perilipin A)染色結(jié)果
5.CD31免疫組化染色結(jié)果
6.Ki67及TUNEL染色結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
第三部分:HAPA輔助脂肪移植的HAPA/脂肪體積比優(yōu)化的體內(nèi)研究
前言
主要材料和儀器
1.組織來源與實驗動物
2.主要材料和儀器
實驗方法
1.移植材料準備與動物模型制作
2.實驗步驟及方法
3.術(shù)后超聲、大體觀測及移植物體積保留率比較
4.移植物組織學染色及分析結(jié)果
5.統(tǒng)計學方法
結(jié)果
1.大體觀察及體積測量結(jié)果
2.超聲觀察結(jié)果
3.HE染色結(jié)果分析
4.CD31免疫組化染色結(jié)果
5.圍脂肪蛋白染色(Perilipin A)結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
課題綜述水凝膠材料在脂肪組織工程的應(yīng)用
參考文獻
在讀間科研成果簡介
致謝
本文編號:3678271
【文章頁數(shù)】:109 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略表
摘要
ABSTRACT
第一部分:HAPA促進游離移植脂肪存活的體外實驗研究
前言
主要材料和儀器
1.組織來源
2.主要試劑和儀器
實驗方法
1.ADSCs原代培養(yǎng)
2.豬脂肪組織無細胞基質(zhì)水凝膠的制備
3.人源性脂肪顆粒的制備
4.常氧及低氧條件下,HAPA對 ADSCs增殖的影響
5.常氧及低氧條件下,HAPA對 ADSCs成脂分化的影響
6.常氧及低氧條件下,HAPA對 ADSCs的 VEGF分泌的影響
7.體外常氧及低氧條件下,HAPA對游離脂肪存活及凋亡的影響
結(jié)果
1.HAPA促進低氧條件下ADSCs增殖
2.低氧條件下HAPA仍具有對ADSCs成脂誘導特性
3.HAPA促進低氧條件下VEGF的分泌
4.低氧條件下游離脂肪組織及HAPA/脂肪復合物中細胞的存活及凋亡情況
5.體外常氧、低氧條件下HAPA對游離脂肪中細胞的HIF-1α基因表達水平的調(diào)控
6.體外常氧、低氧條件下HAPA對游離脂肪中細胞的HIF-1α蛋白表達影響。
討論
結(jié)論
參考文獻
第二部分:HAPA及 ADSCS促進游離移植脂肪存活的動物實驗研究
前言
主要材料和儀器
1.組織來源與實驗動物
2.主要材料和儀器
實驗方法
1.動物模型制作
2.實驗分組及實驗流程圖示意圖
3.實驗步驟
4.動物處死及取材
5.術(shù)后超聲、大體觀測及移植物體積保留率比較
6.移植脂肪組織組織學評價
7.統(tǒng)計學方法
結(jié)果
1.大體觀察及體積測量結(jié)果
2.超聲及大體觀察結(jié)果
3.HE染色結(jié)果分析
4.圍脂肪蛋白(Perilipin A)染色結(jié)果
5.CD31免疫組化染色結(jié)果
6.Ki67及TUNEL染色結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
第三部分:HAPA輔助脂肪移植的HAPA/脂肪體積比優(yōu)化的體內(nèi)研究
前言
主要材料和儀器
1.組織來源與實驗動物
2.主要材料和儀器
實驗方法
1.移植材料準備與動物模型制作
2.實驗步驟及方法
3.術(shù)后超聲、大體觀測及移植物體積保留率比較
4.移植物組織學染色及分析結(jié)果
5.統(tǒng)計學方法
結(jié)果
1.大體觀察及體積測量結(jié)果
2.超聲觀察結(jié)果
3.HE染色結(jié)果分析
4.CD31免疫組化染色結(jié)果
5.圍脂肪蛋白染色(Perilipin A)結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
課題綜述水凝膠材料在脂肪組織工程的應(yīng)用
參考文獻
在讀間科研成果簡介
致謝
本文編號:3678271
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