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人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞和乳鼠雪旺細(xì)胞復(fù)合殼聚糖/NT-3支架材料修復(fù)大鼠脊髓損傷的實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2021-09-04 18:01
  目的:通過(guò)酶消化法在體外利用人臍帶及乳鼠坐骨神經(jīng)分離出臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞和雪旺細(xì)胞并進(jìn)行傳代培養(yǎng)和鑒定,在體外與材料復(fù)合構(gòu)建出殼聚糖-NT3細(xì)胞復(fù)合支架材料,并將其植入構(gòu)建好的大鼠脊髓橫斷損傷模型中,通過(guò)設(shè)置相應(yīng)的對(duì)照組及相關(guān)檢測(cè)指標(biāo),檢測(cè)細(xì)胞復(fù)合支架材料對(duì)大鼠脊髓橫斷損傷的修復(fù)效果。方法:以人臍帶為取材來(lái)源,采用經(jīng)典膠原酶消化法分離出臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,傳代培養(yǎng),顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),繪制增殖曲線,用流式細(xì)胞儀進(jìn)行表面抗原鑒定。以SD新生乳鼠的坐骨神經(jīng)分離出雪旺細(xì)胞并傳代,以免疫組織化學(xué)方法和光學(xué)顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)進(jìn)行鑒定。將傳代后的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞和雪旺細(xì)胞與殼聚糖-NT3支架(由暨南大學(xué)理工學(xué)院提供)復(fù)合,構(gòu)建出細(xì)胞復(fù)合材料,設(shè)計(jì)相應(yīng)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)分組,按分組情況植入相應(yīng)植入物,經(jīng)行為學(xué)、影像學(xué)、組織學(xué)等評(píng)估脊髓損傷的治療效果。結(jié)果:以酶消化法成功從臍帶中分離培養(yǎng)出間充質(zhì)干細(xì)胞,并經(jīng)細(xì)胞形態(tài)觀察、流式檢測(cè)鑒定顯示所提取細(xì)胞均高度表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞的標(biāo)記(CD73、CD90、CD105)和黏附分子標(biāo)記(CD54、CD44、CD29、)不表達(dá)造血干細(xì)胞標(biāo)記(CD45、CD40、CD34)和人類... 

【文章來(lái)源】:暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】:67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞和乳鼠雪旺細(xì)胞復(fù)合殼聚糖/NT-3支架材料修復(fù)大鼠脊髓損傷的實(shí)驗(yàn)研究


人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線

人臍帶,間充質(zhì)干細(xì)胞,表面標(biāo)志,流式


16圖2-6 流式鑒定流式細(xì)胞儀檢測(cè)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的表面標(biāo)志顯示:臍帶干細(xì)胞均統(tǒng)一高表達(dá)間充質(zhì)干細(xì)胞的表面標(biāo)記(CD73、CD90、CD105)和黏附分子標(biāo)記(CD54 、CD44、CD29、),不表達(dá)造血干細(xì)胞標(biāo)記(CD45、CD40、CD34)和人類白細(xì)胞抗原標(biāo)記(HLA-DR)

MRI圖像,組圖


術(shù)后4周各組橫斷位MRI圖像

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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本文編號(hào):3383744

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