本文以明膠（G）為原料,采用定向冷凍干燥法制備出定向明膠支架,通過原位培養(yǎng)技術在支架引入細菌纖維素（BC）納米纖維網(wǎng)絡,構筑出兼具微米多孔和納米纖維結構的BC基定向微/納支架,并使用場發(fā)射掃描電鏡（FE-SEM）、激光共聚焦顯微鏡（CLSM）等對支架的微觀結構生物學性能進行了表征。結果表明:與非定向支架的多孔結構相比,定向支架具有徑向多孔和軸向通道結構,呈現(xiàn)各向異性,這種通道結構有利于氧氣和營養(yǎng)物質的輸送,能有效促進細胞生長。 

【文章來源】：合成技術及應用. 2020,35(02)

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

原位培養(yǎng)法制備定向G/BC支架的示意圖

在掃描電鏡下對原位培養(yǎng)前的明膠支架進行觀察,結果如圖2所示。從圖2(a)和(b)中可以看到,非定向明膠支架為均勻多孔結構,孔徑大小在 100～300 μm范圍內,符合組織工程支架的基本要求。從圖2(c)和(d)中可以看到,定向明膠支架的表面為多孔結構,截面為通道結構,呈現(xiàn)出明顯的各向異性。這是因為在傳統(tǒng)的冷凍干燥法中,不存在溫度梯度,各個方向上冰晶的生長都是一致的,干燥后得到的孔洞結構具有各向同性,而定向冷凍干燥法對冷凍環(huán)境進行了改變,形成某特定方向上的溫度梯度,使得晶核朝指定方向生長,干燥后得到的孔洞結構具有各向異性。在掃描電鏡下對原位培養(yǎng)7天后的G/BC復合支架進行觀察,結果如圖3所示。從圖3(a)和(b)中可以看到,非定向G/BC支架內的BC納米纖維主要集中分布在孔洞內壁上,這是由于BC上的羥基可以與明膠支架上氨基形成氫鍵,從而提高BC納米纖維在明膠支架表面的粘附性,但因為支架的連通性較差,BC長入的深度也較淺[13]。從圖3(c)和(d)中可以看到,定向G/BC支架除了表面的孔洞外,截面的片層間也分布有BC納米纖維,這是因為定向支架具有徑向多孔和軸向通道結構,這種各向異性的結構一方面能夠給木醋桿菌提供豐富的吸附位點,另一方面還可以為木醋桿菌的生物發(fā)酵提供充足的氧氣和營養(yǎng)物質運輸通道,有利于它的生長、遷移和繁衍,從而促進BC的長入。

在掃描電鏡下對原位培養(yǎng)7天后的G/BC復合支架進行觀察,結果如圖3所示。從圖3(a)和(b)中可以看到,非定向G/BC支架內的BC納米纖維主要集中分布在孔洞內壁上,這是由于BC上的羥基可以與明膠支架上氨基形成氫鍵,從而提高BC納米纖維在明膠支架表面的粘附性,但因為支架的連通性較差,BC長入的深度也較淺[13]。從圖3(c)和(d)中可以看到,定向G/BC支架除了表面的孔洞外,截面的片層間也分布有BC納米纖維,這是因為定向支架具有徑向多孔和軸向通道結構,這種各向異性的結構一方面能夠給木醋桿菌提供豐富的吸附位點,另一方面還可以為木醋桿菌的生物發(fā)酵提供充足的氧氣和營養(yǎng)物質運輸通道,有利于它的生長、遷移和繁衍,從而促進BC的長入。2.2.2 細胞在不同G/BC復合支架的增殖行為分析

【參考文獻】：
期刊論文
[1]不同孔徑聚乳酸-殼聚糖-明膠支架對成纖維細胞粘附效果的研究[J]. 劉冰,鐘代琴,王永蘭,靳趁心,姚芳蓮.  口腔醫(yī)學研究. 2013(02)
[2]細菌纖維素/明膠支架材料在成骨細胞體外培養(yǎng)中的應用[J]. 劉繼光,王艷萍,李慕勤,王靜,萬怡灶,王佳琦.  中國體視學與圖像分析. 2011(03)



本文編號：3563836