目的:通過(guò)體內(nèi)及體外實(shí)驗(yàn),分析3D打印技術(shù)制備的聚乳酸/羥基乙酸共聚物/羥基磷灰石（poly-lactic-co-glycolide/hydroxyapatite,PLGA/HA）可生物降解支架材料的生物相容性及該支架用于大鼠股骨全層骨缺損后,骨愈合過(guò)程中的組織病理學(xué)變化過(guò)程及骨缺損修復(fù)效果。方法:1.利用3D生物打印機(jī),以聚乳酸/羥基乙酸和羥基磷灰石顆粒為原料快速成形PLGA/HA三維生物支架。2.體外實(shí)驗(yàn):取3 mm×3 mm×2 mm PLGA/HA支架與小鼠成骨細(xì)胞（MC3T3-E1 cell）共同培養(yǎng)14天后,將攜帶細(xì)胞的支架經(jīng)戊二醛固定、逐級(jí)脫水及干燥等步驟,最后經(jīng)電鏡觀察細(xì)胞在該生物支架上的形態(tài)變化、黏附、聚集及生長(zhǎng)情況。3.選取30只六周齡、雌性SD（Sprague-Dawley）大鼠,沿雙側(cè)股骨長(zhǎng)軸作2 cm切口切開(kāi)皮膚,依次分離筋膜、肌肉和骨膜全層,近股骨頭端1/3處制作長(zhǎng)4 mm的全層骨缺損模型,深達(dá)骨髓腔。左側(cè)股骨為實(shí)驗(yàn)肢,缺損處放置無(wú)菌PLGA/HA支架,依次縫合周圍肌肉、筋膜及皮膚;右側(cè)股骨為對(duì)照肢,不予充填材料,僅作分層縫合全層組織。術(shù)后于第三天及第1、2... 

【文章來(lái)源】：青島大學(xué)山東省

【文章頁(yè)數(shù)】：50 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

4.1大鼠股骨缺損的制備：（A）股骨處制備4mm全層骨缺損；（B）實(shí)驗(yàn)肢植入PLGA/HA支架

結(jié)果結(jié)果2.1 3D 打印 PLGA/HA 生物支架的形貌表征以 PLGA 和 HA 為原料，利用 3D 生物打印機(jī)制備而成的復(fù)合 PLGA/HA 生物活性支架，整體呈乳白色、15 mm × 3 mm × 3 mm 三維立方體結(jié)構(gòu)（圖 2.1A），材料表面均勻分布孔隙（圖 2.1 B），孔徑大小約為 300-500 μm[26]。支架在室溫下質(zhì)地較軟，可手動(dòng)塑形；溫度低于 10 ℃時(shí)，支架質(zhì)地變硬，可用銳器進(jìn)行切割，但是不能形成較復(fù)雜的個(gè)性化形態(tài)。將支架置于無(wú)菌培養(yǎng)皿中于 4 ℃保溫箱中保存。A B

圖 2.2 電鏡下 PLGA/HA 支架形態(tài)（A）；培養(yǎng) 14 天后,小鼠 MC3T3-E1 成骨細(xì)胞在支架上的生長(zhǎng)情況（B）；局部放大版（C）；比例尺如圖所示�！啊笔拘∈驧C3T3-E1 成骨細(xì)胞。2.3 雙側(cè)股骨離體標(biāo)本觀察術(shù)后第 3 天，可見(jiàn)實(shí)驗(yàn)肢中支架與骨缺損邊緣較緊密地結(jié)合（圖 2.3 a），近髓腔處肉芽組織增生明顯，對(duì)照肢骨缺損處空虛；術(shù)后 1 周，實(shí)驗(yàn)肢中支架周圍包裹大量致密軟組織(圖 2.3 b)，支架部分降解，對(duì)照肢見(jiàn)質(zhì)地疏松的肉芽組織，與周圍骨組織接觸較松，觸診易出血；術(shù)后 2 周，實(shí)驗(yàn)肢支架進(jìn)一步降解，完整充填缺損區(qū)，邊緣與周圍骨組織連續(xù)，對(duì)照肢肉芽組織膨大增生(圖 2.3 c)，正常骨組織有大面積充血區(qū)域；術(shù)后 3 周，實(shí)驗(yàn)肢支架完全降解，新骨代替支架部分，邊緣與正常骨邊緣連續(xù)(圖 2.3 d)，質(zhì)地較硬，有點(diǎn)狀充血區(qū)域，顏色較周圍正常骨組織深，對(duì)照肢有新骨生成，但較實(shí)驗(yàn)肢質(zhì)軟，且充血嚴(yán)重，與缺損區(qū)周圍骨質(zhì)界限明顯；術(shù)后 4 周，實(shí)驗(yàn)肢新生骨與正常骨組織界限進(jìn)一步減輕，對(duì)照肢新生骨顏色稍變淺，仍與正常骨有明顯界限(圖 2.3 e)，且新骨表面有不規(guī)則隆起；術(shù)后 5 周，實(shí)驗(yàn)肢缺

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞來(lái)源的胞外囊泡分離和鑒定[J]. 葛鎖華,馬永賓,芮星,張俊華,汪雪峰,蘇建華.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2017(10)



本文編號(hào)：3366301