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雙緩釋PDGF-bb、BMP-6的nHA/Gel-GMS支架復(fù)合BMMSCs修復(fù)大鼠顱骨臨界骨缺損的實驗研究

發(fā)布時間:2022-02-25 05:55
  目的:頜面部的骨組織損傷和缺損不僅會直接造成顏面部畸形而影響美觀,還會導(dǎo)致病患在發(fā)音、語言、咀嚼以及呼吸等方面出現(xiàn)一定程度的功能障礙。目前,臨床治療當(dāng)中所采用的自體或異體組織移植雖有較好療效,但卻仍舊存在不可忽視的弊端。因此,骨組織工程的提出為解決這一臨床問題提供了新的思路。骨組織工程學(xué)是將組織修復(fù)材料和具有生物活性的物質(zhì)進(jìn)行結(jié)合,借由生物因子等發(fā)揮作用來促使骨組織修復(fù)。目前,骨組織工程己逐漸發(fā)展成為通過對細(xì)胞支架材料與生物活性因子聯(lián)合使用,促進(jìn)骨組織的修復(fù)、再生,最終使缺損的骨組織得以修復(fù)或重建。此種方法的優(yōu)點(diǎn)在于不受限于供體的來源,不具有免疫排斥問題,修復(fù)重建后的組織可以替代原有組織,并具有較為理想的功能。納米羥基磷灰石(nHA)晶體的粒徑處于1-100nm范圍內(nèi),具有良好的表面能與量子效應(yīng),且在降解性和生物活性方面亦性能優(yōu)良,更加易于和骨組織發(fā)生整合,加強(qiáng)骨的機(jī)械性能與骨傳導(dǎo)特性。以nHA晶粒植入機(jī)體內(nèi)部不會對機(jī)體造成病理性損害,并且能夠通過相互連通的孔隙來促進(jìn)組織液微循環(huán),從而促使新生骨質(zhì)與周圍組織發(fā)生結(jié)合。明膠(Gel)來自于生物體的本身,是膠原在發(fā)生了部分水解后所產(chǎn)生的變性... 

【文章來源】:中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】:112 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語
第一部分 納米羥基磷灰石/明膠-明膠微球支架的構(gòu)建及其理化性質(zhì)
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
        2.2 實驗方法
    3 結(jié)果
        3.1 GMS與 nHA/Gel-GMS支架的形態(tài)、結(jié)構(gòu)觀察
        3.2 支架的孔隙率與孔徑測定
        3.3 支架的吸水率測定
        3.4 支架的壓縮強(qiáng)度測定
        3.5 支架的降解率分析
    4 討論
    5 結(jié)論
第二部分 nHA/Gel-GMS支架的體外細(xì)胞相容性及體內(nèi)生物安全性檢測
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
        2.2 實驗方法
    3 結(jié)果
        3.1 大鼠BMMSCs的體外分離培養(yǎng)
        3.2 大鼠BMMSCs的表面標(biāo)志物鑒定
        3.3 大鼠BMMSCs的成骨誘導(dǎo)分化鑒定
        3.4 大鼠BMMSCs的成脂誘導(dǎo)分化鑒定
        3.5 nHA/Gel-GMS支架的體外細(xì)胞相容性檢測
            3.5.1 體外細(xì)胞毒性試驗
            3.5.2 接種于支架的BMMSCs黏附率測定
            3.5.3 接種于支架的BMMSCs增殖情況
            3.5.4 細(xì)胞-支架復(fù)合體的掃描電鏡觀察
            3.5.5 LSCM觀察支架內(nèi)細(xì)胞生長情況
        3.6 nHA/Gel-GMS支架的體內(nèi)生物安全性檢測
            3.6.1 溶血試驗
            3.6.2 皮內(nèi)反應(yīng)試驗
            3.6.3 熱原試驗
            3.6.4 急性全身毒性試驗
            3.6.5 植入局部反應(yīng)試驗
            3.6.6 亞慢性全身毒性試驗
    4 討論
    5 結(jié)論
第三部分 PDGF、BMP-6/nHA/Gel-GMS支架體外促成骨及修復(fù)顱骨臨界性骨缺損的實驗研究
    1 前言
    2 材料和方法
        2.1 主要試劑和儀器
        2.2 實驗方法
    3 結(jié)果
        3.1 載因子支架中PDGF、BMP-6 的體外釋放情況
        3.2 細(xì)胞接種支架后體外成骨效果及相關(guān)蛋白表達(dá)
        3.3 大鼠臨界骨缺損模型的建立
        3.4 術(shù)后影像學(xué)檢測分析
        3.5 術(shù)后組織學(xué)檢測
    4 討論
    5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻(xiàn)
綜述 骨組織工程研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個人簡歷


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[2]骨質(zhì)疏松大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法及生物學(xué)特性鑒定[J]. 吳玉瓊,江凌勇,張鵬,代慶剛,房兵.  中國口腔頜面外科雜志. 2013(01)
[3]納米羥基磷灰石及其復(fù)合材料技術(shù)進(jìn)展[J]. 殷憲國.  硫磷設(shè)計與粉體工程. 2012(02)
[4]可注射性殼聚糖基溫敏性凝膠的制備及其生物相容性[J]. 閆繼紅,孫海梅,尚宏偉,張立新,路欣.  吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 2011(05)
[5]膠原及明膠基天然高分子復(fù)合材料研究進(jìn)展[J]. 裴瑩,鄭學(xué)晶,湯克勇.  高分子通報. 2010(02)
[6]乳酸-羥基乙酸共聚物納米粒的研究進(jìn)展[J]. 凌友,黃岳山,梁常艷.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2008(10)
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[10]纖維蛋白粘合劑與羥基磷灰石復(fù)合人工骨的實驗研究[J]. 田衛(wèi)東,李聲偉,鄧楠,鄭曉輝,陳偉輝.  中國口腔種植學(xué)雜志. 1998(04)



本文編號:3643823

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