發(fā)布時(shí)間：2021-08-02 21:32

　　目的:研究不同分子量絲素蛋白對(duì)人永生化表皮細(xì)胞的增殖作用、紫外防護(hù)作用和對(duì)大鼠的UVB防護(hù)作用。方法:1. 將提取出來的絲素蛋白依據(jù)正交試驗(yàn)分組出來的不同條件用堿性蛋白酶降解,得出不同分子量的絲素蛋白;2. MTT法檢測UVB對(duì)Ha Ca T細(xì)胞的損傷實(shí)驗(yàn)的最佳劑量;MTT法檢測絲素蛋白對(duì)Ha Ca T細(xì)胞增殖的最佳濃度;3. MTT法檢測不同組絲素蛋白對(duì)Ha Ca T細(xì)胞的增殖影響。4. 建立Ha Ca T細(xì)胞UVB損傷模型。將Ha Ca T細(xì)胞以1×10⁴個(gè)/cm²的密度接種于培養(yǎng)板上,當(dāng)細(xì)胞生長到密度為70%以上時(shí)（約72 h）,將培養(yǎng)板取出,以備實(shí)驗(yàn)檢測,輻射劑量為130m J/cm²（1.97m W/cm²,66s）。5. 不同分子量組絲素蛋白對(duì)Ha Ca T細(xì)胞UVB損傷修復(fù)的影響細(xì)胞實(shí)驗(yàn)分七組:Control組、Damage組、SF組、MW1<3000Da組、MW=3.0×10⁴Da組、MW12<3000 Da組、MW=8.0×10³

【文章來源】：河北醫(yī)科大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：49 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

不同濃度絲素蛋白對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖的影響(*P<0.05)

21不同組絲素蛋白作用于HaCaT細(xì)胞后用MTT法檢測HaCaT細(xì)胞增殖情況，檢測結(jié)果示，絲素蛋白能促進(jìn)HaCaT細(xì)胞的增殖活性，不同分子量絲素蛋白效果有所不同。與空白對(duì)照組相比，各組絲素蛋白均促進(jìn)HaCaT細(xì)胞增殖，其中MW1<3000組的絲素蛋白明顯促進(jìn)HaCaT細(xì)胞增殖，其作用最強(qiáng)（P<0.05）；降解后絲素蛋白實(shí)驗(yàn)組MW1<3000組與未降解絲素蛋白SF組相比促進(jìn)HaCaT細(xì)胞增殖的效果更為明顯（P<0.05）。其它降解后絲素蛋白實(shí)驗(yàn)組與未降解絲素蛋白SF組相比，促進(jìn)HaCaT細(xì)胞增殖的效果略高于SF組，但差異不夠明顯，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（如圖2）。è′j圖2不同分子量組絲素蛋白對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖的影響(*P<0.05，□P<0.05)Fig.2EffectsofdifferentMWgroupofsilkfibroinonHaCaTcells’proliferation;*representforcomparingwiththeControlgroupP<0.05.□representforcomparingwiththeSFgroupP<0.05.2不同分子量絲素蛋白對(duì)HaCaT細(xì)胞的紫外防護(hù)作用2.1MTT法檢測UVB對(duì)HaCaT細(xì)胞的損傷實(shí)驗(yàn)的最佳劑量通過MTT法檢測可發(fā)現(xiàn)UVB對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖的影響比較明顯。如結(jié)果示，和無UVB輻射對(duì)照組比較，UVB輻射量130mj/cm2、150mj/cm2(P<0.05)分別降低HaCaT細(xì)胞存活率到71%和50%，呈劑量依賴性；UVB輻射量110mj/cm2HaCaT細(xì)胞存活率到85%，但差異不夠

22明顯，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由于本實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞凋亡情況不可以太大，選擇輻射劑量130mJ/cm2為UVB細(xì)胞損傷模型的輻射劑量（如圖3）。圖3不同組UVB劑量對(duì)HaCaT細(xì)胞增殖的影響(*P<0.05，□P<0.05)Fig.3EffectsofdifferentUVBirradiationonHaCaTcells’proliferation;*representforcomparingwiththeControlgroupP<0.05.2.2MTT法檢測不同分子量組絲素蛋白對(duì)HaCaT細(xì)胞UVB損傷修復(fù)的影響UVB輻射Damage組與正常對(duì)照Control組相比，UVB輻射顯著性抑制了HaCaT細(xì)胞的活性；絲素防護(hù)實(shí)驗(yàn)組與UVB輻射Damage組相比，絲素給藥后，HaCaT細(xì)胞的存活率顯著提高（如圖4）。

【參考文獻(xiàn)】：
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本文編號(hào)：3318311