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攜載質(zhì)粒/磷酸鈣粒子的聚合物纖維作為血管組織工程支架的研究

發(fā)布時間:2021-07-09 20:34
  聚合物電紡纖維具有連續(xù)均一、疏松多孔、高比表面積的納米結(jié)構(gòu),極好地模擬了細胞外基質(zhì),利于細胞的黏附和增殖。將攜載生物活性大分子的電紡纖維作為組織工程支架,在為細胞增殖和遷移提供支撐的同時,可通過釋放生物活性物質(zhì)調(diào)控細胞功能、促進細胞外基質(zhì)分泌以及加快組織再生。另一方面,血管化在組織工程中具有很大的挑戰(zhàn)性,再生組織能否得到充分的營養(yǎng)供應,是成功構(gòu)建完整的工程化組織的關(guān)鍵。據(jù)此,本論文研究了編碼血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)和堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)的質(zhì)粒與磷酸鈣(CaP)形成的復合納米粒子,構(gòu)建了攜載上述復合粒子的電紡纖維,評價了其作為血管組織工程支架促進血管再生的效果。通過反相微乳液法制備了CaP/pDNA復合納米粒子,粒徑約在110nm, pDNA包裹效率在95%以上,結(jié)果表明CaP粒子對質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)完整性有較好的保護作用,同時對質(zhì)粒有較好的控釋能力。細胞實驗結(jié)果表明CaP/pDNA復合納米粒子表現(xiàn)出較低的細.胞毒性、較高的轉(zhuǎn)染效率,顯示出CaP納米粒子作為基因載體的優(yōu)勢。通過靜電紡絲技術(shù)制備了載CaP/pDNA復合納米粒子的纖維,纖維形貌規(guī)整,所攜載的復合粒子均在纖維內(nèi)部。體... 

【文章來源】:西南交通大學四川省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
目錄
第1章 緒論
    1.1 血管組織工程
        1.1.1 組織工程血管的應用
        1.1.2 血管組織工程的研究進展
        1.1.3 攜載活性物質(zhì)血管組織工程支架的研究進展
    1.2 靜電紡纖維作為組織工程支架
        1.2.1 靜電紡纖維組織工程支架的特點及優(yōu)勢
        1.2.2 靜電紡纖維組織工程支架的研究現(xiàn)狀
        1.2.3 載活性物質(zhì)靜電紡纖維組織工程支架的研究進展
    1.3 磷酸鈣納米粒子作為基因載體
        1.3.1 非病毒基因載體的特點及優(yōu)勢
        1.3.2 載DNA磷酸鈣納米粒子的制備
        1.3.3 載DNA磷酸鈣納米粒子的轉(zhuǎn)染效果
    1.4 課題的立題意義和研究內(nèi)容
        1.4.1 課題的來源
        1.4.2 本課題的研究目的和意義
        1.4.3 本課題的研究內(nèi)容
        1.4.4 本課題的創(chuàng)新點
第2章 載PDNA磷酸鈣復合納米粒子的制備
    2.1 實驗部分
        2.1.0 實驗材料
        2.1.1 CaP/pDNA復合納米粒子的制備
        2.1.2 CaP/pDNA復合納米粒子的表征
        2.1.3 CaP/pDNA復合納米粒子中對pDNA的表征
        2.1.4 CaP/pDNA復合納米粒子的體外釋放行為
        2.1.5 CaP/pDNA復合納米粒子對細胞的生長行為
        2.1.6 CaP/pDNA復合納米粒子對細胞的轉(zhuǎn)染
        2.1.7 統(tǒng)計學分析
    2.2 結(jié)果與討論
        2.2.1 CaP/pDNA復合納米粒子的表征
        2.2.2 CaP/pDNA復合納米粒子中對質(zhì)粒DNA的表征
        2.2.3 CaP/pDNA復合納米粒子的體外釋放行為
        2.2.4 CaP/pDNA復合納米粒子對細胞的生長行為
        2.2.5 CaP/pDNA復合納米粒子對細胞的轉(zhuǎn)染效率
    2.3 本章小結(jié)
第3章 攜載CAP/PDNA納米粒子電紡纖維的制備及表征
    3.1 實驗部分
        3.1.1 實驗材料
        3.1.2 載CaP/pDNA復合納米粒子電紡纖維的制備
        3.1.3 載CaP/pDNA復合納米粒子電紡纖維的表征
        3.1.4 電紡纖維中pDNA的表征
        3.1.5 電紡纖維中pDNA的體外釋放
        3.1.6 細胞在載pDNA纖維膜上的接種
        3.1.7 細胞在載pDNA電紡纖維上的生長行為
        3.1.8 載pDNA纖維對細胞的轉(zhuǎn)染和表達
        3.1.9 載pDNA纖維膜上細胞外基質(zhì)的分泌
        3.1.10 統(tǒng)計學分析
    3.2 結(jié)果與討論
        3.2.1 CaP/pDNA復合納米粒子電紡纖維的形貌與結(jié)構(gòu)
        3.2.2 電紡纖維中pDNA的體外釋放行為
        3.2.3 電紡纖維對pDNA的保護作用
        3.2.4 細胞在纖維上的生長行為
        3.2.5 纖維上細胞的轉(zhuǎn)染效率
        3.2.6 纖維膜上細胞的基質(zhì)分泌
    3.3 本章小結(jié)
第4章 攜載CAP/PDNA納米粒子電紡纖維的體內(nèi)評價
    4.1 實驗部分
        4.1.1 實驗材料
        4.1.2 體內(nèi)植入實驗
        4.1.3 組織學觀察
        4.1.4 統(tǒng)計學分析
    4.2 實驗結(jié)果
        4.2.1 植入和取樣過程
        4.2.2 細胞與支架間的相互作用
        4.2.3 組織學的觀察
        4.2.4 血管形成的表征
    4.3 本章小結(jié)
全文結(jié)論
致謝
攻讀碩士學位期間發(fā)表的論文
參考文獻


【參考文獻】:
博士論文
[1]芯殼結(jié)構(gòu)電紡纖維攜載生物活性大分子的研究[D]. 楊曄.西南交通大學 2010

碩士論文
[1]載質(zhì)粒電紡纖維膜作為血管組織工程支架的研究[D]. 何淑慧.西南交通大學 2011



本文編號:3274450

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