目的:運(yùn)用選擇性激光熔化（Selective laser melting,SLM）技術(shù)制備的多孔TC4金屬支架對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMSCs）細(xì)胞毒性及成骨分化的影響。方法:1.體外全骨髓貼壁法培養(yǎng)SD大鼠BMSCs原代細(xì)胞。2.流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行BMSCs表型鑒定:選取處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,分化良好的第3代BMSCs,流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行細(xì)胞表型鑒定。3.TC4金屬支架制備、分組及預(yù)處理:利用SLM制備長(zhǎng)×寬×高=5×5×2.5mm的立方形多孔支架,并將支架上孔形和孔數(shù)設(shè)計(jì)為圓形9孔、圓形16孔、圓形64孔、方形25孔、方形64孔以及無(wú)孔對(duì)照組。4.第3代BMSCs接種于TC4金屬支架48h后運(yùn)用掃描電鏡（Scanning electron microscopy,SEM）觀察細(xì)胞形態(tài)以及細(xì)胞黏附情況。5.第3代BMSCs接種于支架分別于1天、3天、5天及7天運(yùn)用細(xì)胞增殖活性檢測(cè)試劑盒（CCK-8）檢測(cè)TC4金屬支架的細(xì)胞毒性作用。6.第4代BMSCs接種于支架,進(jìn)行成骨誘導(dǎo),分別于7天、14天時(shí)進(jìn)行堿性磷酸酶活性（Alkaline... 

【文章來(lái)源】：遵義醫(yī)科大學(xué)貴州省

【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

多孔SLM支架

采用 SPSS 18.0 統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差( )表示，組間比較采用獨(dú)立樣本 t 檢驗(yàn)進(jìn)行分析，多組間比較采用單因素方差分析one-way ANOVA)，以 P<0.05 和 P<0.01 表示有顯著差異和極顯著差異。 結(jié)果.1 BMSCs 原代培養(yǎng)細(xì)胞接種初期，由于存在著較多圓形血細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、骨渣及雜質(zhì)，導(dǎo)致MSCs 形態(tài)難以辨認(rèn)(圖 2A)；培養(yǎng) 72 h 后多數(shù)細(xì)胞已貼壁，呈集落狀生長(zhǎng)，此呈三角形、多邊形及不規(guī)則形態(tài)的細(xì)胞居多(圖 2B)；7-10 天后首次進(jìn)行傳代可見(jiàn)第 1 代細(xì)胞，呈旋渦狀生長(zhǎng)，不規(guī)則形細(xì)胞減少(圖 2C)；到第 3 代細(xì)胞，態(tài)趨于穩(wěn)定的長(zhǎng)梭形，連接緊密(圖 2D) 。x s

圖 4D)；方形 25 孔支架可見(jiàn)片狀細(xì)胞層連接緊密，并向孔內(nèi)延伸(見(jiàn)圖 4E)；方形 64 孔支架細(xì)胞扁平，形態(tài)光滑飽滿，相互伸出偽足，連接更加緊密(見(jiàn)圖 4F)。圖4 掃描電鏡檢測(cè)早期 BMSCs 形態(tài)觀察(A)無(wú)孔實(shí)心支架; (B) 圓形9孔支架; (C) 圓形16孔支架; (D) 圓形64孔支架; (E) 方形25孔支架; (F) 方形64孔支架

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號(hào)：3472903