BSA改性DBM支架的制備及細(xì)胞黏附性能研究
發(fā)布時(shí)間:2021-11-18 17:15
研究目的:1.采用不同濃度的牛血清白蛋白(BSA)對(duì)牛脫鈣骨基質(zhì)(DBM)進(jìn)行表面修飾,制備具有BSA涂層的DBM支架材料,觀察各組支架表征并對(duì)其性能進(jìn)行分析;2.無(wú)菌環(huán)境下,小鼠成纖維細(xì)胞(L929)與BSA改性前后的DBM支架共培養(yǎng),觀察細(xì)胞在支架表面的生長(zhǎng)情況,測(cè)定支架材料對(duì)細(xì)胞增殖活性的影響;3.L929細(xì)胞與支架材料在無(wú)菌環(huán)境下共培養(yǎng)一定時(shí)間后,測(cè)定BSA改性前后的DBM支架對(duì)細(xì)胞的黏附能力,探尋適宜的BSA濃度。研究方法:1.取牛松質(zhì)骨體外脫脂脫鈣后制得DBM支架材料作為對(duì)照組,使用濃度為10 mg/ml、20 mg/ml、30 mg/ml、40 mg/ml 的BSA溶液處理DBM,冷凍干燥法制備的具有BSA涂層的支架作為實(shí)驗(yàn)組。掃描電子顯微鏡下觀察支架的表面形貌,傅里葉變換紅外光譜分析BSA的結(jié)合情況,并對(duì)支架的孔隙率、降解速率、接觸角進(jìn)行測(cè)定。2.復(fù)蘇L929細(xì)胞,將生長(zhǎng)情況良好的細(xì)胞接種到無(wú)菌DBM支架及具有BSA涂層的支架內(nèi),共培養(yǎng)3d,掃描電鏡下觀察細(xì)胞在支架內(nèi)生長(zhǎng)情況,MTT法檢測(cè)BSA改性前后的支架對(duì)細(xì)胞增殖活性的影響。3.將L929細(xì)胞接種到改性前后的DBM...
【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖2.1掃描電鏡下支架表面形態(tài)??Fig?2.1?SEM?images?of?scaffolds??
2.4.3支架的孔隙率????各組支架的孔隙率測(cè)定結(jié)果如圖2.3。DBM支架內(nèi)部三維多孔結(jié)構(gòu)相互交??聯(lián),膠原網(wǎng)架有效空間大,孔隙率達(dá)(69.28±2.46)?%。使用BSA對(duì)DBM支架??修飾后,隨著BSA濃度的增加,支架的孔隙率逐漸降低,各組支架的孔隙率分??別為(51.08±1.53)?%,(46.20±0.99)?%,?(40.83±1.23)?%,?(34_28士2.73)?%。??在骨組織工程中,支架孔隙率大小可以控制氧氣及營(yíng)養(yǎng)成分輸送的速度和效率,??材料孔隙率適當(dāng)降低不影響細(xì)胞的定植,但孔隙率過(guò)低影響支架整體負(fù)載細(xì)胞??的能力,提示利用BSA對(duì)支架改性時(shí),蛋白濃度不宜過(guò)高,應(yīng)低于40mg/ml。??14??
Fig?2.3?Porosity?ratio?of?scaffolds??2.4.4支架的親水性??DBM支架及具有BSA涂層的各組DBM支架的靜態(tài)接觸角見(jiàn)圖2.4?(A)。??DBM支架改性前,表面接觸角大于90°;不同濃度的BSA處理后DBM支架表??面接觸角均小于90°。每組隨機(jī)。硞(gè)平行樣進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)圖2.4?(B)。??對(duì)照組DBM支架材料的接觸角為124.52°±9.35°,各實(shí)驗(yàn)組接觸角分別為??68.94。±2.03。,65.81。±2.69。,70.5。±0.47。,69.26。±6.91。。與對(duì)照組?DBM?支架??相比,BSA處理的實(shí)驗(yàn)組接觸角差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),各個(gè)實(shí)驗(yàn)組??兩兩比較,接觸角大小無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)果表明,BSA涂層可以改??進(jìn)DBM支架的親水性,與BSA的濃度大小無(wú)關(guān)。??(a)?(b)?(C)??(d)?(e)??圖2.4?(A)支架材料的表面接觸角??15??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]富血小板血漿的制備現(xiàn)狀及研究進(jìn)展[J]. 呂敏,裴國(guó)獻(xiàn),劉勇,靳宇飛,李富航,白建萍. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2013(13)
[2]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與同種異體脫鈣骨基質(zhì)組合生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)向軟骨細(xì)胞分化[J]. 徐斌,宣濤,徐洪港,王浩. 中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2011(21)
[3]富血小板血漿和脫鈣骨基質(zhì)促進(jìn)牽拉成骨礦化過(guò)程的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 倪明,唐佩福,王巖,李剛. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志. 2011(06)
碩士論文
[1]鋅摻雜的羥基磷灰石復(fù)合物(聚乳酸或石墨烯)制備與模擬研究[D]. 巫劍波.深圳大學(xué) 2017
本文編號(hào):3503289
【文章來(lái)源】:吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
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【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
圖2.1掃描電鏡下支架表面形態(tài)??Fig?2.1?SEM?images?of?scaffolds??
2.4.3支架的孔隙率????各組支架的孔隙率測(cè)定結(jié)果如圖2.3。DBM支架內(nèi)部三維多孔結(jié)構(gòu)相互交??聯(lián),膠原網(wǎng)架有效空間大,孔隙率達(dá)(69.28±2.46)?%。使用BSA對(duì)DBM支架??修飾后,隨著BSA濃度的增加,支架的孔隙率逐漸降低,各組支架的孔隙率分??別為(51.08±1.53)?%,(46.20±0.99)?%,?(40.83±1.23)?%,?(34_28士2.73)?%。??在骨組織工程中,支架孔隙率大小可以控制氧氣及營(yíng)養(yǎng)成分輸送的速度和效率,??材料孔隙率適當(dāng)降低不影響細(xì)胞的定植,但孔隙率過(guò)低影響支架整體負(fù)載細(xì)胞??的能力,提示利用BSA對(duì)支架改性時(shí),蛋白濃度不宜過(guò)高,應(yīng)低于40mg/ml。??14??
Fig?2.3?Porosity?ratio?of?scaffolds??2.4.4支架的親水性??DBM支架及具有BSA涂層的各組DBM支架的靜態(tài)接觸角見(jiàn)圖2.4?(A)。??DBM支架改性前,表面接觸角大于90°;不同濃度的BSA處理后DBM支架表??面接觸角均小于90°。每組隨機(jī)。硞(gè)平行樣進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果見(jiàn)圖2.4?(B)。??對(duì)照組DBM支架材料的接觸角為124.52°±9.35°,各實(shí)驗(yàn)組接觸角分別為??68.94。±2.03。,65.81。±2.69。,70.5。±0.47。,69.26。±6.91。。與對(duì)照組?DBM?支架??相比,BSA處理的實(shí)驗(yàn)組接觸角差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),各個(gè)實(shí)驗(yàn)組??兩兩比較,接觸角大小無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)果表明,BSA涂層可以改??進(jìn)DBM支架的親水性,與BSA的濃度大小無(wú)關(guān)。??(a)?(b)?(C)??(d)?(e)??圖2.4?(A)支架材料的表面接觸角??15??
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]富血小板血漿的制備現(xiàn)狀及研究進(jìn)展[J]. 呂敏,裴國(guó)獻(xiàn),劉勇,靳宇飛,李富航,白建萍. 現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2013(13)
[2]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與同種異體脫鈣骨基質(zhì)組合生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)向軟骨細(xì)胞分化[J]. 徐斌,宣濤,徐洪港,王浩. 中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2011(21)
[3]富血小板血漿和脫鈣骨基質(zhì)促進(jìn)牽拉成骨礦化過(guò)程的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 倪明,唐佩福,王巖,李剛. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志. 2011(06)
碩士論文
[1]鋅摻雜的羥基磷灰石復(fù)合物(聚乳酸或石墨烯)制備與模擬研究[D]. 巫劍波.深圳大學(xué) 2017
本文編號(hào):3503289
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