細胞表面聚糖作為細胞的重要結(jié)構(gòu)和功能分子之一,參與細胞粘附、細胞識別、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等一系列重要的生命活動。細胞表面糖鏈的表達以及特定糖鏈的改變與細胞的生理狀態(tài)和功能有著極其密切的聯(lián)系,糖鏈的結(jié)構(gòu)異常與許多重大疾病（如癌癥）的發(fā)生和發(fā)展息息相關(guān)。因此發(fā)展高靈敏和高特異性的細胞表面聚糖檢測方法,對于了解細胞表面糖基化異常與腫瘤的關(guān)系,進一步理解糖基化在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中的作用以及開發(fā)新的治療方法和藥物篩選等方面有著極其重要的意義。本工作中我們構(gòu)建了一種基于長余輝納米探針的新型分析平臺,并將此平臺進一步應(yīng)用于探究細胞表面糖鏈的種類和表達水平與腫瘤及類神經(jīng)細胞分化之間的關(guān)系,為進一步理解糖基化與腫瘤的發(fā)生以及與細胞分化之間的聯(lián)系提供一定的現(xiàn)實和理論依據(jù)。本論文主要分為以下兩個研究內(nèi)容:（1）長余輝納米探針的構(gòu)建及其在前列腺腫瘤細胞表面糖鏈分析中的應(yīng)用本工作我們采用水熱法合成了具有近紅外長余輝性質(zhì)的Cr3+摻雜的鎵酸鋅納米粒子(ZnGa₂O₄:Cr³⁺,ZGC)。首先,通過3-氨基丙基-三乙氧基硅烷（APTES）硅烷化和NHS-P... 

【文章頁數(shù)】：61 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮寫符號對照表
第1章 緒論
    1.1 細胞表面聚糖
        1.1.1 細胞表面聚糖的定義和特點
        1.1.2 細胞表面聚糖的功能
    1.2 細胞表面聚糖的識別方法
        1.2.1 凝集素識別法
        1.2.2 硼酸識別法
        1.2.3 生物正交技術(shù)
    1.3 細胞表面聚糖的檢測方法
        1.3.1 質(zhì)譜法
        1.3.2 電化學(xué)法
        1.3.3 熒光法
    1.4 長余輝發(fā)光材料的簡介
    1.5 長余輝發(fā)光材料的合成方法
        1.5.1 高溫固相法
        1.5.2 溶膠-凝膠法
        1.5.3 燃燒法
        1.5.4 共沉淀法
        1.5.5 水熱法
    1.6 長余輝納米材料的應(yīng)用
        1.6.1 生物檢測分析
        1.6.2 生物醫(yī)學(xué)成像
    1.7 本文選題意義及主要研究內(nèi)容
        1.7.1 選題意義
        1.7.2 主要研究內(nèi)容
第2章 實驗所需試劑與儀器
    2.1 實驗所需的主要試劑
    2.2 實驗所需的主要儀器
        2.2.1 透射電子顯微鏡
        2.2.2 X射線衍射儀
        2.2.3 酶聯(lián)免疫檢測儀
        2.2.4 熒光光譜儀
        2.2.5 激光共聚焦掃描顯微鏡
第3章 長余輝納米探針的構(gòu)建及其在前列腺腫瘤細胞表面糖鏈分析中的應(yīng)用
    3.1 引言
    3.2 實驗部分
        3.2.1 長余輝納米粒子ZGC的合成
        3.2.2 ZGC的修飾
        3.2.3 DU145和RWPE-1 細胞培養(yǎng)
        3.2.4 細胞的固定和預(yù)處理
        3.2.5 基于ZGC長余輝探針的DU145表面糖鏈檢測
        3.2.6 基于TMB-HRP顯色法和共聚焦顯微熒光成像法的表面糖鏈分析
        3.2.7 DU145和RWPE-1 細胞表面糖鏈比較
        3.2.8 衣霉素對DU145細胞表面糖鏈的影響
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 實驗原理
        3.3.2 ZGC的表征
        3.3.3 ZGC修飾的表征
        3.3.4 ZGC-PEG-avidin檢測DU145 細胞表面糖鏈和HRP-TMB顯色法驗證性實驗
        3.3.5 共聚焦顯微熒光成像法驗證長余輝納米探針的實驗結(jié)果
        3.3.6 衣霉素對DU145細胞表面糖鏈的影響
        3.3.7 DU145和RWPE-1 細胞表面糖鏈的檢測
    3.4 本章小結(jié)
第4章 基于長余輝納米探針的類神經(jīng)細胞分化過程中細胞表面糖鏈表達譜的研究
    4.1 引言
    4.2 實驗部分
        4.2.1 ZGC-PEG-Biotin的修飾驗證
        4.2.2 ZGC-PEG-Biotin的穩(wěn)定性評價
        4.2.3 低分化pc-12細胞的培養(yǎng)
        4.2.4 低分化pc-12細胞的固定及預(yù)處理
        4.2.5 低分化pc-12細胞細胞表面糖鏈的檢測以及驗證性實驗
        4.2.6 不同分化階段pc-12細胞表面糖鏈的檢測
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 ZGC的功能化修飾與表征
        4.3.2 NGF處理不同時間后pc-12細胞的形態(tài)
        4.3.3 未經(jīng)NGF處理的pc-12 細胞表面糖鏈檢測和HRP-TMB顯色驗證法
        4.3.4 NGF處理不同時間pc-12細胞表面糖鏈檢測
        4.3.5 NGF處理前后的pc-12細胞糖鏈的共聚焦顯微熒光成像
    4.4 本章小結(jié)
第5章 總結(jié)與展望
    5.1 總結(jié)
    5.2 展望
參考文獻
碩士期間科研成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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[3]長余輝發(fā)光材料研究進展[J]. 孫繼兵,王海容,安雅琴,崔春翔,韓丹.  稀有金屬材料與工程. 2008(02)
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[6]長余輝發(fā)光材料研究進展[J]. 羅昔賢,于晶杰,林廣旭,肖志強,段錦霞,肖志國.  發(fā)光學(xué)報. 2002(05)
[7]溶膠─凝膠法及其在稀土發(fā)光材料合成中的應(yīng)用[J]. 林君，蘇鏘.  稀土. 1994(01)

碩士論文
[1]近紅外長余輝納米探針在體外檢測腫瘤細胞中的應(yīng)用[D]. 李金磊.華僑大學(xué) 2015
[2]長余輝發(fā)光材料的燃燒法制備及其發(fā)光性質(zhì)研究[D]. 常素玲.廣西大學(xué) 2006



本文編號：3657193