本文關(guān)鍵詞：靜電紡制備納米紗線構(gòu)建新型神經(jīng)導(dǎo)管支架，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：周圍神經(jīng)損傷是臨床上常見的損傷，廣泛存在于車禍、工傷以及日常生活中。自體神經(jīng)移植仍然是臨床治療周圍神經(jīng)損傷的黃金標準，但是其受制于供體和發(fā)病率的影響，已經(jīng)不能滿足臨床需要。而神經(jīng)導(dǎo)管的出現(xiàn)可以成為自體神經(jīng)移植物的良好替代品。神經(jīng)導(dǎo)管可以為神經(jīng)修復(fù)提供一個合適的微環(huán)境，使其能夠引導(dǎo)細胞的遷移和軸突生長。 由于中空結(jié)構(gòu)的神經(jīng)導(dǎo)管不利于細胞的粘附和生長，不能為神經(jīng)生長提供導(dǎo)向作用，不利于新生神經(jīng)向遠斷端處定向生長，影響了神經(jīng)修復(fù)的速度和效果。為了解決此問題，本論文設(shè)計了納米紗線作為芯層的神經(jīng)導(dǎo)管。本研究主要采用改進的靜電紡絲裝置，通過調(diào)整紡絲參數(shù)和接收裝置制備納米紗線，來作為神經(jīng)導(dǎo)管的填充物。該裝置是由雙針頭紡絲系統(tǒng)組成，高速旋轉(zhuǎn)的金屬漏斗及紗線卷繞器作為接收裝置。主要操作過程為：將針管放置在兩側(cè)的推進泵上，設(shè)定相同的推進速度，分別接正負壓，通過調(diào)節(jié)噴頭的角度，納米纖維在高速旋轉(zhuǎn)的漏斗口部聚集，用金屬棒牽引出一根納米紗線，使其一端纏繞到紗線卷繞器上，通過卷繞器繞動收集納米紗線。由于金屬漏斗和卷繞器以不同的方向旋轉(zhuǎn)，使落在二者之間成百上千根納米纖維加捻形成具有一定力學(xué)性能和生物相容性的納米紗線。 掃描電子顯微鏡（SEM）表征得到的單根納米線紗線具有較高的取向度。力學(xué)測試結(jié)果表明，高取向度的納米紗線具備良好的力學(xué)性能。生物相容性測試以雪旺細胞（SCs）作為種子細胞，其MTT結(jié)果表明，相較于無規(guī)的納米纖維膜，具有較高的取向度的納米紗線更利于細胞的增殖。SEM和激光共聚焦掃描（CLSM）都證明細胞在取向納米纖維紗線支架上沿軸向方向鋪展更開，說明高取向度的納米紗線能夠誘導(dǎo)細胞定向生長。 利用制備的納米紗線，平行排列在金屬棒的表面，并固定兩端。用附有納米纖維紗線的金屬棒旋轉(zhuǎn)接收，在納米纖維紗線外側(cè)形成一層P（LLA-CL）納米纖維膜，，得到芯層含有納米紗線的神經(jīng)導(dǎo)管。MTT實驗結(jié)果表明，芯層含有納米紗線的神經(jīng)導(dǎo)管比中空結(jié)構(gòu)的神經(jīng)導(dǎo)管更利于細胞的生長。SEM和CLSM證明雪旺細胞在芯層含有納米紗線的神經(jīng)導(dǎo)管內(nèi)部鋪展更開，而且沿紗線軸向生長，表明含有納米紗線的神經(jīng)導(dǎo)管更有利于細胞的增殖及定向遷移。
【關(guān)鍵詞】：靜電紡絲 納米紗線 神經(jīng)導(dǎo)管 生物相容性 雪旺細胞
【學(xué)位授予單位】：東華大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R318.08
【目錄】：

• 摘要3-4
• ABSTRACT4-8
• 第一章 緒論8-22
• 1.1 組織工程8-9
• 1.2 神經(jīng)導(dǎo)管的研究進展9-20
• 1.2.1 神經(jīng)組織的組成、結(jié)構(gòu)和功能10-11
• 1.2.2 神經(jīng)導(dǎo)管支架材料的選擇11-15
• 1.2.3 神經(jīng)導(dǎo)管成型技術(shù)的研究15-17
• 1.2.4 神經(jīng)導(dǎo)管構(gòu)型17-20
• 1.3 神經(jīng)組織工程細胞20
• 1.4 取向納米纖維支架對神經(jīng)再生的影響20
• 1.5 本課題的研究目標及內(nèi)容20-22
• 第二章 靜電紡納米紗線的制備及其表征22-32
• 2.1 實驗部分22-25
• 2.1.1 主要材料和試劑22-23
• 2.1.2 主要儀器與設(shè)備23
• 2.1.3 紡絲溶液配制及紗線制備23-24
• 2.1.4 雪旺細胞的培養(yǎng)24-25
• 2.2 納米紗線形貌表征25-27
• 2.2.1 電子掃描顯微鏡表征25
• 2.2.2 納米紗線力學(xué)性能表征25
• 2.2.3 材料處理25-26
• 2.2.4 細胞種植26
• 2.2.5 細胞形態(tài)觀察26
• 2.2.6 MTT 實驗26-27
• 2.2.7 免疫染色27
• 2.3 統(tǒng)計學(xué)分析27
• 2.4 結(jié)果與討論27-31
• 2.4.1 靜電紡納米紗線纖維形態(tài)27-28
• 2.4.2 納米紗線力學(xué)性能表征28-29
• 2.4.3 雪旺細胞在納米線紗線和納米纖維膜上的形態(tài)29
• 2.4.4 細胞在納米纖維膜和納米紗線上的增殖29-30
• 2.4.5 免疫學(xué)染色結(jié)果分析30-31
• 2.5 本章小結(jié)31-32
• 第三章 利用納米纖維紗線構(gòu)建神經(jīng)導(dǎo)管及其表征32-36
• 3.1 實驗部分32-33
• 3.1.1 主要實驗材料和試劑32
• 3.1.2 試驗用主要實驗儀器與設(shè)備32
• 3.1.3 紡絲溶液配制及神經(jīng)導(dǎo)管制備32-33
• 3.1.4 神經(jīng)導(dǎo)管支架形貌表征33
• 3.2 結(jié)果與討論33-35
• 3.2.1 復(fù)合納米紗線神經(jīng)導(dǎo)管33-34
• 3.2.2 神經(jīng)導(dǎo)管掃描電鏡圖34-35
• 3.3 本章小結(jié)35-36
• 第四章 納米紗線構(gòu)建神經(jīng)導(dǎo)管的生物學(xué)性能研究36-43
• 4.1 實驗部分36-39
• 4.1.1 實驗用主要用材料和試劑36
• 4.1.2 試驗用主要實驗儀器與設(shè)備36-37
• 4.1.3 中空結(jié)構(gòu) P（LLA-CL）神經(jīng)導(dǎo)管制備37
• 4.1.4 材料處理37-38
• 4.1.5 細胞的復(fù)蘇與增值38
• 4.1.6 細胞種植38-39
• 4.1.7 細胞形態(tài)觀察39
• 4.1.8 MTT 實驗39
• 4.1.9 免疫染色39
• 4.2 統(tǒng)計學(xué)分析39-40
• 4.3 結(jié)果與討論40-42
• 4.3.1 雪旺細胞在神經(jīng)導(dǎo)管支架上的形貌特征40
• 4.3.2 雪旺細胞增殖實驗結(jié)果分析40-41
• 4.3.3 免疫學(xué)染色41-42
• 4.4 本章小結(jié)42-43
• 第五章 結(jié)論與展望43-44
• 5.1 實驗結(jié)論43
• 5.2 展望43-44
• 參考文獻44-48
• 附錄 攻讀碩士學(xué)位期間科研及發(fā)表論文情況48-49
• 致謝49

【參考文獻】

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本文編號：361586