目的:對于種植材料而言,具有骨結構仿生特點的微/納米分級表面形貌具有更好的生物活性,能夠促進細胞的成骨向分化,抑制其成脂向分化,有利于種植體表面新骨形成。然而,細胞對微/納米分級表面形貌的機械響應過程和潛在的應答機制目前并不清楚。本研究的目的在于探討機械信號響應分子TAZ在該過程中的作用及其活化機制。對該問題的深入探討,有助于理解種植體表面微/納米分級形貌對細胞生物學行為的調控作用,并為針對性開展種植材料表面改性提供線索和思路。方法:1.探究TAZ在微米溝槽/納米網(wǎng)孔分級形貌鈦表面調控干細胞分化過程中的作用。采用選擇性激光熔融（selective laser melting fully melting,SLM）技術結合堿熱處理（alkali-heat treatment,AHT）制備具有微米溝槽/納米網(wǎng)孔結構的分級形貌的種植用鈦表面（SLM-AHT）,以光滑鈦表面（Ti）、噴砂酸蝕鈦表面（SLA）為對照表面形貌,應用體外實驗評估各組鈦表面形貌對牙周膜干細胞（periodontal ligamennt stem cells,PDLSCs）成骨、成脂分化的影響。在Ti、SLA和SLM-AH... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：85 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

Ti、SLA和SLM-AHT鈦試件的SEM圖片

圖 3 PDLSCs 在不同形貌鈦表面及不同誘導條件下培養(yǎng) 7 天的成骨、成脂相關基因的 mRNA 的表達水平。（A）PDLSCs 在不同形貌鈦表面成骨誘導 7 天的成骨相關基因 RUNX2 和 ALP 的 mRNA 的表達水平。（B）PDLSCs 在不同形貌鈦表面成脂誘導 7 天的成脂相關基因 PPARγ 和 C/EBPα 的 mRNA 的表達水平。Figure 3. Expression levels of osteogenic and adipogenic genes in PDLSCs ondifferent titanium surfaces and under different induction conditions. Error barsrepresent SD (n = 3). *P < 0.05. **P< 0.01.1.2.3 免疫熒光結果分析如圖 4 所示，PDLSCs 在不同形貌鈦表面成骨誘導 7 天后細胞內成骨相關蛋白 RUNX2 的免疫熒光結果顯示，與對照組相比，SLM-AHT 微/納米分級形貌鈦表面培養(yǎng)的細胞具有最強的 RUNX2 陽性染色。

4 PDLSCs 在不同形貌鈦表面成骨誘導 7 天后細胞內 RUNX2 的免疫熒光染（RUNX2 呈紅色，細胞核呈藍色）。Figure 4. Immunofluorescence staining of RUNX2 after 7 days of osteogenicinduction of PDLSCs on different titanium surfaces (Red, RUNX2; Blue, DAPI).2.4 蛋白質免疫印跡結果分析如圖 5 所示，PDLSCs 在不同形貌鈦表面及不同誘導條件下的成骨相關蛋UNX2 和成脂相關蛋白 PPARγ2 的 Western blot 結果顯示，SLM-AHT 微/納米形貌鈦表面上培養(yǎng)的細胞內RUNX2的蛋白表達水平明顯高于SLA和Ti組（A），而 PPARγ2 的蛋白表達水平明顯低于 SLA 和 Ti 組（圖 5B）。A. B.


本文編號：3504519