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PI3K/Akt/mTOR介導(dǎo)的細(xì)胞自噬在鉭顆粒促成骨細(xì)胞增殖中的作用研究

發(fā)布時(shí)間:2021-08-10 09:52
  研究背景金屬鉭(Tantalum)具有熔點(diǎn)高、強(qiáng)度大、抗磨損、耐腐蝕等良好的物理性質(zhì)和極其穩(wěn)定的化學(xué)性質(zhì),且生物組織易在其表面生長(zhǎng),故又有“親生物金屬”之稱(chēng)。多孔鉭具有較高的孔隙率和表面能,以及良好的生物相容性和細(xì)胞浸潤(rùn)性,彈性模量更接近骨組織,被稱(chēng)為“骨小梁”金屬。研究表明.:表面載有多孔鉭涂層的植入體有利于形成三維骨整合,促進(jìn)成骨細(xì)胞的早期附著、增殖、分化和礦化,改善植入物的初期穩(wěn)定性。而植入體表面的涂層鉭顆粒與種植體周?chē)M織和細(xì)胞直接接觸,可引起一系列應(yīng)激反應(yīng),可能影響骨形成和骨吸收的動(dòng)態(tài)平衡。那么,鉭顆粒與成骨細(xì)胞直接接觸,對(duì)其增殖有什么影響呢?其機(jī)制如何?目前尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。研究目的本研究將小鼠MC3T3-E1成骨細(xì)胞與不同濃度的微米鉭或納米鉭顆粒共培養(yǎng)以模擬多孔鉭涂層種植體表面的微環(huán)境,分析鉭顆粒對(duì)細(xì)胞增殖的影響,以及PI3K/Akt/mTOR通路介導(dǎo)的自噬在鉭顆粒促增殖反應(yīng)中的作用。研究方法1.用透射電鏡、掃描電鏡、動(dòng)態(tài)光散射儀等對(duì)鉭顆粒的理化特性進(jìn)行表征。2.分別將不同濃度的微米鉭或納米鉭顆粒與MC3T3-E1細(xì)胞共培養(yǎng)6、12、24、48 h,通過(guò)CCK-8法摸索并篩... 

【文章來(lái)源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁(yè)數(shù)】:108 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

PI3K/Akt/mTOR介導(dǎo)的細(xì)胞自噬在鉭顆粒促成骨細(xì)胞增殖中的作用研究


圖1-1微米鉭顆粒的電鏡表征??Fi.?1-1?Characterization?of?tantalum?microarticlesTa-MPsbTEM?and?SEM??

透射電鏡,顆粒形狀,長(zhǎng)條,透射電鏡


2結(jié)果??2.1微米鉭表征??圖1-1為微米鉭顆粒的透射電鏡和掃描電鏡表征圖,可見(jiàn)微米鉭顆粒形狀不??規(guī)則,呈類(lèi)球形或長(zhǎng)條形,大小不均勻,粒徑從100?nm到數(shù)pm不等。圖1-2??為DLS表征結(jié)果,可見(jiàn)微米鉭顆粒的平均水合粒徑為1281?nm。??圖1-1微米鉭顆粒的電鏡表征??Fig.?1-1?Characterization?of?tantalum?micro?particles?(Ta-MPs)?by?TEM?and?SEM??(a)、(b)分別為微米鉭顆粒的透射電鏡和掃描電鏡表征結(jié)果,微米鉭顆粒形狀不規(guī)則,呈類(lèi)??球形或長(zhǎng)條形,大小不均勻。??II??

細(xì)胞形態(tài),放大圖,毒性等級(jí),細(xì)胞


消化后的MC3T3-E1細(xì)胞呈球形,接種后4?6?h開(kāi)始貼壁,細(xì)胞形態(tài)逐漸??舒展開(kāi)。在倒置顯微鏡下觀察,貼壁后的細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,呈梭形、三角形、??多角形等,高倍鏡下可見(jiàn)有突起從細(xì)胞周?chē)斐觯▓D1-3?a,b);隨后細(xì)胞繼續(xù)增??殖,密度逐漸增大,呈散在的簇狀生長(zhǎng),呈長(zhǎng)梭形或多角形,高倍鏡下細(xì)胞核??清晰可見(jiàn),細(xì)胞突起更多更長(zhǎng)(圖1-3?c,d);到對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期,細(xì)胞數(shù)量明顯增多,??呈集落樣生長(zhǎng),高倍鏡下見(jiàn)細(xì)胞突起互相連接成片,細(xì)胞更飽滿(mǎn)(圖1-3?e,f);??之后進(jìn)入生長(zhǎng)抑制期,細(xì)胞互相擠壓,呈鋪路石狀,細(xì)胞間隙變小,高倍鏡下??見(jiàn)細(xì)胞呈圓形,突起減少甚至消失,有時(shí)還會(huì)出現(xiàn)死亡細(xì)胞(圖1-3?g,h)。??2.4微米鉭顆粒對(duì)細(xì)胞增殖的影響??表1-3、1-4為不同濃度微米鉭顆粒處理不同時(shí)間后MC3T3-E1的0D值和??相對(duì)增殖率以及微米鉭顆粒的毒性等級(jí)。結(jié)果顯示,當(dāng)微米鉭SlOOfig/mL時(shí),??其毒性等級(jí)均S1級(jí);當(dāng)微米鉭=lmg/mL時(shí),其毒性等級(jí)幾乎都達(dá)到3級(jí);當(dāng)微??米鉭達(dá)到10?mg/mL時(shí)

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]人工種植牙載藥方式及材料的研究進(jìn)展[J]. 王培歡,劉洪臣.  口腔頜面修復(fù)學(xué)雜志. 2017(06)
[2]鉭及多孔鉭表面改性技術(shù)在組織工程學(xué)及口腔醫(yī)學(xué)的研究進(jìn)展[J]. 董偉,劉洪臣.  中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2017(02)
[3]新型多孔鉭人工種植牙[J]. 劉洪臣,路榮建.  中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2016(01)
[4]鉭基金屬生物材料在種植牙中的研究進(jìn)展[J]. 張桂蘭,劉洪臣.  中華老年口腔醫(yī)學(xué)雜志. 2015(05)
[5]選擇性自噬的研究[J]. 肖伊寧,蔣欣,呂佩源,李玲.  腦與神經(jīng)疾病雜志. 2015(04)

碩士論文
[1]TGF-β1在多孔鉭修復(fù)頜面骨缺損中的促骨生成作用研究[D]. 張倩.第三軍醫(yī)大學(xué) 2016
[2]堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子促進(jìn)多孔鉭顆粒修復(fù)頜骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 朱璨.第三軍醫(yī)大學(xué) 2016
[3]多孔鉭顆粒對(duì)頜骨缺損修復(fù)效果的實(shí)驗(yàn)研究[D]. 鐘建鑫.第三軍醫(yī)大學(xué) 2015
[4]鉭顆粒對(duì)人單核細(xì)胞毒性及分泌細(xì)胞因子影響的研究[D]. 張耀坤.南方醫(yī)科大學(xué) 2014



本文編號(hào):3333842

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