發(fā)布時(shí)間：2022-02-18 11:19

　　【目的】探討軟骨細(xì)胞外基質(zhì)支架制備工藝的改進(jìn)以及其優(yōu)越性�！痉椒ā浚�1）應(yīng)用目前的勻漿-脫細(xì)胞方法制作軟骨細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix,ECM）粉末,在此基礎(chǔ)上使用高速研磨儀通過(guò)反復(fù)冷凍研磨,最后經(jīng)過(guò)顆粒篩選獲得更加細(xì)膩的粉末,我們稱(chēng)其為改良ECM粉末（fine extracellular matrix,FECM）。（2）將ECM粉末和FECM粉末分別以10%（w/v）濃度通過(guò)冷凍干燥法制成ECM支架和FECM支架。（3）分別對(duì)ECM支架和FECM支架進(jìn)行大體觀察,掃描電鏡（SEM）檢測(cè)其微觀結(jié)構(gòu),并測(cè)量其孔徑。（4）對(duì)兩種支架進(jìn)行DAPI染色觀察脫細(xì)胞情況,孔隙率及吸水率測(cè)定、CCK-8細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)等相關(guān)檢測(cè)。（5）在兩種支架上分別接種第3代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）,分別計(jì)算細(xì)胞接種率和粘附率。（6）將ECM支架和FECM支架分別作為對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。并應(yīng)用聚乳酸聚羥基乙酸聚合物（PLGA）支架為陽(yáng)性對(duì)照組。取等量第3代骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）種植于ECM支架和FECM支架,同時(shí)將等量經(jīng)過(guò)成軟骨誘導(dǎo)的BMSCs種植于PLGA支架,然后將三種細(xì)胞-支架... 

【文章來(lái)源】：南京醫(yī)科大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

ECM支架和FECM支架的大體觀察和掃描電鏡觀察（×50倍）

圖 2. 未脫細(xì)胞軟骨組織和兩種支架的 DAPI 染色（×40 倍）。A 為未脫細(xì)胞軟骨組織 DAPI 染色，B 為未脫細(xì)胞 ECM 支架 DAPI 染色，C 為 FECM 支架 DAPI染色。表 1. 兩種支架的孔徑大小、吸水率以及孔隙率（n=8）

南京醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文圖 2. 未脫細(xì)胞軟骨組織和兩種支架的 DAPI 染色（×40 倍）。A 為未脫細(xì)胞軟骨組織 DAPI 染色，B 為未脫細(xì)胞 ECM 支架 DAPI 染色，C 為 FECM 支架 DAPI染色。表 1. 兩種支架的孔徑大小、吸水率以及孔隙率（n=8）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]軟骨PLGA-Ⅱ型膠原支架復(fù)合體修復(fù)兔膝關(guān)節(jié)骨軟骨損傷[J]. 黃彰,王雙利,潘政軍,江華,熊高鑫,李劼若,侯輝歌.  臨床骨科雜志. 2016(01)
[2]制備軟骨組織工程支架的材料和方法[J]. 貴浩然,李澎,張衛(wèi)國(guó).  中國(guó)組織工程研究. 2013(03)
[3]軟骨組織工程中支架材料的文獻(xiàn)回顧[J]. 吳軍成,霍然,呂仁榮.  中國(guó)組織工程研究. 2012(03)
[4]關(guān)節(jié)鏡下應(yīng)用“微骨折”方法修復(fù)關(guān)節(jié)軟骨缺損[J]. 張遠(yuǎn)金,段軍,柯雯曇,張欣.  中國(guó)骨傷. 2006(07)
[5]生命科學(xué)的新增長(zhǎng)點(diǎn)——組織工程[J]. 翁雨來(lái),商慶新,曹誼林.  牙體牙髓牙周病學(xué)雜志. 2000(05)



本文編號(hào)：3630740